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丁香客

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  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 小鼠肝脏HE染色切片怎么看? 10天前
    这像素有点感人啊。我最近也在学着看片,图2应该是有气球样变?坐等大佬读片
  • shaobl
    shaobl  悬赏50丁当求助 13天前

    小鼠肝脏HE染色计算NAS评分求助!

  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 肝脏病理切片求读片~!@~!~%## 13天前
    @从不同视角看世界 请问,下面2张图片中箭头所指的是炎性细胞(淋巴细胞?)浸润吗? 非常感谢!
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 哪位老师给讲讲病理切片中炎性细胞如何辨别啊。 13天前
    您没有权限阅读该帖子
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 求c57 小鼠阴道涂片看精子方法 58天前
    你好,我之前没做涂片。都是根据阴栓判断的,C57(11周周龄)见栓后成功怀孕的比例还可以(对照组12只有7只怀上,58%的怀孕率,其他组(共36只)81%的怀孕率)。怀孕成功率跟动物的状态(周龄、是否使用药物干预、肥胖等)、动物房条件(温度、湿度、噪声水平、是否使用IVC饲养等)等等因素都有关系,建议楼主查下自己这个品系小鼠见栓后的怀孕成功率,如果明显高于自己现在的怀孕率,则建议逐个排查相关的影响因素。
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 异氟烷麻醉小鼠若干问题 109天前
    dxy_857qhyn2 shaobl   你好,如果是少量采血,比如70ul左右(差不多一根毛细管的量),这个操作时间(熟练了应该可以在30s内完成)按照上面的麻醉方法基本上是可以满足的。 因为我是要终末采血,麻醉完取出操作时长至少要3分钟左右,熟练了应该也需要2分钟,如果是这么长的时间,除非有持续的异氟烷吸入,不然麻醉效果持续不了那么长,所以我后来还是选择腹腔注射阿佛丁麻醉(因为苯巴比妥钠现在国内已经买不到了) 前辈好,我目前做肾脏病的小鼠实验,戊巴比妥钠目前买不了,想用阿佛丁代替,前辈的阿佛丁怎么用的?哪个公司买的?我想参考一下 已PM
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 【经验】小鼠眼球取血和抗凝后制备血浆及保存条件 129天前
    yxnan 有文献报道大约获取1ml左右的全血,具体需要自行验证。恩,这个还要根据小鼠体重,一般循环血量约占体重5%,我们目前20g左右的小鼠理想状况大概能取0.7到0.8。
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 组织冻存——液氮转-80°C 131天前
    煜鸣 我们之前取材方法:准备3个细胞皿,加入PBS;取动物组织,剪成50—100mg小块;依次在三个细胞皿中以PBS清洗;清洗后的组织,放入小液氮罐中速冻30-60sec;速冻后的组织放入2ml冻存管中后立即置于-80℃冰箱,待用。后期做WB和PCR都没有较大影响。如果长期保存,建议放液氮罐中。 煜鸣,非常感谢你的回复。 请问你做WB跟PCR最长时间间隔是取完组织多久之内做的呢? 另外清洗完组织表面的PBS不用吸掉吗? 谢谢!
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 求大佬相助 132天前
    楼主仔细看下文章,里面应该有说明。 个人猜测是month的缩写
  • shaobl
    shaobl  悬赏25丁当求助 132天前

    组织冻存——液氮转-80°C

  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 求c57 小鼠阴道涂片看精子方法 132天前
    dxy_is2wnft7 看不到精子 小鼠的话阴栓还是蛮明显的(第二天早上动物房开门后尽早去查),不过看到阴栓或者涂片发现精子也只能说明发生了交配行为,不同品系的怀孕率还是差蛮多的。 比如雄性的BALB/cJ小鼠在雌鼠不处于动情期时也会与其发生交配行为(故见栓后怀孕率会比较低)。因此尽量选择处在动情期的雌鼠与雄鼠进行交配可以大大提高交配的效率与怀孕成功率。 附一张C57小鼠不同动情周期阴道外观图(依次为动情前期、动情期、动情后期、动情间期) 推荐楼主可以参考一下The Jackson Laboratory关于合笼的相关资料,相信对你会有帮助。链接如下↓ 6 STEPS FOR SETTING UP TIMED PREGNANT MICE HOW TO TIME MOUSE PRE
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 异氟烷麻醉小鼠若干问题 135天前
    多笑999 你好 楼主 容易醒的问题解决了么 你好,如果是少量采血,比如70ul左右(差不多一根毛细管的量),这个操作时间(熟练了应该可以在30s内完成)按照上面的麻醉方法基本上是可以满足的。 因为我是要终末采血,麻醉完取出操作时长至少要3分钟左右,熟练了应该也需要2分钟,如果是这么长的时间,除非有持续的异氟烷吸入,不然麻醉效果持续不了那么长,所以我后来还是选择腹腔注射阿佛丁麻醉(因为苯巴比妥钠现在国内已经买不到了)。
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 SD大鼠全血肝素抗凝的浓度是多少? 138天前
    tibeteragain 可以用1mg/ml的肝素 20ul 加入到离心管中,贴壁混匀,烘干后抗凝就可以了。 你好,请问如何才能使20ul的肝素在离心管内相对均匀地分布,震荡离心管吗?
  • shaobl
    shaobl  悬赏20丁当求助 138天前

