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  • whilson
    whilson  回复了帖子 反应器问题 1370天前
    如果觉得罐子pH异常,会取样测离线pH,但动作要快,如果差异较大,可以用sample correction进行校正。pH电极只要没问题,不一定要2年就要换吧。
  • whilson
    whilson  的帖子被加了1分 1469天前

    回复:单抗细胞培养发酵工艺如何去做?

    不知道你这里提到的单抗是否是similar,如果是,那么工艺的优化时刻要围绕着质量(aggregate,PI,charge,glycan等)进行,同时也要兼顾到活性数据,表达重要但肯定不是第一位的。在确定一个可以接受的表达量而且质量在接受范围之内后,再进一步优化补料和反应器条件来...
  • whilson
    whilson  的帖子被加了2分 1469天前

    回复:关于生物反应器乳酸和pH的讨论

    cyzhgt 根据@ggghhhh @六年一世 @pcpccp @rxh813 的建议,我对培养条件做了一下改变:(1)改用大泡通气,溶氧电极用空气校正,设置为60%;(2)搅拌速度改为100rpm;(3)pH设置为6.8,上罐时pH为7.1,暂不调节(ACID 泵不接酸)。细胞...
  • whilson
    whilson  的帖子被加了1分 1471天前

    回复:中国biosimilar的面临差距和策略

    以titer来评定biosimilar的时代过去了,现在更看重的是质量和安全性,这是药品的第一位,否则表达再高也没用,这些高表达的培养模式有一些是perfusion
  • whilson
    whilson  回复了帖子 中国biosimilar的面临差距和策略 1481天前
    以titer来评定biosimilar的时代过去了,现在更看重的是质量和安全性,这是药品的第一位,否则表达再高也没用,这些高表达的培养模式有一些是perfusion
  • whilson
    whilson  回复了帖子 关于生物反应器乳酸和pH的讨论 1482天前
    我以前也做过一些细胞株筛选的工作,现在做工艺感觉更加深刻。给你一些建议吧,也是我个人的理解:1. DO范围在20-80%之间一般对细胞和蛋白质量影响不大,通常设置在30-50%; 2. 正常CHO的生长,乳酸积累的最高点在3-5天,以后要么缓慢上升,要么开始消耗,你的最高点稍微...
  • whilson
    whilson  的帖子被加了1分 1483天前

    回复:单抗在1L反应器和5L反应器中的G1F比例差异很大是咋回事啊?工艺一样的

    qefrfwfw 嗯什么都一致,就是G1F不一样G1F既然相差两倍,其他糖型怎么可能一致呢?你说的应该是G1F下降两倍吧,那么G0F是不是上升了呢?有些克隆对pH比较敏感,建议你仔细看看1L和5L的pH profile到底是不是一致的。
  • whilson
    whilson  的帖子被加了1分 1484天前

    回复:关于生物反应器乳酸和pH的一些问题,求大虾指点

    六年一世 非常专业的回复!有一个问题请教下,现在一次性反应器自带的sparger是微泡的,所以不可避免的对细胞损害较大,针对微泡在实际应用中有什么好的建议吗?谢谢! 现在的一些SUB都是dual sparger,不管是sartorius, ge 还是hyclone,不同的是孔径大...
  • whilson
    whilson  的帖子被加了1分 1484天前

    回复:关于生物反应器乳酸和pH的一些问题,求大虾指点

    cyzhgt 在生物反应器的细胞状态是比在摇瓶的差。通气方式是持续通入空气,低于50%就自动通入氧气,这样做的原因主要是不持续通空气pH降得很快,7.5%的碳酸氢钠3天用了150ml。下次实验试一下转速调到100或者120rpm看看效果怎么样。是用纯氧校正100%,斜率是150n...
  • whilson
    whilson  回复了帖子 关于生物反应器乳酸和pH的讨论 1484天前
    现在的一些SUB都是dual sparger,不管是sartorius, ge 还是hyclone,不同的是孔径大小和搅拌桨的设计不同。可以考虑在基础培养基中加入一定量的消泡剂,比如20ppm,因为细胞受到的损伤大多是因为液面的泡沫爆炸。还可以先用大泡供氧,细胞长起来以后再换...
  • whilson
    whilson  回复了帖子 关于生物反应器乳酸和pH的讨论 1484天前
    1. CHO-S细胞的生长一般不是问题,个人感觉你的转速偏低,提高转速之后,再计算叶尖速度,一般低于1.2m/s不用担心剪切力的问题。 2. 溶氧的校正一般是用空气而不是纯氧校正,通常使用的30-50%就是用空气校正之后的比例,所以你的50%肯定会偏高,从而使得氧气通气量大增。 ...
  • whilson
    whilson  回复了帖子 单抗细胞培养发酵工艺如何去做? 1485天前
    这是用qbd观念做,如果有时间,做一下肯定更好
  • whilson
  • whilson
    whilson  回复了帖子 单抗在1L反应器和5L反应器中的G1F比例差异很大是咋回事啊?工艺一样的 1485天前
    G1F既然相差两倍,其他糖型怎么可能一致呢?你说的应该是G1F下降两倍吧,那么G0F是不是上升了呢?有些克隆对pH比较敏感,建议你仔细看看1L和5L的pH profile到底是不是一致的。
  • whilson
    whilson  回复了帖子 单抗细胞培养发酵工艺如何去做? 1485天前
    不知道你这里提到的单抗是否是similar,如果是,那么工艺的优化时刻要围绕着质量(aggregate,PI,charge,glycan等)进行,同时也要兼顾到活性数据,表达重要但肯定不是第一位的。在确定一个可以接受的表达量而且质量在接受范围之内后,再进一步优化补料和反应器条件来...

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