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【求助】这是乳鼠心肌细胞吗

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【求助】请大家帮着鉴定下这是不是树突细胞(DC)

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【求助】vimentin(波形蛋白)是否可作阳性对照

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  • lumj
    lumj  回复了帖子 cd4细胞和cd4+细胞一样吗? 2305天前
    一般是等同的
  • lumj
    lumj  回复了帖子 做免疫荧光的抗体能用来做流式吗 2305天前
    免疫荧光是直接染色还是间接法?我觉得你是想用荧光标记的抗NGF/COX-2抗体来做直接染色,这样的话可以在流式上试试。但是一般免疫荧光是用间接法,这样的话荧光抗体只anti某个种属的抗体(视一抗而定),不是anti NGF或COX-2的,这样就不能用于流式了。 如果一个抗体可以用...
  • lumj
    lumj  回复了帖子 彗星实验用什么电泳槽 2312天前
    我们当时用的就是跑核酸的水平电泳槽,先摸索两次电压和时间
  • lumj
    lumj  回复了帖子 流式测小鼠CD4+CD25+Foxp3+ Treg 细胞 2319天前
    "固定和破膜各40分钟"----我记得BD的破膜剂是固定和破膜在一起的呀,4度40~50分钟。Foxp3也是4度40~50分钟。 你用多少微升全血做的?我一般用150微升,因为整个过程中有好几次离心洗涤,损耗比较多的,平时做CD3/4/8三染的话就50微升够了...
  • lumj
    lumj  回复了帖子 兔调节性T细胞试剂 2350天前
    找eBioscience 试试
  • lumj
    lumj  回复了帖子 谁用过R&D原装试剂盒? 2393天前
    用Reagent Diluent稀释200倍
  • lumj
    lumj  回复了帖子 谁用过R&D原装试剂盒? 2396天前
    我们实验室买过R&D的三种细胞因子DuoSet 试剂盒,是要自己包被的,还采购了些辅助试剂:具体货号如下     单价(RMB)R&DDY781B Canine IFN-gamma DuoSet (1 KT)1 Kit6747.9R&DDY1609 Ca...
  • lumj
    lumj  回复了帖子 细胞染色的问题 2397天前
    我试过在培养板上做HE染色,福尔马林没问题,其它染色液和酒精也没问题,但就是不能加二甲苯
  • lumj
    lumj  回复了帖子 想将DNA片段吸附于ELISA板等塑料板上,需要什么样的辅助手段? 2410天前
    Corning有DNA结合表面的96孔板 2498PLATE,96WL,DNA,FB,BLK,PS,WO/L 96孔板 DNA结合表面 黑色 PS(聚苯乙烯)材质 无盖 单个包装2499PLATE,96WL,DNA,FB,WHT,PS,WO/L 96孔板 DNA吸附 平底 白色 ...
  • lumj
    lumj  回复了帖子 酶标仪测荧光,透明板还是黑板?top还是bottom? 2411天前
    谢谢,我当时分别测了top和bottom,结果bottom的读数要高10~15倍(360激发,469发射),下次再测一次看看。
  • lumj
    lumj  : 酶标仪测荧光,透明板还是黑板?top还是bottom? http://dxy.me/J7Jzeu 用酶标仪测96孔板中的悬浮细胞荧光,用透明和黑壁透明底的板都做了,在bottom情况下,好像普通透明板和黑壁透明底的板读数差不多,而且普通透明板也没发现邻近孔荧光的干扰。现在有些不确...
  • lumj
    lumj  回复了帖子 如何根据流式细胞仪出的检测图判断细胞类型 2432天前
    找比较大的进口流式试剂代理,向他们要一些大的彩色挂图(很多试剂公司用来作产品介绍的,做得很漂亮),上面很清楚的有各种免疫细胞的发育过程和不同发育阶段的细胞表面标志(就是你说的CD分子),有疑惑就直接向他们咨询,然后你就比较清楚检测什么细胞需要什么抗体(抗某种CD分子的抗体)。至于...
  • lumj
  • lumj
    lumj  回复了帖子 MTT实验,铺96孔板,每孔的细胞数如何确定 2435天前
    我们以前用上皮细胞或内皮细胞来做MTT,一般是3000cell/well,你可以做1000、2000、4000cell/well(或者更高点,根据你以前做的情况)这3个细胞浓度,在正常培养72小时后对比它们的增殖情况,能长满孔底的浓度就是了。 还有就是培养时间较长的话,板子最外面...
  • lumj
    lumj  回复了帖子 流式细胞仪检测T细胞纯度CD3标记步骤 2436天前
    一 如果是培养细胞,基本可以按你记的步骤来,有点不同的是: 1 我们用的eBioScience的抗体说明书上都是每个test在0.1 mL体系中染色,可以染10^6 cell,所以我觉得你因该把细胞浓缩到10^7 cell/mL(PBS悬浮),取0.1mL去染色。 2 直接按抗体...
  • lumj
    lumj  回复了帖子 MTT实验,铺96孔板,每孔的细胞数如何确定 2437天前
    什么细胞?悬浮还是贴壁?培养时间? 在96孔板里分3~5个梯度(2倍连续稀释)种细胞,按正常条件培养,到了检测时间就在镜下观察,刚好长满底面的细胞浓度就是适合的。
  • lumj
    lumj  回复了帖子 为什么PBMC流式细胞图阳性分两群?(图例) 2443天前
    会不会是体外培养后造成非特异性染色背景升高,用同型对照来划象限可能更好
  • lumj
    lumj  回复了帖子 LPS溶液的配制方法 2446天前
    今天发现SIGMA提供"gamma-irradiated"的LPS,就是射线照过除菌的,说明上也写着适用于细胞培养。货号是L2654、L6529、L4391、L4516(这些是从E coli 提取的)、L7770、L4641(这两个是从Salmonella m...
  • lumj
    lumj  回复了帖子 LPS溶液的配制方法 2447天前
    我以前用的那个LPS(忘了是哪个公司的)没有浑浊的现象,可能是配制得比较稀(用双蒸水配制成浓度为400 μg/mL的溶液),刚才查了下SIGMA的说明书,确实说有浑浊现象,我把配制和贮存部分贴在下面: Lipopolysaccharides from Escherichia ...
  • lumj
    lumj  回复了帖子 LPS溶液的配制方法 2451天前
    先用水溶解,一次性滤菌器(0.22um)过滤后分装于小管内,-20度冻存,临用前用培养液稀释。至于终浓度,要看你的试验目的了。

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