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  • wx231
    wx231  回复了帖子 (求助)有关MTT配药移液枪取无水乙醇做溶剂 12小时前
    能写一下你配药全流程?
  • wx231
    wx231  回复了帖子 关于HepG2 3天前
    药筛如果要做不同种类细胞间比较的话建议统一一下培养基,我以前实验室除了成纤维用专门的培养基,其他癌细胞都用DMEM高糖,培养效果都是不错的。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 线粒体膜电位分析 5天前
    参考一下
  • wx231
  • wx231
    wx231  回复了帖子 流式细胞仪测线粒体活性氧ROS 数据怎么处理啊 6天前
    你的fsc,ssc上也没有门,就一个p1,说实话我也不懂你这个p2p3怎么出来的。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 流式细胞仪测线粒体活性氧ROS 数据怎么处理啊 6天前
    FSC,SSC这个图用来圈门,你的门叫什么就用哪个值。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 流式细胞仪测线粒体活性氧ROS 数据怎么处理啊 6天前
    不好意思,没注意看是线粒体。查了一下你的染料激发510发射580,这个参数FITC,PE都可以用,PE通道会更好一点。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 流式细胞仪测线粒体活性氧ROS 数据怎么处理啊 6天前
    孵DCFH-DA,用FITC检测,一个密度图一个柱状图。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 小白鼠实验有风险,做实验需谨慎!不要拍视频! 9天前
    蝮蛇,皖南地区最毒的蛇了。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 MDA-MB-231细胞的培养问题 10天前
    我以前用的是DMEM高糖+10%FBS+1%双抗,5%二氧化碳,细胞长势很好。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 细胞培养出现不明黑色大体积线状物 10天前
    没遇到过这种情况,推测就是操作时候台子里吹进去的脏东西,不然就是板子上的自带的痕,不耽误培养的话就继续养着呗,也许换个板子就没了。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 ROS活性氧检测疑问 11天前
    skey-li 六孔板的细胞处理后加到96孔板里3个孔或者5个孔,数据分析时是把这几个孔的平均值当做这个孔的数据,也没有改变分组啊6孔中的每个孔都是一个培养体系,后面的任何检测不能脱离这个体系。原本这个孔里面各种状态的细胞都有,分了就混掉了。懂?
  • wx231
    wx231  回复了帖子 细胞培养 12天前
    很好的血清了,如果是养了很久的细胞那就丢了重新复苏。如果是新买的,和说明书生长描述不一致那就联系销售方看看能不能换呗,
  • wx231
    wx231  回复了帖子 细胞培养 12天前
    在用的血清多少钱一瓶
  • wx231
    wx231  回复了帖子 ROS活性氧检测疑问 12天前
    我觉得不能这么操作,6孔中每个孔是一个样品,任何处理都是对这个孔来说的,数据也是这个孔的数据,你把他分到96孔,实验不能这么做,这是原则问题了。加药处理后一段时间细胞会变圆,状态变差,不用管,测ros选择合适的时间很重要,因为他产生消失是很快的。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 ROS活性氧检测疑问 13天前
    skey-li 你好,想请问用多功能酶标仪检测前是否要细胞计数各组细胞量相同,如果加药处理后细胞部分死亡,这时候还要各组细胞量相同吗还有我看到你的下面有说荧光值小,加探针,洗都要轻轻来,整个过程尽量避光。吸可以用小注射器,沿着边缘慢慢吸。我不知道你知不知道,多功能酶标仪测之前可以设置gain值,适当增大,你的数据也会变大。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 关于测不同糖浓度下细胞活性的问题 13天前
    我觉得你这个波动组,设置在浓度实验里是不合理的,数据处理也不行,因为你波动组的对照只有一个,没有说服力。单独出来,搞一个波动浓度梯度不是更好?譬如说我的波动组今天上午要换50的培养基,那我的对照也要一起换,不过对照的浓度是不变的,只是突出一下我对照和实验组操作是一致的。这个波动组的对照浓度应该是0-50的中间值,25。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 ROS活性氧检测疑问 13天前
    原则上需要进行细胞计数,我以前做的都没有计数。小培养瓶一瓶长满铺两个96孔,两瓶长满铺两个6孔就可以了。计数只是估计一下我每个孔里有多少细胞,保持每孔细胞量一致靠的是你铺板的技术了,而且黑板铺进去也不能在倒置镜下看,就是看熟练度了。加药后细胞死不死就管不着了,我以前做的光敏性的药,加完药三个小时,光照后立即测Ros。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 关于测不同糖浓度下细胞活性的问题 13天前
    还有就是我不知道你设置波动组有什么意义。。
  • wx231
    wx231  回复了帖子 关于测不同糖浓度下细胞活性的问题 13天前
    我不知道你的对照是什么意思,你要测试糖浓度对细胞生长影响,那你的对照就是没有糖。第一天铺板,第二天把原来的培养基吸出,换上你配好的糖浓度不同的培养基。你的C组,保持操作一致就行了。

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