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有什么蛋白只能用PAGE,而不能用SDS-PAGE的吗?

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【求助】检测血液中的低密度脂蛋白胆固醇的方法

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  • s0911
    s0911  发布了新帖 基因治疗载体纯化--反转录病毒/腺病毒AdV/腺相关病毒AAV/慢病毒/质粒DNA/反义核酸 1384天前

    基因治疗载体纯化                       

  • s0911
    s0911  回复了帖子 求助蛋白纯化大神! 1391天前
    在不同pH条件下蛋白折叠的情况略有不同,导致HIS标签暴露的程度不同,才会有结合强度的区别。而折叠的区别是很难预测的,所以只能尝试一下,一定范围内能够找到一个最佳条件, 咪唑与HIS上杂环的结构类似,所以是竞争性洗脱,跟pH关系不大
  • s0911
  • s0911
    s0911  发布了新帖 教您如何查询GE lifescience产品说明书和技术文档 1391天前

    各位亲:        最近遇到许多XDJM们求助某一产品的说明书或技术文档,我们的技术支持只能在日常工作和出差之余上论坛来回答大家的问题(通常是晚上,还没有加班费),所以不能做到每帖都第一时间回复,请大家理解和原谅。   &nb

  • s0911
    s0911  回复了帖子 求助JSR,Repligen,TOSOH,POROS的蛋白A亲和填料 1436天前
    proteinA的填料价格比较贵,所以制药厂家在选择的时候都会进行综合评估。好坏的判断标准需要从载量、寿命、清洗方案、价格、药监部门认可、成功案例、装柱难度、厂家服务、产品批次稳定性等方面综合考虑。
  • s0911
    s0911  回复了帖子 有没有一种有效的方法,能够定向除去溶液中的某一种金属离子 1440天前
    直接配一个不包含你想去除离子(铅、钠等等)的缓冲液,在脱盐柱上将你的蛋白样品置换到这种新的缓冲液里面就可以了,非常快速
  • s0911
    s0911  的帖子被加为精华了 1445天前

    Ä爱纯派——低温蛋白质纯化操作指南

  • s0911
    s0911  发布了新帖 Ä爱纯派——低温蛋白质纯化操作指南 1445天前

    Ä爱纯派——低温蛋白质纯化操作指南告别炎炎夏季,秋意浓,气温降,大家是否因此神清气爽,精神百倍。试想,我们在纯化蛋白的时候,如果将温度降低,也许能够使蛋白更加稳定,更加清爽。那么在低温条件下,使用ÄKTA™系统做蛋白质层析时需要注意哪些方面呢?在本期的微信中,我们将介绍低温纯化蛋...

  • s0911
    s0911  的帖子被加为精华了 1455天前

    GE中低压层析柱 柱效测定方法 详解

  • s0911
    s0911  发布了新帖 如何测柱效 1484天前

    柱效测定是一项经常使用的操作,对于定量表征层析柱的工作状态是否良好,工艺的验证具有重要的意义。但是实际工作中很多朋友都遇到不会测柱效或者测出来注销过低的状况,不知道如何解决。所以今天我就给大家详细介绍一下柱效的正确测定方法,以及经常遇到的问题如何解决。 介绍分为5个部分,测前准...

  • s0911
    s0911  回复了帖子 akta explorer X轴流量体积显示和sample pump 故障 1887天前
    样品泵工作时的横坐标是可以从软件里面选的,不知道你是否进行了选择。如果没记错就是在样品泵设置的界面里找Methodbase 命令,选择volume即可。 样品泵同步出错可能是泵很久不使用或有脏东西残留,建议你使用比较大量的热水(有六七十度就行)清洗样品泵,如果还是报错,建议...
  • s0911
    s0911  回复了帖子 能否给我发份?KTA pure 10 系统的中文使用说明书, 1887天前
    AKTA pure 只有25和150的系统,没有10的。官方的说明书是非常庞大的一本,GE不会把它翻译成中文。 如果你是AKTA的用户,建议你联系负责的销售,找他要pure的操作教学光盘,是国内拍的,中文解说,设备和软件使用解释的非常详细。
  • s0911
    s0911  回复了帖子 AKTA 柱前压 1887天前
    AKTA系统流路中系统泵后面紧跟有一个压力传感器,它测量的是系统泵输出的溶液的压力,也就是你所说的系统压力。 老的层析系统或基本配置的新设备就只有这一个压力传感器(系统压力)。 但是泵后到柱前还有管路,溶液流经管路的时候还是会产生压力降,降低的幅度与管路的长度及粗细相关,...
  • s0911
    s0911  回复了帖子 单抗纯化 1887天前
    第二步,第三步在有些项目是可以调换的,但主要还是要看项目。 先阳后阴,两步离子交换之间需要一个缓冲液置换的过程,生产上需要一套超滤系统,所以硬件成本上升,回收率下降。 如果样品核酸去除压力不大,则可以先阴离子交换做流穿,下来的缓冲液是没有高盐的,直接把pH调下来就可以做阳...
  • s0911
    s0911  回复了帖子 AKTA Club蛋白纯化答疑专贴——有问必答! 1909天前
    你用的什么柱子或填料,rprotein A sepharose 或是什么?用的缓冲液条件是什么?鼠源的抗体在protein A的柱子上结合能力有强弱区别,差别的大小跟抗体品种有关。 改造后结合变弱是有可能的,改进方式有两种: 1 还有protein A的柱子,在结合缓冲液中...
  • s0911
    s0911  回复了帖子 AKTA Club蛋白纯化答疑专贴——有问必答! 1909天前
    首先,这个柱子应该叫Superdex G200 10/300,没有“G”,不说清楚可能会有误解。 1 建议再使用0.5 M NaOH反向冲洗,可能还是有脏东西在胶或者滤膜上 2 是不是水没有过滤干净 3 可能需要更换上下柱头的滤膜,很容易,买柱子的包装里面已经送了替换品(...
  • s0911
    s0911  回复了帖子 AKTA Club蛋白纯化答疑专贴——有问必答! 1909天前
    超速时间长的话,柱床可能会发生下陷。偷懒的办法是下一点柱头,重新接触到柱床即可。 不过稳妥的办法是测一下柱效,变差很多的话拆了重装吧,其实也很快的。
  • s0911
    s0911  回复了帖子 Q-FF纯化蛋白分不开 1909天前
    朋友,你给出的信息太少,不过可以肯定的是,你的目标蛋白在很低的电导下就被洗脱下来,而且杂质与目标蛋白的洗脱强度相差很小(只有3ms),说明你选择的凝胶和缓冲液条件不理想。这么低的电导,都可以考虑用流穿模式做了,只吸附杂质岂不方便。 为了能够帮你提供有效的建议,需要你提供更丰富的...
  • s0911
    s0911  回复了帖子 如何用unicorn软件计算柱效 1918天前
    柱效测定有两种不同的试剂系统,对于非药物生产的客户没有什么区别 一种用水做流动相, 1% CV 丙酮(浓度1%)做样品 检测UV280 一种0.4M NaCl做流动相, 1% CV 1M NaCl做样品,检测电导。 流速都是30 cm/h. 跑出来UV 280 或电导峰...
  • s0911
    s0911  回复了帖子 紫外问题 1920天前
    1 可能是buffer里面有强烈紫外吸光的干扰物质,比如浓度超CMC的表面活性剂,阴离子交换时的EDTA等,换种buffer试试 2 也可能是UV流通池脏了,走水试试就知道了,可以使用0.5 M NaOH 洗一洗,还可以上一些蛋白酶、稀盐酸等处理不同的杂质 3 ...

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