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求教大神pcr

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  • yuanfenfen
    yuanfenfen  回复了帖子 求助:细胞成球实验 34天前
    亲是不是做过,需不需要添加B27?
  • yuanfenfen
    yuanfenfen  发布了新帖 求助:细胞成球实验 34天前

    最近,小白一个,在做细胞成球实验,所用细胞系是huh7(一种肝癌细胞)。用了无血清的DMEM添加了bFGF和EGF,培养了8天,但未见成球现象(其实本人之前没做过成球实验,不知道成球的细胞表型为何样),请专业小哥哥、小姐姐给予指导,最好带有成球图片。感激不尽!!

  • yuanfenfen
    yuanfenfen  回复了帖子 载体克隆 294天前
    提前谢谢啦!!我会试一下酶切过夜。如果有效,感激不尽。
  • yuanfenfen
    yuanfenfen  发布了新帖 载体克隆 294天前

    最近克隆载体,载体大小5000bp,选用的NEB的BamHI和Xbal内切酶,有时候4摄氏度酶切过夜,有时候最适温度四到六个小时,连接4小时,TAKARA的连接酶。转化后菌液pcr,引物是针对目的带的特异性引物,得到目的条带的概率很低,四五十个点才能得到一个,而且最近发展pcr后电泳跑胶,胶孔里边都是亮带,前前后后做了两个月了,着急的要死,还天天被老板骂和嫌弃,请大神帮我一下,感激不尽!!

  • yuanfenfen
    yuanfenfen  发布了新帖 求解pcr结果为什么跑成这样? 1099天前

    大神们能否解答pcr为什么会出现这种结果?

  • yuanfenfen
    yuanfenfen  发布了新帖 我们pcr拖尾好严重,是怎么回事啊?? 1107天前

    求解为什么拖带这么严重。

  • yuanfenfen
    yuanfenfen  回复了帖子 求教大神pcr 1120天前
    最可能是什么原因呢?DNA没有降解。
  • yuanfenfen
    yuanfenfen  回复了帖子 DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳 1120天前
    意思是可以回收了??
  • yuanfenfen
    yuanfenfen  发布了新帖 DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳 1121天前

    大神们DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳,DNA可以做回收吗?

  • yuanfenfen
    yuanfenfen  发布了新帖 求教大神pcr 1123天前

    新手,最近做了pcr,跑电泳为什么有的样有条带,有的没有?

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