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【求助】有关STAT3以及P-STAT3的western blot

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【求助】AO/EB 染色步骤

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  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 丁香园文献互助平台”申诉处理贴 9天前
    您没有权限阅读该帖子
  • szxy1111
    szxy1111  的帖子被加了1分 24天前

    回复:求助,在杀大鼠是二氧化碳麻醉和水合氯醛麻醉差别在哪里

    joy5BYV 想杀大鼠,但是麻醉方式不知道取哪个,还有眼球取血和腹主动脉取血有什么区别吗 如果是想杀大鼠,用CO2很方便,也很符合伦理。如果是仅仅瞬时麻醉的话,建议用异氟烷类,并用气体麻醉机来操作,比较容易控制吗麻醉的深度。
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 求助,在杀大鼠是二氧化碳麻醉和水合氯醛麻醉差别在哪里 24天前
    joy5BYV 想杀大鼠,但是麻醉方式不知道取哪个,还有眼球取血和腹主动脉取血有什么区别吗 如果是想杀大鼠,用CO2很方便,也很符合伦理。如果是仅仅瞬时麻醉的话,建议用异氟烷类,并用气体麻醉机来操作,比较容易控制吗麻醉的深度。
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 大鼠灌胃低中高剂量 25天前
    一般情况下是通过同等体积,不同浓度的方式来测试,一般给药体积在10ml/kg
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 比格犬采血SOP,欢迎拍砖! 25天前
    dxy_08zj30ew 请问实验成年比格犬大约多少钱一只?大佬们是在哪里订购的动物,想要一个购买电话~谢谢 http://dxys.com/sMK4xL
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 比格犬采血SOP,欢迎拍砖! 25天前
    dxy_08zj30ew 请问实验成年比格犬大约多少钱一只?大佬们是在哪里订购的动物,想要一个购买电话~谢谢
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 如何从脾脏中分离CD4+、CD8+等T细胞,求操作步骤 29天前
    给我一个十八岁 szxy1111 一、获得脾脏单细胞悬液: 1.取BALB/c小鼠1只,CO2安乐死小鼠,立即浸入75%乙醇中浸泡5分钟; 2.在超净工作台中进行无菌操作:将小鼠腹部剪开一个小口,暴露左侧腹部,用无菌镊子取出小鼠脾脏,放入含有预冷的RPMI-1640培养液的培养皿中,剪去多余的结缔组织和脂肪; 3 用磨砂玻片轻轻研磨脾脏至乳糜状液体,70 µm的尼龙膜过滤,得到小鼠脾脏单细胞悬液,1500rpm,4℃离心10min,弃去上清; 4. 加入红细胞裂解液2~3mL,重悬细胞后处理5~10min,加入完培6mL终止,1500rpm,离心10min,弃去上清; 5. 用5~10倍红细胞裂解液体积的PBS清洗2遍,每次1500rpm,离心10min; 6.细胞沉淀用5mL的1
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 如何从脾脏中分离CD4+、CD8+等T细胞,求操作步骤 30天前
    一、获得脾脏单细胞悬液: 1.取BALB/c小鼠1只,CO2安乐死小鼠,立即浸入75%乙醇中浸泡5分钟; 2.在超净工作台中进行无菌操作:将小鼠腹部剪开一个小口,暴露左侧腹部,用无菌镊子取出小鼠脾脏,放入含有预冷的RPMI-1640培养液的培养皿中,剪去多余的结缔组织和脂肪; 3 用磨砂玻片轻轻研磨脾脏至乳糜状液体,70 µm的尼龙膜过滤,得到小鼠脾脏单细胞悬液,1500rpm,4℃离心10min,弃去上清; 4. 加入红细胞裂解液2~3mL,重悬细胞后处理5~10min,加入完培6mL终止,1500rpm,离心10min,弃去上清; 5. 用5~10倍红细胞裂解液体积的PBS清洗2遍,每次1500rpm,离心10min; 6.细胞沉淀用5mL的1640完全培养基重悬,细胞计数; 二、流式分
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 巨噬细胞RAW264.7的吞噬能力和细胞增殖之间的关系 46天前
    lemon-欣 RAW264.7巨噬细胞给药后测mtt是抑制细胞的增殖,但是测中性红吞噬能力时能显著促进细胞的吞噬能力,这是正常的吗?谢谢! 个人觉得: 首先检查下试验本身结果的真实性,体系的可靠性,然后如果真实是这样,那么可能是很有意思的一件事,搞明白它也许就是一篇文章,哈哈 以前实验室有位师姐,在研究抗肿瘤药物时发现低浓度促进肿瘤增殖,高浓度抑制肿瘤增殖,然后发现,该药物在不同浓度下是2个信号通路(小分子化合物,一般是多条通路)在不同浓度下起主导的信号通路不同,然后发了SCI…… 所以…… 答案需要由实验告知你!
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 请问如何小鼠饮用水给药 46天前
