选择模板

更多 发表的帖子

2105

浏览

【原创】SK-BR-3细胞-交流

回帖:4    收藏:3    投票:2

733

浏览

【求助】北京各细胞实验室求助-硒酸钠

回帖:0    收藏:0    投票:0

581

浏览

【专题讨论】sf9 sf21昆虫细胞替代培养条件摸索

回帖:1    收藏:0    投票:0

更多 最新动态

  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 如何将悬浮细胞驯化成贴壁细胞? 28天前
    实验结果趋势好,可以PM我,您准备转染那株细胞
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 元代成纤维细胞培养 28天前
    挺稀的,建议换换其培养体系,要是长得满,就传代勤些,应该会有效果
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 前列腺癌细胞系 28天前
    是否为雄激素依赖,您可原液不弃,与弃液的坐下比较,原液不弃要长的快,就很说明问题
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 养的B16细胞出现了问题,求指导 28天前
    用你的体系养养其他细胞,验证下体系
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 原代神经元聚团 28天前
    神经类细胞都有这特性,建议低浓度胰酶解决
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 共同探讨完成国内细胞统计 28天前
    悬浮与贴壁细胞反向驯化方案验证中(悬浮驯化成贴壁,贴壁驯化成悬浮,全部含血清方案),有需求老师可注明实验目的,细胞名称,来源是否清晰,试剂厂家名称,细胞特性等介绍,目前悬浮驯化成贴壁为转染所需,技术方案进一步验证中,有用户所需,有这方面要求老师可按上述要求回信交流具体细节。方案已有,实际效果进一步验证中。欢迎有兴趣的老师同学共同学习。目前驯化细胞有中的有;JURKAT  hbk-21正在验证中准备驯化的细胞有:MDCK  SP20  HBK-21  293  LMH   PK-15  vero 
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 共同探讨完成国内细胞统计 28天前
    促贴壁试剂应用案例二:人前列腺癌细胞;LNCaP细胞培养-成瘤关键问题点说明人前列腺癌细胞;LNCaP细胞细胞培养要点及成瘤1:复苏后贴壁较难,推荐用我们促贴壁试剂,前期贴壁后,增殖明显正常。2:雄性激素依赖:前期复苏后,雄性激素自分泌,很多老师单加雄性激素或扔掉完全培养基,建议不弃原液直接分瓶培养。3:细胞数量能到很大量时,雄性激素依赖问题相应可解决,细胞数量够多,分泌较快,数量多后就像293一样,较好养。4:免疫敲除鼠接种(每只500元左右,大公司产品,这部分不建议省钱)每只接种300万-500万之间,一个月左右,瘤子超大。注明:细胞来源明确,进口试剂耗材,培养过程问题,请列出培养试剂厂家货号,我们会给出建议,操作手法建议详细描述。 
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 共同探讨完成国内细胞统计 28天前
    免疫细胞有做共聚焦镜的老师,我们有个促贴壁试剂方法挺好用的,共同分享成果,有课题设计的可留言,北京准备找几台牛设备做做,看看效果
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 共同探讨完成国内细胞统计 28天前
    成团成片除附件中介绍,还推荐一个培养过程中分散细胞的试剂,有需要可PM我,这个产品推荐理由是JURKAT这株团聚非常厉害(就是当时解决了团聚,两小时后又聚在一起了),这个试剂用于工业生产中解决团聚问题,用于工业生产的试剂都较稳定,如转染遇到团聚可以试试,推荐刚开始,还没有案例。关于团聚,免疫细胞还有个临床培养方法,您参考,临床培养稍大规模培养后,团聚问题后期不用处理就会分散,原理是临床培养不弃液,每次只加液,(个人意见是,影响细胞团聚因子够了所以会到后期分散)只要养过临床用免疫细胞的技术都同意这个方法。还推荐一款不含钙的悬浮专用1640,很多株悬浮细胞都养的非常漂亮,根据您实验,您看下培养过程中是否会用到这个培养基,如有想法驯化成贴壁细胞,建议用普通1640血清我们可提供个试用您可比较下细胞
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 共同探讨完成国内细胞统计 28天前
