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  • qichun1226
    qichun1226  回复了帖子 T淋巴细胞体外培养 476天前
    1500rpm 7min   离心后重悬
  • qichun1226
    qichun1226  回复了帖子 Jurkat细胞的CD4标志分子 559天前
    @紫馨藤 应该是E6.1  这种细胞基本是CD4-
  • qichun1226
    qichun1226  发布了新帖 CD4细胞的磁珠分选 587天前

    磁珠分选有阴性筛选和阳性筛选,除了分选出的细胞纯度这一差异外,想问问大家这两种分选方式对细胞会造成什么影响吗  有听说阳性筛选会激活细胞。。。

  • qichun1226
    qichun1226  发布了新帖 Jurkat细胞的CD4标志分子 683天前

    我最近在做CRISPR敲除实验 但是在做流式的时候发现Jurkat细胞的表面的CD4分子怎么检测不出来的 Jurkat不是T淋巴细胞吗 怎么没有CD4分子那 CXCR4分子可以检测出来 请问大家有没有遇到过这种情况

  • qichun1226
    qichun1226  发布了新帖 NHEJ修复的后果 695天前

    产生DSB后,如果通过NHEJ进行修复,在断裂处不管是插入还是缺失,碱基仍然还是相互配对 1 的吗 会不会产生碱基突出 2 或错配 3的结果

  • qichun1226
    qichun1226  发布了新帖 悬浮细胞的单克隆培养 708天前

    我用有限稀释法获取了一些单克隆 养了两周了 感觉细胞数还是不太多 大家有木有这方面的经验分享下

  • qichun1226
    qichun1226  发布了新帖 从蛋白水平上下调蛋白量 711天前

    请教大家 有没有人从蛋白水平上直接下调某个成熟蛋白的量 通过诱导其泛素化什么的 能不能实现这个 因为我想直接下调某个成熟蛋白降解 不通过RNA干扰或是基因敲除的手段

  • qichun1226
    qichun1226  发布了新帖 急求 流式抗体保存在-20度的结果 767天前

    如题 刚发现我的流式抗体放在-20度里保存了两个月 荧光会不会淬灭了啊 还能用吗 求大家指教啊

  • qichun1226
    qichun1226  回复了帖子 CRISPR-cas系统 772天前
    addgene上的质粒一般就一个,cas和sgRNA在一个质粒上,sgRNA要自己设计,大约就20多bp,让公司合成就可以,至于设计你可以用张峰实验的软件,望成功;。
  • qichun1226
    qichun1226  回复了帖子 用CRISPR/Cas9敲除原核生物的基因 772天前
    我做的是人的细胞,如果是一般的细胞就用PX458(带有荧光) PX459都可以,设计sgRNA可以用张峰实验室提供的软件,根据脱靶大小筛选几个合适的,然后测试下活性大小。
  • qichun1226
    qichun1226  加入了调查派 809天前
  • qichun1226
    qichun1226  发布了新帖 质粒共存 816天前

    我在单克隆里挑出来两种不同的质粒 并且通过测序已经确定 大家有遇到过这种情况吗 这两种质粒一个是野生型 另一个是有32bp的缺失 缺失后后面的序列都是不同的 大家有遇到过这种情况吗 单克隆里不同的质粒能共存吗

  • qichun1226
    qichun1226  发布了新帖 质粒共存问题 823天前

    各位战友 我正在构建载体,请问含有目的片段的质粒和不含有目的片段的同一质粒在同一个细菌中能共存吗?也就是如果细菌中能存在两个不同片段的同一质粒吗?

  • qichun1226
    qichun1226  发布了新帖 急求 在线等 823天前

    大家好 我想请问一下 我的重组质粒转入大肠杆菌后 是多个质粒同时转入一个大肠杆菌吗,可能会有未连接的质粒也同时转入,, 这样的话挑取单克隆还有什么意义那,急求

  • qichun1226
    qichun1226  :大家好 我想请问一下 我的重组质粒转入大肠杆菌后 是多个质粒同时转入一个大肠杆菌吗 这样的话挑取单克隆还有什么意义那,急求

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