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【求助】带20几块手表回国能过海关吗?

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关于联系博士后问题

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[求助]请人帮我做了流式分析, 可还是不会看图!

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  • maxyer
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 哪种层析柱适合分辨蛋白的构象变化? 315天前
    今天上班,自己顶一下,期待大神光临!
  • maxyer
    maxyer  发布了新帖 哪种层析柱适合分辨蛋白的构象变化? 322天前

    亲们,本人刚开始接触AKTA,任务是分辨一个异源二聚体(140kD+120kD)在有配基存在的情况下发生的构象变化,根据文献报道,出峰体积差异会在2ml左右。要求,用蛋白量尽量少(文献为10ug,mAU为10左右),信号尽量高,关键是可以分辨这种构象的变化。我用过了superdex200 increase 10/300GL,但效果不理想,mAU只有1左右,出峰体积差异不明显。请教各位战友,我应该用哪种类型的柱子?用micro系统会好些吗?先行感谢!

  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 肝细胞脂肪变模型建立及油红染色经验总结 468天前
    嗯,下次我会试一下这种经典方法,但是还是想知道问题出在了什么地方
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 肝细胞脂肪变模型建立及油红染色经验总结 469天前
    感谢楼主耐心解答,对于我这初次应用油红又染出白板的人简直是救命稻草!首先,我用的是hepG2细胞,六孔板倒置显微镜,瞬转了一种促进脂肪累积的基因,文献上是这么做的。用的方法:用95%酒精固定半小时,油红(3:2稀释后过滤)染色10min,75%酒精洗涤一次(大概一分钟),然后加入PBS观察。然而,啥颜色也没有。然后我又加入异丙醇,于500nm处读吸光值,也没有发现对照组(空载体)实验组之间显著差异,读书在0.2左右。请楼主帮忙诊断,多谢多谢!
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 原创纪实小说「求医记」(已更至第 9 章) 481天前
    很真实,留个记号,慢慢看
  • maxyer
    maxyer  的帖子被加了1分 780天前

    回复:【求助】噬菌体肽库筛选中滴度测定时没有发现噬菌斑?

    时隔这么久,真心有些记不清了,很不好意思,以后一直没做。只有一件事印象深刻,把agar and agarose搞混了,顶层琼脂应该是用agarose,改过来以后实验就顺畅多了,不知道你是不是这个问题附:当时滴度测定程序:挑取ER2738单菌落接种于5 ml LB液体培养基(含0....
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 噬菌体肽库筛选中滴度测定时没有发现噬菌斑? 780天前
    时隔这么久,真心有些记不清了,很不好意思,以后一直没做。只有一件事印象深刻,把agar and agarose搞混了,顶层琼脂应该是用agarose,改过来以后实验就顺畅多了,不知道你是不是这个问题附:当时滴度测定程序:挑取ER2738单菌落接种于5 ml LB液体培养基(含0.01 g/LTc)中,37℃,250 rpm,培养至生长对数中期(OD600=0.5)(约3 h)。同时将顶层琼脂用微波炉加热融化,以每管3 ml分装于无菌EP(5 ml)中,封口,45℃水浴预热待用,37℃预热LB/IPTG/Xgal培养板。待测噬菌体溶液进行10倍系列稀释,一般扩增噬菌体需稀释108-1011,未扩增的噬菌体洗脱液需稀释101-104。将生长对数中期的ER2738菌液,以每管200 μl分装至无菌
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 小鼠缺血再灌注模型 832天前
    小鼠的代偿功能确实非常强,模型容易不稳定,还是大鼠稳定性好。具体到你自己的模型,一开始还是要取不同的时间点,看看肌酐在哪个时间范围内水平最高;如果变化不明显,可以延长缺血时间;文献中也有单侧夹闭,另一侧切除的。我们自己做也是不太稳定
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 小鼠缺血再灌注模型 896天前
    小鼠的夹闭时间一般在半个小时左右,具体需要根据你们的平台摸索动脉夹的型号忘记了,等我给你查一下,因为最近一直做大鼠我们用的方案是用戊钠麻醉,腹部开口,一般腹腔内没有出血,夹闭后可见肾脏变紫
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 小鼠缺血再灌注模型 900天前
    我们都是双侧同时夹闭,很少出现死亡。但是我们在操作过程中并没有分离出动脉,是静脉动脉同时夹闭的,肌酐水平可上升10倍左右
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 Pseudo-knockin (PKI) mice什么意思? 901天前
    推荐楼主看一篇文章“General Method for the Modification of Different BAC Types and the Rapid Generation of BAC Transgenic Mice”相对于传统的基因knockin技术,这是一种利用细菌人工染色体(BAC)进行操作的技术,具有周期短易于操作等优点,因此我认为是文中所用knockin小鼠的制备技术。
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 动物给药方式及给药剂量 怎么确定 922天前
    1. 剂量的确定:查阅参考文献;如果没有文献的话,根据前期急毒数据,设置高中低剂量组摸索,浓度跨度稍微大一些2 关于静脉和口服给药,如果固体制剂生物利用度很低,它们之间的区别还是很大的。肯定静脉给药的血药浓度更高,但具体选择哪种还需结合你拟定的临床适应症3 静脉注射一般用生理盐水做溶剂。因为生理盐水本身是无菌的,一般不需灭菌。粗浅认识,希望起到抛砖引玉的作用
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 求助:大鼠灌胃给药后死亡原因? 927天前
    谢谢战友!看来我需要加强技术修炼了!
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 求助:大鼠灌胃给药后死亡原因? 942天前
    谢谢yudian12306!我也感觉非这个原因莫属了。但疑问是,第一灌胃的时候非常顺畅,没有感觉到阻力;第二,解剖后发现药确实在胃里。难道只有痕量的进入到了肺里? 
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 工作六年,大梦初醒 943天前
    初涉新药研发临床前研究领域,有太多需要学习。很欣赏这句“we learn 10% of what we read, 50% what we see and hear,70% of what we discuss,95% of what we teach others.”关注您了,作为偶像崇拜呢,我学习的好榜样。头像这么喜感,想来是极为乐观的人。
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 请问如果用小鼠的海马跑western的话,组织量够用吗? 947天前
    单侧都够用,一只的就更没问题了
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 临床检验肾功能常用NGAL这个指标吗? 948天前
    您没有权限阅读该帖子
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 求助:大鼠灌胃给药后死亡原因? 948天前
    再次表示感谢!应该说有症状(发黑及呼吸苦难)出现很快,死亡大概需要5-10分钟,确实也有的更快些应该不是药物的问题吧,这么短的时间,药物根本进不到血液中如果是操作问题,就是灌到肺里这种可能吗?
  • maxyer
    maxyer  回复了帖子 求助:大鼠灌胃给药后死亡原因? 948天前
    谢谢战友!首先,灌胃过程中没有感觉到阻力;也解剖过,药在胃里了,未见食管气管明显损伤

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