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【求助】抗体纯化 降解

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【原创】抗体除聚体的一点儿心得

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  • zsplucky22
    zsplucky22  发布了新帖 想购买检测人源和鼠源单抗IgG的elisa试剂盒,求推荐 1259天前

    刚开始做单抗药物研发,转染细胞后,想检测抗体表达量多少,是不是用elisa方法更方便快捷,总不能每个都纯化出来看产量吧,所以想买个检测抗体的试剂盒检测。因为用的比较多,想买国产的,看了很多,厂家太多了,都不知道靠谱不靠谱,其中有三家给我的说明书都是一模一样的,连错别字都一样,吓得我不敢买啊,哪位有经验的朋友有经验,求推荐靠谱一点儿的试剂盒?多谢了~~~

  • zsplucky22
    zsplucky22  回复了帖子 求电荷异构体对抗体质量的影响的讨论 1342天前
    怎么证明酸性峰或者碱性峰是目标蛋白的电荷异质体而不是其他分子大小和电荷性质类似的杂质呢?仅靠SDS-PAGE或者是HPLC(SEC)能说明是单一组分吗? 现在我的问题是,我的一个蛋白,SDS-PAGE和HPLC检测结果都是高纯度的,但是等点聚焦跑出来有好几条带,而且这几条带粗细差
  • zsplucky22
    zsplucky22  回复了帖子 抗体专栏第二期:单克隆抗体分离纯化策略—亲和层析介质 2154天前
    看了这两篇文章受益颇多,又去看了一下GE生命科学部通讯,感觉很有意思,想问下楼主,怎么接受这个通讯的推送啊?
  • zsplucky22
    zsplucky22  : 抗体除聚体的一点儿心得 http://dxy.me/iErIJj 最近在做一个抗体的纯化,细胞培养液的产量还可以,达到80毫克每升,拿到了5升的发酵液。想着一次做完,就把发酵液超滤浓缩了,谁料到这成了悲剧的根源。走完proteinA 之后,洗脱液SEC检测,聚体含量达到了5%以上...
  • zsplucky22
    zsplucky22  回复了帖子 抗体纯化 降解 2289天前
    您很有经验啊。检测不是我做的,具体条件我也不太清楚,只知道用的是荧光检测器,今天送检了一个缓冲液做空白对照,结果32分钟出现了个峰,分析这个峰就应该是溶剂峰。
  • zsplucky22
    zsplucky22  : 抗体纯化 降解 http://dxy.me/YRNFZ3 本人刚刚做抗体纯化的工作,经验不是很多。最近在纯化一个抗体,感觉极其不稳定,在用proteinA洗脱之后,SEC检测结果,抗体的保留时间17分钟,14分钟有个峰应该是聚体,但在32分钟还有一个杂峰,越占5%,分析应该是降解...

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