    小鼠采血-肝素使用剂量?

  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 鼠胰岛素检测——血清OR血浆? 142天前
    动物砖家 shaobl 砖家好,请问在4°C冰箱大概要静置1个小时是吗?一般说的30分钟是不是室温条件下。 谢谢! 是的,我习惯是4度冰箱一小时,不过半小时也应该够了,没多大影响,室温的话个人不太喜欢,冬天和夏天温差完全不一样,尤其是夏天的时候以前失误过 恩,谢谢! 另外离心参数用g可能会更准确一些(因为不同离心机规格不同)。 查了资料(见参考资料),血浆跟血清一般都使用1000-2000g,10min离心。使用2000g,15min可以去除血小板。 注:血浆和血清离完后最好按照后续需要检测的量进行分装,避免反复冻融。 参考资料:plasma and serum preparation
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 鼠胰岛素检测——血清OR血浆? 143天前
    动物砖家 血清和血浆的区别就是加不加抗凝,一般能用血清优先选择血清,因为你不知道抗凝剂对你检测的指标有没有影响,采血完成后可以放4℃冰箱静置1个小时,然后3000rpm离心20min,相同的采血量,获得血清和血浆应该差不多的 砖家好,请问在4°C冰箱大概要静置1个小时是吗?一般说的30分钟是不是室温条件下。 谢谢!
  • shaobl
    shaobl  悬赏20丁当求助 144天前

    鼠胰岛素检测——血清OR血浆?

  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 不同组织固定液的选择 144天前
    lpan720 shaobl lpan720 最好是分别用不同的固定液,多聚甲醛固定液虽然可以固定这三种组织,但是固定的肌肉组织切片后易使肌肉收缩并且切出来的肌纤维容易裂!固定脂肪则会导致脂肪在做切片时脂滴泡破碎!要想效果好固定液的选择其实是很重要的,肝脏用多聚甲醛固定液,肌肉用环保型GD固定液,脂肪则用脂肪专用固定液!这样效果会比较好! 固定时间一般是最好不要超过一个礼拜,如果要长期保存最好是脱水后包埋在石蜡中较好!转到70%酒精主要是怕时间长了对抗原有影响,但是不做组化就不需要考虑了,因为70%酒精其实也不能长期保存的!只是适合放置一周左右的时间! 非常感谢lpan720的回复。 楼下的站友说如果只做HE染色,一直放着没有关系,是这样吗? 固定时间一般不要超过一个
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 不同组织固定液的选择 144天前
    动物砖家 shaobl 动物砖家 你这几个组织都用4%PFA或者福尔马林固定都可以的,没必要那么讲究,只做HE之类的话一直泡在都可以,泡一两年没问题,当然最好还是固定2天后直接脱水包埋做成蜡块 感谢砖家的回复,再确认一下,如果只做HE一直泡着没有问题对吗? 另外,放入固定液后是否常温保存即可?(我们目前最多可能也就泡3个礼拜左右) 完全没问题,另外楼下回复的很详细,不过一般实验室都不会这么专业操作的,也没必要这么专业 恩,谢谢砖家!
  • shaobl
    shaobl  回复了帖子 不同组织固定液的选择 145天前
    动物砖家 你这几个组织都用4%PFA或者福尔马林固定都可以的,没必要那么讲究,只做HE之类的话一直泡在都可以,泡一两年没问题,当然最好还是固定2天后直接脱水包埋做成蜡块 感谢砖家的回复,在确认一下,如果只做HE一直泡着没有问题对吗? 另外,放入固定液后是否常温保存即可?(我们目前最多可能也就泡3个礼拜左右)

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