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【原创】SK-BR-3细胞-交流

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【求助】北京各细胞实验室求助-硒酸钠

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【专题讨论】sf9 sf21昆虫细胞替代培养条件摸索

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  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 请问大家成纤维细胞培养瓶里这个团块是什么 13天前
    黑点可以忽略,后面轻柔点,就不会有了
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 请问谁有H460细胞的图片么?想与A549细胞比较一下有什么区别? 13天前
    这样判断,没依据,有疑问细胞要不做鉴定,要不弃掉。后面实验都是时间精力做出来,这种判断方法不稳妥。就上述问题建议您参考:要是试剂换过(主要是血清),有可能出现这种情况,高质量试剂内毒素底,圆形很正常。您可查找RAW264.7相关贴壁,好用试剂就是圆形,稍差就会长角。(后面培养建议您自己统计比较下)
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 有没有养过Lewis肺癌细胞的,求经验! 17天前
    几天能长满,建议底浓度胰酶试试,少吹大,用胰酶作用消化散,看看
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 有没有养过Lewis肺癌细胞的,求经验! 18天前
    差不多,我的与成串的,这是生长几天的图片
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 求助原代海马神经元培养问题 19天前
    组织到皿这步处理时间多久,要是时间太长,考虑下缩短时间方法应该有效。
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 sw1990细胞消化不下来 19天前
    消化时间有些长了,胰酶多少浓度的。生长天数正常吗?要是生长天数长,调整下培养试剂,看看那个因素影响的生长。
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 CT26贴壁性 19天前
    是不是密度太高了
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 INCaP细胞培养问题 19天前
    要是LNCAP就很对,特性也符合,不过后期培养要解决这个特性,才能生长顺利,协和库老师是减少对培养器材大幅度移动,可促贴壁后,后面会顺利,前期细胞量少时,完全培养基不弃,有依赖因素(您可以比较培养试试)后期有效可来信,我们统计用,看您拼写是否有错误,ATCC刚到的吗?是在北京吗?要在北京随时可见面聊聊。
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 组织块消化时间控制 19天前
    消化过度会影响细胞培养是否成功,有机会您可做做对照试验,消化时间快,成功率会高很多,组织离体后时间很重要,我在统计冰上底浓度胰酶,数据还不多,趋势很好,您机会您试试,要能想起我,把结果发我下,统计用
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 培养基变黄? 19天前
    应该没问题,判断后续生长正常
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 可否麻烦各位帮忙看看,这细胞到底是被什么给污染了 19天前
    要是小牌子的血清,换个大牌子的看看结果
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 求助【鸡肺上皮二型细胞原代培养】 19天前
    提纯这步是怎样做的,看不到步骤,影响因素太多了,组织处理时间,组织消化,铺板,促贴壁方法,培养天数,处理办法,后面才是您描述的结果,还有试剂部分。很难猜
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 有没有养过Lewis肺癌细胞的,求经验! 19天前
    您这个节过的够紧张的建议:你要怕胰酶问题,可用0.05的,时间长些,一般不会消化过,看下二氧化碳正常吗?从你的图片看,细胞状态不好(不增殖)代谢慢,看下缓冲体系,要不知道调整步骤,你就新开一瓶培养基用。看看是不是PH值变化影响的,过节估计只有你的细胞了,别人要也有细胞,这个步骤可以忽略。祝顺利
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 有没有做免疫的永生化细胞系? 30天前
    建议:复苏开始算前一两个月都要调整,后面顺利后,跟ATCC介绍的一样,要是一直调整不到正常状态,考虑细胞本身问题,手法问题,试剂问题
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 mcf10细胞培养 34天前
    安静的卖瓜子群众:用多少浓度的胰酶,要是0.25浓度太高了
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 [求助]H9(人T淋巴细胞系)的培养 34天前
    淋巴细胞特性,聚团不厉害可重悬细胞,铺板后底浓度胰酶消化下,看看后期能否解决团聚。参考:可试试稍大规模培养,不弃液,到后期看看能否有改观,正准备做这步看看有无效果。我统计用若能分散,看看后面状态能否改观,铺板消化后,团聚还很厉害,试试加些分散试剂,这个条件正在摸,有结果我告诉你可以试试。后面您做哪些实验?可交流
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 这个是细胞污染吗?如果是,是什么污染? 34天前
    我的建议:操作手法轻柔,后面会减少,跟污染没关系,代后期结果最好告知,我们统计这些不知您消化步骤,可以试试低浓度胰酶,减少吹打,后面应该就不会有了。
  • luke_zhanghy
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 有没有做免疫的永生化细胞系? 38天前
    正规库没有,只能通过文献找找了。我的NKL好久没复苏了,不知状态是否可以,其他养着的实验室找找,别耽误您实验。我碰到状态好的去信。参考:YTS 人NK瘤细胞 淋巴母      细胞样 悬浮  生长 RPMI1640  +10%FBS 维持细胞浓度在3×105个/ml或2-3×106个/ml;2-3天换液1次NK92您参考:1:LONZA-vivo-15+IL2  2:1640+12.5%(FBS)+12.5(马血清)+IL2培养过程出现问题可以交流,我们统计问题
  • luke_zhanghy
    luke_zhanghy  回复了帖子 3T3-L1细胞的培养出问题了怎么办?求大神指教 39天前
    培养基厂家不通用,细胞要适应一段,后面养养要还慢,我给你个小药,备着,试试效果,有的老师形容很神奇。祝顺利

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