    悬浮细胞状态统计我司一直在做,确定好状态细胞,试剂,手法,细胞状态我司长期统计。其他部分我找下在发您,先这些,您看下。您培养的JURKAT可详细描述,培养试剂厂家,货号,操作步骤,后续可给您些我司建议推荐。---------悬浮转染(交流统计目的是技术储备后看看原代转染是否能用上)悬浮细胞转染目的(电转及转染),细节分析统计(我司对细胞较了解,有交流的老师可沟通)一:转染细胞贴壁时间,新铺板的细胞跟容易转染进去,细胞未贴壁。思考:转染物质轻重,如果在底层,细胞贴壁过程促进转染?二:1640钙物质是否有影响,无钙1640或opti-mem (无钙1640我司已有现货)三:玻璃瓶对转染实验影响相对小。四:操作步骤,建议能旋转培养瓶,让转染物质有条件进入细胞。(超声震动也准备上实验试试)五:能否用
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 有人养过U2932细胞吗? 28天前
    细胞养的如何了,建议先筛选下试剂,看看生长状态
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 PHA刺激PBMC,细胞成团 39天前
    临床培养都后期团聚会解决(您最好看下临床培养的手法),原理还不清楚,细胞系分析的较多,目前个人认为是分泌的影响团聚因子充足,解决的团聚。很多淋巴细胞系难转染没解决团聚也是个因素,实验规模都没到临床治疗培养规模,建议稍大量培养看下有无趋势。能否解决团聚。
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 乳腺上皮细胞培养 53天前
    生长天数要长,先筛选下试剂,上皮挑剔试剂耗材
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 Thp-1 细胞培养换液后状态状态不好 长出了角 但是补贴壁 请大神帮看一下 60天前
    换成GIBCO的最好是原装的,或者无钙的1640,
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 细胞骤死什么原因 63天前
    科研统计过一些案例您参考,同一批次,间隔半年以上都建议补加GLU,补加后效果明显,,我们有些实验室老师对同一批次要求高的,目前都换成glumax,不过也建议一年内用完,生产设计是两年。后面要有统计出来,我在发下结果
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 B16-F10细胞怎么了?求有经验的人解惑~ 65天前
    黑点多就筛选下试剂看看,普遍细胞都不行,应该是试剂,主要是血清黑点要少注意下处理步骤,在轻柔些处理,避免机械力,用胰酶化学效力。
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 为什么我的AGS细胞长得特别慢? 68天前
    AGS的空泡,及消化注意事项。空泡:排除试剂与手法问题,如果有空泡,建议细心点,操作慢些,避免空泡形成,少量空泡可将空泡吸出消化:避免机械力(上下摇,敲打动作都不要有,对细胞轻柔操作指这株),用低浓度胰酶化学作用力把细胞消化散成单个细胞后传代。如果那个老师有ATCC来源新到细胞,我们可沟通下,ATCC现在上不去,查不了细胞信息。
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 国内靠谱卖癌细胞的公司 71天前
    上海库,武汉库保险些,协和的现在邮寄不了,保种试剂用最好的试剂,出现问题会少些,保种也踏实。具体细胞问题在论坛里找下,或来信交流先养好细胞,成瘤也是几十几百只老鼠练出来的
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 KSFM培养基含氯化钙的问题! 79天前
    培养注意:底浓度胰酶消化,不要有机械动作吹散细胞(0.25这株损伤较厉害,建议0.05左右,胰酶不用多少,大品牌必须),很多传代不顺利都是消化这步影响的。冻存建议上清冻存可试试,我们推荐这种方法。有同样效果的老师可PM我,我们统计几个实验室是这样。
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 skbr3细胞长出触角 84天前
    上清回输,适合复苏后细胞较少,增殖较慢,也可以试试上清+DMSO冻存,复苏效果应该更好,正在做进一步统计,上清冻存你要试了,效果要突出,回复我下

关于我们|联系我们|版权声明|资格证书|丁香志|加盟丁香园|友情链接 丁香园旗下网站: 丁香园|丁香通| 人才|会议|药学|博客