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  • yixiu1hao
    yixiu1hao  回复了帖子 复制型慢病毒的检测 370天前
    有具体的实验方案吗,急求,谢谢
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  悬赏2丁当求助 1008天前

    病毒衣壳上蛋白检测

  • yixiu1hao
    yixiu1hao  回复了帖子 电转染 1015天前
    我做的能把质粒转进去的电压范围是750-1000v,先看哪个是主要矛盾,最重要的是把质粒转进去,再优化条件,电转染过程中细胞死是正常的,降低死亡数目就要靠优化条件来完成,或者起始细胞用多一点。我个人觉得还是用转染试剂比较好,既方便转染效率也高
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  加入了调查派 1020天前
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  回复了帖子 蛋白复性 1022天前
    蛋白浓度没有很高,蛋白等电点9.7左右,透析液PH8.5左右,同学说蛋白透析的缓慢过程,我每次都是透析16h以上换液,太久了吗?还有就是我用6M尿素透析时降低盐离子浓度立马出现沉淀是怎么回事啊?望指教
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  发布了新帖 蛋白复性 1029天前

     我现在在做蛋白复性,已纯化好的蛋白目前在50mMTris,500mMNaCl的缓冲液中,含8M尿素,我第一步用6M尿素、20mMTris、20mMNaCl透析时很快出现沉淀,后来我把NaCl浓度又升高到500mM,6M尿素和4M尿素透析没有沉淀,但是到2M尿素时又有沉淀出现,降低或升高NaCl浓度均不起作用,继续用1M尿素透析沉淀越来越多,透析完成后离心跑电泳目的蛋白几乎全部沉淀,不知该咋办了,求各位大神指教

  • yixiu1hao
    yixiu1hao  悬赏5丁当求助 1084天前

    病毒荧光

  • yixiu1hao
    yixiu1hao  回复了帖子 病毒蚀斑形成实验 1085天前
    我现在已经做出来了,经PCR鉴定重组病毒也比较纯了
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  回复了帖子 用transwell 做细胞共培养怎么做 1095天前
    你好,请问你有在做共培养实验吗,我做过一次,好像transwell不能完全把细菌挡住,使得细菌在细胞里面飞长,细胞都屎光了,郁闷
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  发布了新帖 蛋白电泳条带异常 1128天前

  • yixiu1hao
    yixiu1hao  发布了新帖 凝血因子III即组织因子 1190天前

    Vero细胞会不会表达凝血因子III即组织因子

  • yixiu1hao
    yixiu1hao  发布了新帖 病毒纯化 1231天前

    亲爱的战友们,我在做病毒纯化,遇到个烧脑的问题,一代二代挑斑还行,三代就不行了,空斑迟迟不出来,病毒量也不少,郁闷,希望好心人帮帮我啊,解救我于水深火热之中,不胜感激

  • yixiu1hao
    yixiu1hao  回复了帖子 流式细胞术与ELISA 1232天前
    @行知9051,你是用什么在细胞上打孔的,我们老师说用TritonX-100,是吗,如果是的话,怎么用呢
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  回复了帖子 带有GFP的质粒转染入细胞后提取的蛋白呈绿色 1233天前
    请问楼主转了多少量的细胞,蛋白表达这么高
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  回复了帖子 慢病毒转染K562细胞,目的基因不表达蛋白 1233天前
    请问楼主,最后是用什么方法检测到了目的蛋白的表达呢,还是WB吗?
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  回复了帖子 细胞转染WB检测不到目的蛋白 1234天前
    楼主,问题解决了吗,我也遇到了这个问题,而且杂带多,郁闷,如果您解决了,请指教一下吧,不胜感激
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  发布了新帖 重组病毒的筛选 1247天前

    用红荧光作为筛选标记,一直有荧光并出现蚀斑,认为比较纯了,提取病毒DNA进行PCR鉴定,竟然没有重组上,郁闷,求大神指教,万分感激

  • yixiu1hao
    yixiu1hao  发布了新帖 X-gal的颜色 1315天前

    请教一下,配置好的X-gal是什么颜色的?怎么我看到有的是黄绿色有的是白色呢

  • yixiu1hao
    yixiu1hao  回复了帖子 病毒蚀斑形成实验 1326天前
    我要在病毒混合液中挑重组病毒,有重组病毒的细胞显示蓝色,无重组病毒的细胞无色。 另外想请教一下,我压完斑后感觉细胞形态发生了变化,感觉死了一样,是怎么回事呢
  • yixiu1hao
    yixiu1hao  发布了新帖 病毒蚀斑形成实验 1326天前

    本人使用质粒共转染293细胞包装病毒后欲做蚀斑形成实验,质粒载体为pCBlac-Z,用含X-gal 的低熔点琼脂压斑,镜下可以看见蓝斑,但就是形不成肉眼可见的蓝斑。郁闷ing,希望大神指教一下

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