登录| 注册

丁香客

选择模板

更多 发表的帖子

4857

浏览

【求助】western 跑出的Marker条带弯曲是怎么回事?

回帖:4    收藏:2    投票:0

1845

浏览

【求助】CIK培养

回帖:8    收藏:1    投票:0

2364

浏览

更多 最新动态

  • xfq1212
    xfq1212  加入了调查派 1577天前
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 关于SiRNA导入细胞需不需要载体 2348天前
    siRNA可以直接和脂质体混合后转染到细胞中,不用构建到质粒中,构建进去的是shRNA质粒,不一样了。 G2这个细胞用比较难转染,你做实验的时候要多做几个转染浓度,找一个最好的转染条件
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 siRNA 2348天前
    吉玛性价比最高. 现在做转染不用做阳性的免疫荧光,用他家的FAM-NC就可以,是标记有绿色荧光物质的,可以转染后直接放荧光显微镜下观察
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 我想扩增一个lncRNA全长,以便制作lncRNA的载体 2551天前
    可以找公司合成全长lncRNA,然后让他们构建到自己想要的质粒中,扩增质粒不就扩增了全长lncRNA么?
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 lncRNA的沉默 2551天前
    用siRNA是可以做lncRNA的,只是不如mRNA干扰好做,所以一般公司不做保证(公司是从效益上考虑,不会冒险),但做是可以做的。
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 求助:siRNA转染组比对照组有有更高的目的基因的表达 2551天前
    应该是转染效率太低了,转染效率低导致进入细胞的siRNA比较少,刺激细胞产生应激反应,导致目的基因不降反而升高,转染效率高的话就没事了。 PS:如果转染效率很好,但没有干扰,是序列不行,要换干扰序列。
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 siRNA能否直接局部注射? 2551天前
    有用于体内实验的转染试剂呀,或者用加一些修饰,如胆固醇修饰,转染效率会增加
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 我四十年的行医历程 2587天前
    您没有权限阅读该帖子
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 便秘解 2601天前
    您没有权限阅读该帖子
  • xfq1212
    xfq1212  :#星级医院引争议#提高医疗条件和对平民的关心是最重要的,百万钢琴不如果去救没钱看不起病的鲜活生命来的更实在
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 该怎样回答审稿人关于2个siRNA 序列应该应用于大部分实验的问题? 2617天前
    那就直接说用了某种序列在两种细胞中都有效,不要提其他没有用的干扰片段,特别是不要提那个在一种细胞有效,在另一种无效的片段。
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 siRNA如何稀释 2617天前
    都写上是10uM了,应该是溶液呀
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 关于siRNA和siRNA;siRNA和质粒共转染的问题 2617天前
    两种一起转染还可以,但3种一起转染,效果应该不好,如果每一种加的量少了,可能达不到效果,如果加的量多,转染试剂用的量也要相应增加,对细胞的毒害作用会大,细胞状态不好,后期效果也会不好的。
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 急!求助siRNA载体构建引物 2617天前
    构建方法:先找靶基因干扰序列NNN,然后是做它的反义链nnn,后面加T6结构,中间用loop环连接,在两端加上酶切位点XXX。 即XXX-NNN-loop环-nnn-TTTTTT-XXX 去公司合成双链,拿回来酶切一下,和切过的载体连接,挑个克隆就行了。 注意:如果siRNA的第...
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 急!求助siRNA载体构建引物 2670天前
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 怎样选siRNA序列 2670天前
    1.siRNA设计原则 1.siRNA双链末端的热稳定性, 2.siRNA双链的反义链末端最后两个碱基的选择,即:20,21位置碱基的选择 3.siRNA双链的反义链第1和第19位置的碱基的选择 4.siRNA反义链的G+C的含量 5.siRNA反义链的第2位和第18位置的碱基的...
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 siRNA选择 2670天前
    做siRNA实验选择1、看您的只要目的,如果要做稳定细胞株筛选,就要用载体,如质粒、lentivirus,如果只要瞬转,这三种都还行。2、看您的细胞转染情况,如果细胞比较好转染,用siRNA oligo或者质粒都行,如果不好转染,要用lentivirus。很多实验没有效果都是因为...
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 构建shRNA后有个问题,求助 2707天前
    图片是不是应该旋转90度看的?
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 有关microrna的mimic 及质粒 2707天前
    个人感觉 买吉玛的套餐合算,保证有70%的干扰效果,没有干扰还重新合成,再不行还能退款,投诉处理速度特别快。但单条购买的就没有保障了。
  • xfq1212
    xfq1212  回复了帖子 有无用过天根、吉玛、宝生物的同学?这些试剂怎样啊? 2707天前
    用过吉玛的,他们的盒子都是验证过的,很好用

关于我们|联系我们|版权声明|资格证书|丁香志|加盟丁香园|友情链接 丁香园旗下网站: 丁香园|丁香通| 人才|会议|药学|博客