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Western blot原理详解

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Western blot原理总结

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  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  发布了新帖 心肺复苏术 8天前

    心肺复苏术心脏骤停是指心脏射血功能突然停止。 最常见的病理生理机制为致命性心律失常,发病率最高的为室颤或室速,其次为缓慢性心律失常或心脏停搏,无脉性电活动较少见。 非心律失常性心脏骤停所占比例较少,常由心脏破裂、心脏流入/流出道急性梗阻、急性心脏压塞所致。(一) 心脏骤停(cardiac arrest) 心脏性猝死: 急性症状发作后1h内发生的以意识丧失为特征的、由心脏原因引起的自然死亡。 心脏骤停发生后,由于脑血流中断,10秒左右即可出现意识丧失,经及时救治可获存活,否则将发生生物学死亡,罕见自发逆转者,是心脏性猝死的直接原因。(二) 心脏骤停的病理生理改变1.缺氧和乏氧:可使心脏发生缺氧性损伤。2.神经系统功能不全:主要为迷走神经功能亢进。3.代谢和化学异常:代谢性酸中毒和/或电解质紊乱

  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  发布了新帖 Western blot 实验原理 9天前

    实验目的及原理※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※  Western Blot是指把目标蛋白质从凝胶支持物转移到膜支持物上,然后利用这一蛋白质的抗体来检测转移至膜上的微量目标蛋白质,用以显示某一种蛋白在细胞或组织中的表达水平。※※※※※※※※※※※※※总体实验原理※※※※※※※※※※※※※  通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或组织样品进行着色,着色位置和着色深度显示特定蛋白在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。※※※※※※※※※※※※※※※各部原理※※※※※※※※※※※※※※1.裂解液PMSF:抑制丝氨酸蛋白酶和巯基蛋白酶(水中不稳定,现用现加)EDTA:金属离子螯合剂,螯合Ca2+、Mg2+等,使蛋白活性中心不能激活,达到抑制蛋白酶的作用。2.Laoding buffer与β-

  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  发布了新帖 打鼾是什么 57天前

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  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  发布了新帖 科研方法小论 69天前

    最近一直想写一些有关科研方法的帖子,自认为自己很渣,做了很久实验,但只是感觉到自己是一个搬砖工,每天坐在实验室干活。其实很多实验技术大家都会,交给一个只是小学毕业的工人,人家照样会做实验,那我们身为研究生,和他们有什么区别吗?我个人觉得没有,大部分科研工作者都没有,只有那么几个人在创新。尤其是医学,肿瘤这个疾病,我们经历了很多年还是没有太多进展,医学道路上太多的研究终会荒废,科学家的研究大多打了水漂。今天,我个人而言,想谈谈我们该如何培养自己的科研思维?1.科研方向超级关键(堪比黄金,一个好的方向多少钱都不换)方向其实是宏观思维,我们必须要读大量的文献。基础知识真心很关键,一个研究方向必须有写入课本,大量证明、甚至是很多最新的进展的总和体现,在准备大量前期的研究以后,再确定研究方向。当然,研

  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  发布了新帖 如何证明一个蛋白参与一个信号通路,以及调节类型?求大神补充 69天前

    如何证明一个蛋白参与一个信号通路:调节类型:Activation、 Inactivation、 Feedback regulation1.敲除上游的蛋白的表达基因(外源性刺激减少表达),观察下游通路表达是否发生变化2.让上游蛋白基因过表达(外源性刺激增加表达),观察下游蛋白的是否发生变化3.敲除和过表达蛋白相关性分析,是最基本的。利用统计学知识分析两个蛋白是正相关还是负相关4.PCR技术观察两者转录过程中是否发生了变化

  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  发布了新帖 浅谈胆红素 69天前

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  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  回复了帖子 SCI被接受的感受 97天前
    过一阵子就好了!哈哈
  • lixiaoxiao0903
  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  回复了帖子 2019考研四次调剂,协和、武大、首都儿医,南方医经验贴!! 206天前
    对啊,当时考研自己太忽略英语了。考这么低真心痛苦。不然跑这么多地方啊😄
  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  回复了帖子 2019考研四次调剂,协和、武大、首都儿医,南方医经验贴!! 206天前
    首都医科大学很厉害,但是它内部保护太严重。
  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  发布了新帖 出售北京协和医学院流行病专业考研资料 209天前

    本人参加了协和阜外医院流行病复试。有复试经验。

  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  发布了新帖 2019考研四次调剂,协和、武大、首都儿医,南方医经验贴!! 209天前

    2018年12月底,我参加北京协和医学院流行病专硕的考试。考完以后,自我感觉不错。就是英语感觉差点。出成绩后英语54分,当时没有感觉分数低,但是加了一个排名群,发现真心不好,今年是一个考研爆满年,真心觉得不好。我总分341,英语54,政治60,专业课327,在出成绩后我就打定调剂了。第一次调剂:武汉大学医学研究院调剂系统还没有开,我在网上看到了武汉大学医学研究院的调剂,就立刻报名了。一般985/211院校调剂都很早,我在三月初就报了名。每天给老师打电话,打听自己能不能参加复试。后来接到了通知,开心了好久!!!我本科发表过一篇影响因子不是很高的SCI,也发表过中文文章,还拿过挑战杯国家三等奖,我觉得自己还有优势。不过,当时刚收到复试通知后是周五,三天后复试,当时周末,害怕老师休息,就没有发邮件

  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  回复了帖子 战友们,考研调剂请赐予我建议 209天前
    我出身不好。而且今年对手们都太强了。我调剂到别的学校了。
  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  发布了新帖 战友们,考研调剂请赐予我建议 257天前

    总分341(英语54、政治60、专业课227),报考协和阜外医院流行病与卫生统计专业。专业是公共卫生预防医学,本科是河北医科大学。发表文章三篇(一篇英文核心,两篇中文核心),获得过挑战杯国家三等奖。求收留!!求推荐调剂学校!!!

  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  发布了新帖 内参蛋白区别标准 792天前

    内参的选择标准: 1.内参分子蛋白量与目的蛋白分子量拉开。 2.内参分子应该不收到实验处理的影响 3.根据实验目的进行选择,如果只是考虑表明加样量一致,区别不大,不同蛋白用不同的内参,线粒体蛋白用cox4,总蛋白actin之类都可以,如果是考察通路,选敏感的内参,监视细胞状态。Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白。同时Actin在细胞分泌、吞噬、移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用。Actin在不同物种之间高度保守,以至于很难获得较好的针对actin的抗血清。Actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,包括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-smooth muscle actin,和γ-smoot

  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  : 有认证,有身份。我是医生,我通过了医师认证,拥有了专属身份标识和查看病例帖的特权,还得到了30丁当的奖励。你是医务工作者吗?一起来认证吧,首次通过医师认证还能免费获得 12 个月用药助手专业版会员http://dxy.me/MNZna2
  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  回复了帖子 测细胞活性氧的方法DCFH荧光法有人做过吗? 1187天前
    被活性氧氧化后的荧光DCFH稳定吗?大概在多长时间上机测比较好?
  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  回复了帖子 有没有人用过sigma的DCFH-DA(D6883)检测过ROS? 1187天前
    大神,能问一下,被活性氧氧化后的荧光DCFH稳定吗?大概能稳定多少时间?
  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  回复了帖子 流式细胞结果分析求助 1187天前
    大神,能问一下,被活性氧氧化后的荧光DCFH稳定吗?大概能稳定多少时间?
  • lixiaoxiao0903
    lixiaoxiao0903  分享了文章  丁香客 1228天前
    丁香客

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