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  • lingdang0923
    lingdang0923  的帖子被加了1分 1582天前

    回复:[求助]请问生产用动物细胞的传代稳定性实验是怎样的?

    jackieustc 细胞库一般有主细胞库和工作细胞库,想知道一般企业现在的做法是如何规定主细胞库的代次的,是第几代,工作细胞库是第几代,之后限传代次是怎么做的。这个是细胞库里规定的东东,需要明确的。从研发角度来考虑,筛选的候选单克隆或亚克隆细胞就需要进行稳定性考察,即在建库之前...
  • lingdang0923
    lingdang0923  回复了帖子 求助 质粒拷贝数的测定方法 1650天前
    您没有权限阅读该帖子
  • lingdang0923
    lingdang0923  回复了帖子 求助 质粒拷贝数的测定方法 1650天前
    麻烦问一下,我用这个方法测得的质粒拷贝数比实际值高10倍,是什么原因呢? 我用稀释涂板的方法测得的菌浓为1 OD600=5×10的8次方,测得的质粒浓度为23.8ng/ul,质粒为100ul, 计算方法与你上面写的一样,质粒是pET28a,拷贝数应该在20-60个左右,为什么我测...
  • lingdang0923
    lingdang0923  回复了帖子 请问怎样定量质粒的拷贝数呢?谢谢 1650天前
    麻烦问一下,我用这个方法测得的质粒拷贝数比实际值高10倍,是什么原因呢? 我用稀释涂板的方法测得的菌浓为1 OD600=5×10的8次方,测得的质粒浓度为23.8ng/ul,质粒为100ul, 计算方法与你上面写的一样,质粒是pET28a,拷贝数应该在20-60个左右,为什么我测...
  • lingdang0923
    lingdang0923  回复了帖子 [求助]请问生产用动物细胞的传代稳定性实验是怎样的? 1650天前
    你好,想问你几个问题,如能回复不胜感激: 原始菌株也要做传代稳定性吗,只做工作种子库的不可以吗? 传代稳定性要做多少代怎么确定呢,红宝书上说“稳定性研究中的传代代次一般是实际生产扩增代次的3倍以上”,如果是传一次算一代,而在生产发酵罐中按倍增次数算,这两个概念怎么统一呢?在发酵罐...
  • lingdang0923
    lingdang0923  发布了新帖 大肠杆菌种子库的遗传稳定性研究 1667天前

    大肠杆菌种子库的遗传稳定性研究是在固体平板连续划线培养吗? 文献里都是挑单菌落继续划线培养,挑单菌落会不会挑到不含质粒的菌?即使挑到含质粒的菌其稳定性会有变化吗?会不会每一代的稳定性数据都一样,因为每次都挑单菌落。是不是不挑单菌落会比较合理? 大家都是怎么做的,请赐教!

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