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  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 求教C57小鼠骨髓基质细胞培养CFU-F 34天前
    我觉得应该孵箱的条件也是一个问题,我又开始做这个实验了,设置孵箱温度37摄氏度,CO2为5%,O2为5%.试试这个条件。这个条件在Plos One以及一个很早发表的文章中有提及。
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 求教C57小鼠骨髓基质细胞培养CFU-F 63天前
    哇,都没有人来回答,自己顶一下,希望做过的大神看过来能给一些建议或者意见
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 求教C57小鼠骨髓基质细胞培养CFU-F 64天前
    我们已经试过比较多的血清了,用的Hyclone得DMEM,长不起来,上一张图使用的F12/DMEM(1:1)来养得,用的国产TBD得FBS。还是试过蛮多血清的,但是只有这一种搭配长出来了。
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 求教C57小鼠骨髓基质细胞培养CFU-F 65天前
    这是其中一张图片里面取得一个集落,不知道是不是,请各位有经验的大神鉴别
  • yishiontse
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 如何进行骨髓干/祖细胞集落(CFU)培养 ?? 65天前
    我们是要做间充质细胞的集落,不知道大神有没有做过相关的实验,可以在原材料比如血清和培养基方面给一些建议呢?
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 初次养的鼠BMSC,各位大神进来看下是不是 141天前
    如何防止老化呢?
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 培养小鼠BMSC的请留步!!! 167天前
    @endo-sherry师姐你现在培养出来了吗? 我现在也是面临你这个问题就是传代一次以后很多触角,而且本身P0的时候贴壁的细胞显得很杂,如下图:
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 小鼠骨髓间充质细胞原代培养及传代之flamerking图文版 170天前
    minibum 这个文件下载好像需要什么解压工具,您有时间可以加个QQ转发给我一下吗?小女子在此感激不尽啊!
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 小鼠骨髓间充质细胞原代培养及传代之flamerking图文版 170天前
    可以加你QQ或者微信了解一下这个具体步骤吗?由于小女子刚开始做骨髓间充质细胞培养所以很多东西都不太明白,希望得到大神指导。
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 小鼠骨髓间充质细胞原代培养及传代之flamerking图文版 170天前
    各位大神,我是研一的实验菜鸟,最近在提原代的骨髓间充质细胞,但是自己提的细胞总是达不到文献中提到的以及各位大神们在站里发的鱼群状漩涡状生长的长梭型的样子,我提取小鼠原代的方法跟大家都差不多,基本上是取样的小鼠数量一般在2只左右,乙醚麻醉后脱颈处死,我们未在酒精中泡只是用75%酒精将整个小鼠浸湿,然后再手术铺巾上处理,因为解剖能力较差,一般都会将小鼠的腿给卸了在PBS中冲洗3次后再用新的眼科剪将多余的肌肉除去,放入冲洗液中浸泡(2%FBS[TBD的血清]+97%a-MEM[Hyclone]+1%PS[Hyclone]+0.1%beta-巯基乙醇)直至两只小鼠解剖完成。继续用新的眼科剪剪掉股骨以及胫骨两侧的干骺端,运用1ml的注射猛冲骨髓腔直至骨髓腔变为白色。用200目的过滤器过滤细胞,收集滤液
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 小鼠骨髓间充质细胞原代培养及传代之flamerking图文版 170天前
    各位大神,我是研一的实验菜鸟,最近在提原代的骨髓间充质细胞,但是自己提的细胞总是达不到文献中提到的以及各位大神们在站里发的鱼群状漩涡状生长的长梭型的样子,我提取小鼠原代的方法跟大家都差不多,基本上是取样的小鼠数量一般在2只左右,乙醚麻醉后脱颈处死,我们未在酒精中泡只是用75%酒精将整个小鼠浸湿,然后再手术铺巾上处理,因为解剖能力较差,一般都会将小鼠的腿给卸了在PBS中冲洗3次后再用新的眼科剪将多余的肌肉除去,放入冲洗液中浸泡(2%FBS[TBD的血清]+97%a-MEM[Hyclone]+1%PS[Hyclone]+0.1%beta-巯基乙醇)直至两只小鼠解剖完成。继续用新的眼科剪剪掉股骨以及胫骨两侧的干骺端,运用1ml的注射猛冲骨髓腔直至骨髓腔变为白色。用200目的过滤器过滤细胞,收集滤液
  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 小鼠骨髓间充质细胞原代培养及传代之flamerking图文版 170天前
    哇塞,这些都太全了,我现在在做小鼠间充质细胞的培养,但是总是出现小团块状的细胞,但是其他形状感觉还行,希望广大战友确认一下这个是不是间充质细胞
  • yishiontse
    yishiontse  发布了新帖 求大神指教用骨髓基质细胞做CFU-F试验所需的血清和培养瓶类型 298天前

    实验室近期做骨髓基质细胞的CFU-F预试验,用的是Gibco的干细胞血清和T25培养瓶,我们的接种浓度是:1.5x10^6/5ml的密度,但是出现大量死亡的现象。求助各位做过CFU-F试验的大神指教用什么容器和血清进行培养?

  • yishiontse
    yishiontse  回复了帖子 BMSC原代培养 298天前
    想问下学长一般用的什么血清来培养MSCs呢?做CFU-F的培养瓶用的是什么品牌的?有没有出现细胞大量死亡的现象呀?
  • yishiontse
    yishiontse  加入了调查派 626天前

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