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  • zhbyzd
    zhbyzd  的帖子被加了2分 270天前

    CRISPR/Cas9技术原理简介

    CRISPR/Cas9技术原理简介   最近几年基因编辑技术异常火爆,CRISPR/Cas9技术面世以后,弥补了传统基因编辑技术的诸多不足,使得基因的“任意编辑”变得越来越容易。也因此,CRISPR/Cas9技术当仁不让的成为基因编辑技术的“王牌”,...
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    zhbyzd  的帖子被扣了1分 598天前

    动物实验总结的之尾静脉注射心得

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    zhbyzd  回复了帖子 寻找2018年考中山学硕的研友 644天前
    建好群了吗,顶一下
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    zhbyzd  回复了帖子 谁有BDFACSDiva软件啊,我需要这个软件分析一个实验数据,求帮忙 721天前
    那你现在也还没有这个软件吗,我们做的样本是植物比较特殊,做出来的结果打不开,分析不了
  • zhbyzd
    zhbyzd  发布了新帖 真正的英雄主义是认清了医学的真相,还依然热爱它! 726天前

    真正的英雄主义是认清了医学的真相,还依然热爱它!

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    zhbyzd  回复了帖子 谁有BDFACSDiva软件啊,我需要这个软件分析一个实验数据,求帮忙 733天前
    他回你了吗,还没回我,急需这个软件,你也是要分析流式结果吗
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    zhbyzd  发布了新帖 TUNEL检测进阶版 734天前

    1. 对于贴壁细胞或细胞涂片:a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢,可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用4%多聚甲醛固定细胞30分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入含0.3% Triton X-100的PBS,室温孵育5分钟。f. 转步骤5。 2. 对于悬浮细胞或细胞悬液:a. 收集细胞(不超过200万细胞),PBS或HBSS洗涤一次。b. 用4%多聚甲醛固定细胞30分钟。为防止细胞聚集成团,宜在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。c. 用PBS或HBSS洗涤一次。d. 用含0.3% Triton X-100的PBS重悬细胞,室温孵育5分钟。e. 转步骤5。3. 对于石蜡切片:a. 二甲苯中脱蜡5-10分钟。换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分

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    zhbyzd  发布了新帖 临床医生如何避免落入“被造假”陷阱? 759天前

    古人云:“君子爱财,取之有道”,对于医学科研人员而言,可谓是“君子爱文,发之有道”。花了不少精力与时间准备的论文,却因一步之差落入“被造假”陷阱,撤稿后续的连琐反应大家应该很清楚,个人的名誉和前途往往就此中止,这是多么可怕的一件事!什么是撤稿?大部分的科研论文在发表前都会经过同行评审,虽说同行评审和编辑检查能够协助改善论文的质量并修正错误,但无法保证论文能完全零错误,也无怪乎有时候会在已发表论文中找到错误。一般来说,一些小的错误,比如通讯地址错误或是作者姓名更正、同行造假等这类的,期刊会采用勘误声明的方式,但是,如果论文存在的错误严重到会让人质疑研究本身是否可信,那么就需要撤稿。为什么要撤稿?当已发表论文中所存在的错误严重到无法使用勘误声明来处理时,才有可能被撤稿,根据发表道德委员会(Com

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    zhbyzd  发布了新帖 免疫荧光 826天前

    直接免疫荧光法的注意事项•  对荧光标记的抗体的稀释:要保证抗体的蛋白有一定的浓度;•  一般稀释度不应超过1:20,抗体浓度过低,会导致产生的荧光过弱,影响结果的观察。•  染色温度和时间需要根据各种不同的标本及抗原而变化;–  染色时间:从10 min到数小时,一般30 min;–  染色温度:多采用室温(25C),高于37C可加强染色效果,但对不耐热的抗原(如流行性乙型脑炎病毒)可采用0-2C的低温,延长染色时间。–  低温染色过夜较37 C 30 min效果好的多。•  试验时需设置下列对照:–  自发荧光对照(空白对照):标本加0.01mol/L,pH7.4的PBS代替一抗。–  阳性

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    zhbyzd  发布了新帖 细胞培养的一般过程与培养细胞的细胞生物学 826天前

    一、准备工作     准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。    二、取材    在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。   &n

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    zhbyzd  发布了新帖 荧光定量pcr实验步骤 827天前

    1、总RNA抽提(枪头和离心管均经过湿热灭菌,无RNA酶)   1)取匀浆器,加入1ml的Trizol Reagent,置冰上预冷。   2)取100mg组织,加入到匀浆器中。   3)充分研磨直至无可见组织块。   4)13000g离心10min取上清。   5)加入250 μl三氯甲烷,颠倒离心管15s,充分混匀,静置3min。   6)4℃下13000g离心8min。   7)将上清转移到一新的离心管中,加入0.8倍体积的异丙醇,颠倒混匀。   8)

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    zhbyzd  发布了新帖 细胞中酸性磷酸酶的定位 840天前

    背景及原理:细胞中存在着能分解磷酸酯的酶,其中最主要的是磷酸酯酶。这类酶按最适PH可分为两类:1.PH在9.5左右的条件下发挥作用,称为碱性磷酸酶;另一类在PH5.0左右的条件下发挥作用,称为酸性磷酸酶。当酸性磷酸酶与其底物作用时,能水解磷酸酯使其释放出磷酸基,磷酸基进而与溶液中存在的铅盐结合形成无色的磷酸氢铅沉淀物,当用黄色的硫酸铵作用该沉淀时可形成黄棕色或棕黑色的硫化铅沉淀,从而确定细胞中酸性磷酸酶所处的部位。酸性磷酸酶广泛分布于集体各种组织细胞内,主要存在于细胞的溶酶体内,常作为溶酶体的标志酶,此外,还存在于内质网和细胞质内。当细胞中核算和蛋白质代谢活动增加时,酸性磷酸酶活性增强。酸性磷酸酶还参与脂类代谢。因此,它在疾病、免疫反应和细胞损伤与修复过程中具有一定的生物学意义。

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    zhbyzd  发布了新帖 中洪博元细胞凋亡检测操作步骤 852天前

    细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体,与核小体片段形成夹心结构,可特异性检测细胞溶解物中的

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    zhbyzd  回复了帖子 分手了,碎碎念。。 866天前
    我也想知道,我觉得挺美好的呀
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