    dxy_1batsn60 冻结核     为何不采用定时灌胃呢 我灌胃给药的时候经常造成小鼠胃穿孔,我也想加到饮用水里,这个会有什么影响吗? 请问您的小鼠胃穿孔是给药技术原因还是药物原因导致的呢? 如果是技术原因,找熟练技术的人员来操作,减少体积,动作轻柔点; 如果是药物原因,那需要排除是药物本身原因还是溶媒因素,可以通过更换溶媒或者降低剂量来解决,一般定量口服给药都采用灌胃,饮用水会因小鼠喝水量差异导致差异过大,不般不采用。
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 本人10年医学统计经验,赠送100部医学统计视频,并开贴答疑,有问必答! 78天前
    老师,您好! 请教病理结果数据统计问题: 试验介绍:我们用不同剂量的某药物治疗肠炎模型,然后组别分别为:阴性对照组A(没有任何处理)、模型组B(给予溶媒)、高剂量治疗组C、低剂量治疗组D。 然后我们在最终将肠组织固定送病理做HE染色后,得到如下数据结果: 编号 水肿 炎症 血管扩张 上皮增生 溃疡程度 总损伤程度 阴性组 1 0 0 0 0 0 0 2 0 1 0 0 0 1 3 0 0 0 0 0 0 模型组 1 2 3 0 0 4 5 2 1 3 0 1 5 5 3 1 3 0 1 4 5 4 0 3 0 1 5 4 低剂量 1 1 3 1 0 4 5 2 1 3 1 0 5 5 3 0 3 1 1 5 5 4 2 3 1 1 4 7 5 2 3 1 1 5 7 高剂量 1 2 3 0
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 本人10年医学统计经验,赠送100部医学统计视频,并开贴答疑,有问必答! 78天前
    老师,您好! 请教病理结果数据统计问题: 试验介绍:我们用不同剂量的某药物治疗肠炎模型,然后组别分别为:阴性对照组A(没有任何处理)、模型组B(给予溶媒)、高剂量治疗组C、低剂量治疗组D。 然后我们在最终将肠组织固定送病理做HE染色后,数据为附件EXCEL中的数据。 然后我们用SPSS数据统计的时候该怎么分析这个数据呢?  问题:  1:各个指标单独可以做统计分析吗? 还是只需要对总评分进行数据统计分析就行? 2:应用SPSS统计分析时应该用什么分析方法呢?  谢谢老师!
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 CCK8法实验后计算IC50的相关问题 81天前
    我个人感觉应该不同时间点的IC50是不一样的,一般描述48小时的多,但是也有24/48/72小时不同时间点来测得到不同时间点的IC50,,理论上来说应该是作用时间越长,IC50越小。 我们一般做各个时间点不同浓度(如24小时DE 5-7个浓度)然后用拟合曲线算出IC50,然后绘制不同时间点的IC50表或者图。
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 化学诱导的急性和慢性小鼠肠炎模型的构建—更新方案 81天前
    微生物专业研究生 许愿zj   学习了,谢谢! 你好,求问DSS溶液需要每天更换吗? 可以每2-3天换一次
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 C57BJ6小鼠水合氯醛及戊巴比妥钠腹腔注射麻醉方法求助 156天前
    一般动物手术都会禁食。参考临床。临床上禁食的目的应该是防止食物反流引发窒息。
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 求教-B细胞活化抑制试验设计 165天前
    没有呢,私聊我的都是类似于委托他们帮我做试验的那种,但是具体怎么做,方案需要自己定,我感觉什么都没有帮助
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 求各位分析一下为什么污染了!!! 197天前
    我指的不是吃,而是自己做包子、馒头之类……
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 human TNFα转基因小鼠 197天前
    问问南模,12年问过,说是需要定制貌似,现在很久不接触了
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 Western越跑越难看,求助帮忙看下,谢谢~ 197天前
    1.首先你得确认你的SDS-PAGE胶跑的没有问题(用染料染下你的蛋白,看看条带是否正常)2.再次一般情况下70KD,200mA恒流湿转电转的话,直接看你加入的loadding BUFFER里的溴酚蓝(6KD左右吧)位置,还有你的蛋白MARKER里面70KD的位置在哪而决定你的电泳时间,差不多一个小时吧。3.电转结束后,可以用再染色下你的电转之后的SDS-PAGE胶,看看里面还有没有蛋白了。4. 还有就是,你的胶、膜、电极有没有弄反(操作上的问题)
  • szxy1111
    szxy1111  回复了帖子 动物实验样本数求教 197天前
    一般情况下,我们是预实验做3-5只(为了数据统计),如果是为了报批药物,请参考指导原则(小动物数是要求不少于6只)

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