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【求助】western抗体孵育的方法

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  • lorri
    lorri  回复了帖子 稳转的细胞转染效率一直在降 1天前
    您好,您是用流式做的转染细胞分选吗,我也想做这方面的实验,想求教一些问题,我用一般的流式细胞仪是否可以进行分选呢
  • lorri
  • lorri
    lorri  发布了新帖 转染后行细胞分选 1天前

    各位老师大家好,目前我想用流式做细胞分选实验,但是从来没有接触过,哪位老师有相关的protocols,求赐教

  • lorri
    lorri  回复了帖子 瞬转还是稳转 1天前
    向您请教一下,我想做稳转,用的是pc DNA3.1 -e GFP的载体,也可以做稳转吧,我转染完,发现空载质粒荧光很好,但是野生型和突变型的荧光非常弱,需要强曝光,那能有什么好办法吗
  • lorri
    lorri  回复了帖子 细胞冻存的问题 1天前
    状态不好,所以比较揪心
  • lorri
    lorri  回复了帖子 细胞冻存的问题 1天前
  • lorri
    lorri  发布了新帖 细胞冻存的问题 1天前

    我的细胞因为实验室转移的原因,之前在液氮里保存的,后来放到了-80,新复苏了几管细胞,均不理想,是不是放到-80的原因,我是否可以再转移到液氮罐里呢麻烦各位了

  • lorri
    lorri  回复了帖子 求问各位同行大神们,N2A细胞和SH细胞哪个好转染? 5天前
    我用n-2a刚做完,就是荧光大小不一样而且转染完脏兮兮的
  • lorri
    lorri  发布了新帖 细胞稳转问题 5天前

    目前正在进行细胞稳转实验,但是每次转入质粒后,培养基都是脏脏的,有很多生物在里面,细胞转染效率还可以,就是荧光强弱不等,所以想求助各位大侠,有什么方法能够避免这个问题吗?还有就是转染后加入G418的时间及浓度;我按预实验的浓度降了一个梯度加入G418,空载转染后细胞死亡的比较慢,但是其他野生型以及突变型转染后加入G418死亡的特别多,这类的细胞是不是加入G418的浓度再降一个梯度呢?求助各位大侠,急!

  • lorri
    lorri  发布了新帖 血清的问题 7天前

    大家有人用过美仑的血清吗?国产血清那种比较好点,求推荐

  • lorri
    lorri  回复了帖子 求助,这细胞边上的小黑点是什么? 103天前
    arpe-19
  • lorri
    lorri  回复了帖子 4岁儿童视力检查正常,老斜眼看东西怎么回事 104天前
    您没有权限阅读该帖子
  • lorri
    lorri  回复了帖子 ARPE-19难消化的原因 104天前
    我就是用的实验室的,我回头看看
  • lorri
    lorri  回复了帖子 关于视网膜色素上皮细胞生长速度 104天前
    差不多,我也刚刚养
  • lorri
    lorri  回复了帖子 求助,这细胞边上的小黑点是什么? 104天前
    你也养这个细胞吗?你在哪里购的细胞
  • lorri
    lorri  回复了帖子 求助,这细胞边上的小黑点是什么? 104天前
    后来,我又请教了很多人,大家说细胞碎片
  • lorri
    lorri  回复了帖子 科研小白,求助信息 113天前
    对于我来讲就太慢了
  • lorri
    lorri  回复了帖子 求助!!RPE细胞培培养问题,细胞形态越来越怪异 115天前
    我也在养这个细胞,不过用2min,细胞消化不下来,我现在都得用3-4分钟进行消化你们出现过这个问题吗
  • lorri
    lorri  回复了帖子 求助,这细胞边上的小黑点是什么? 115天前
    我昨天也发现这种情况了,我认为是细胞碎片,所以我也比较纠结,发现后又培养了一宿,发现没有显著的增多,不知道是不是和我过度消化有关系最近刚刚买的新细胞,消化的时间一直没有明确,比较糟心,2分钟的消化完全不够,贴壁培养1天消化3分钟还可以,如果2天,消化就得将近4分钟,超过四分钟,细胞就会过度,后来高倍镜下发现细胞中有黑点,感觉和细胞器有点类似,所以就不确定到底是污染了,还是细胞碎片,因为刚买的细胞,还不能扔,请各位高手指教
  • lorri
    lorri  回复了帖子 养细胞中有小黑点,是碎片or污染?如何防范处理 115天前
    楼主,我培养的是色素上皮细胞,最近发现20✖️没有细胞贴壁的部分出现散在黑色的点,贴壁,但是不确定是不是污染,所以又培养了14个小时,黑点没有显著增大多,我起初一直认为是细胞的碎片,但是最近搜论坛大家都说是黑胶虫,所以我一头雾水,今天我又重新进行了传代,并且换皿培养,传代后镜下观察,发现高倍镜下仍然有零星的黑色的类似细胞内细胞器的东西在细胞液中悬浮,我就比较纠结,到底是细胞脆片或者细胞器还是污染了了?请指教

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