本人实验新手,在磁珠分选人外周血CD4+T细胞的过程中遇到几个问提,我采用的方法是先用淋巴细胞分离液分离人外周血pbmc,然后用美天旎的CD4+T细胞阳选试剂盒按说明书进行分选。1.分选好的细胞进行流式纯度分析显示CD4+T细胞占了70%左右,且死细胞比较多,不知道问题出在哪?2.分选好的细胞中有成团的细胞,我用的是肝素抗凝血,想问下是不是换用EDTA抗凝比较好?3.分选后的细胞进行培养,加了5ug/ml的conA,培养40h感觉细胞没有长,想问下你们加了什么刺激剂?来个大神帮我解个惑吧
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目前要做人外周血CD4+T细胞磁珠分离,目前倾向于使用美天旎的产品,可第一次做,实验组又没人使用过这个产品,求各位大神指教,官网的电话打不通