登录| 注册

丁香客

选择模板

最新动态

  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 【求助】伯乐电转仪Gene Pulser Xcell 使用出现异常问题 25天前
    后来问题怎么解决的呢?
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 【求助】伯乐电转仪Gene Pulser Xcell 使用出现异常问题 37天前
    caixiazcx 最近也遇到这个问题,也是300V 900uF,之前是20ms左右,现在到了34ms,电转完第二天细胞死掉大半,不知道是不是脉冲时间过长导致的对细胞损伤,你后来找到原因了吗?找说明书按照要求校准一下电阻,具体操作过程忘了。如果校准后还是不行就可能电阻坏了,联系工程师维修或者直接买台新的电转仪。
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 重组Fc融合蛋白降解问题 39天前
    zoujing1011 这个问题最后解决了么,怎么解决的? 最后通过降温和加抑制剂来降低降解问题的
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 重组Fc融合蛋白降解问题 39天前
    dxy_oepgdev 加的量是多少 EDTA和酶抑制剂加的量记不清了,EDTA加的量好像是参照消化贴壁细胞胰酶里面的EDTA浓度,酶抑制(具体哪个抑制剂记不清了)是参照使用浓度。
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 关于msx的加压筛选 47天前
    Ly琳鸢 我们做了空白对照,就是CHO-K1细胞和转染后加msx,明显发现转染后的死的更快,这应该就可以说明GS应该是转进去了 建议你可以看看GS表达载体的相关文献,然后再找找可能是哪些原因的。 推荐一篇文献“Amplification Using CHO Cell Expression Vectors”是关于GS表达载体的文献,没法上传文献自能自己网上下载了。 Contributed by Robert E. Kingston, Randal J. Kaufman, C.R. Bebbington and M.R. Rolfe Current Protocols in Molecular Biology (1993) 16.23.1-16.23.13 Copyright © 200
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 申报时MCB和WCB细胞库传代稳定性都要做吗 52天前
    可然冰 版主, 对于已上市产品工艺变更,传代稳定性具体做到那些? 背景: 一、传代方式一致,培养基将动物源成换为非动物源成分,并取消生长因子IGF添加,培养基变更未影响细胞生长速度,培养规模放大(PDL未增加) 具体问题: 1. PDL未变化,是否需重新进行传代稳定性 2.如需提供,scale down规模新培养基,至最高限传代次,检测细胞生产,表达量,基因拷贝数,蛋白质量,是否足够? 3.实际生产规模,EOPC是否需额外检测遗传稳定性,是否需用最高代次细胞复苏,进行实际生产规模生产,考察产品质量及遗传稳定性。 个人感觉,做到2即可。 二、如后续新建工作细胞库,培养基发生上述变化,是否需要重新进行传代稳定性研究? 一、传代方式一致,培养基将动物源成换为非动物源成分,并取消生长因子
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 求问抗体人源化具体怎么做? 59天前
    dxy_f7s4q4hr 我知道鼠抗人源化要把6个CDR区移植到人抗体相应部分。但是具体怎么做呢?比如我现在有一个鼠抗的重链和轻链序列,第一步怎么操作?上哪查它的CDR区都是哪部分?还有怎么查用哪个人抗框架?反正越详细越好。麻烦大佬赐教,谢谢! 这是一篇比较老的抗体人源化文献,可以看看了解一下
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 单抗等电点测定(icIEF) 59天前
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 酪氨酸作为发酵底物,应该如何添加? 60天前
    用碱溶解配置成高浓度的母液作为补料形式添加,每次添加的量很小一般不会影响pH的
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 求问抗体人源化具体怎么做? 60天前
    关于抗体人源化这一方面不是很了解,有很多CRO公司都有这方面的服务,可以跟他们的技术人员了解一下~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 请教大神,如何购买国内没上市的生物药 70天前
    要去当地省局办理药品的一次性进口文件,然后找代理进行购买进口。具体流程可以到省局那里咨询一下。
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 稳定细胞株的拷贝数问题 73天前
    gdxinlan 请教下,单载体和双载体,重链和轻链的拷贝数一般是多少? 是单载体的,由于时间长了,轻重链的拷贝数忘记了。不同项目之间的拷贝数差异差异还是挺大的,从不同项目来看拷贝数与表达量没有线性的关系。
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 单抗筛选新序列新表位 82天前
    应该可以发文章的,你可以了解一下PD-1/PDL-1靶点做了多少个不同抗体,应该有不少文章的。不同家的抗体可能结合表位也是不一样的,最后作用机制可能也是不一样的,这些就需要你好好研究了,是不是跟别人不一样的,区别又是什么。
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 融合蛋白聚体比例增大 84天前
    扬帆起杭 zjubear     一批有10个不同培养条件,之前很多批。之前很多批的条件和现在的差异,不要急,好好花时间查查。这种工艺的变异碰到过,静下心来分析。 谢谢!有几个培养条件跟之前是一样的,但之前都没问题,这批整体都出现了高比例的聚体,调查了一些原因,应该是上游的问题,具体什么原因还没搞清楚,很费解。 对于聚体的问题,这边有篇文章是关于聚体的,希望对你们分析问题调查原因有帮助。 说说关于单抗聚体的那些事
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 工艺变更专贴讨论 84天前
    上市后的变更可能比较容易找的,三期后变更的情况应该比较少见的
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 原始种子库建立的环境问题 94天前
    主种情况没有问题的,只要MCB和WCB在GMP条件建的库就可以了~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 Fc融合蛋白不稳定 97天前
    这种情况可能跟蛋白本身特性或缓冲液buffer有关,我们之前也遇到过这样的情况,通过离心将沉淀收集电泳都是蛋白。一个是亲和层析后就变浑浊,后来重新设计了蛋白序列,另外一个是DS原液放了一段时间后变浑浊,换了buffer就好了。
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 为2020年版中国药典三部生物制品提意见 110天前
    扬帆起杭 laorentou     建议将“生物制品生产检定用动物麵胞基质制备及检定规程”中的“细胞库”改成“工程细胞库”。与后面人用重组单克隆抗体制品总论中提到的工程细胞库管理一致;MCB和WCB是工程细胞库是在要在GMP质量提下管理的,PCB细胞库属于前期研发阶段的细胞库,两类库性质不一样~ 你好,请问你这个新版药典的细胞库资料在哪里能下载? 这是15版的药典,网上检索一下都有的,这个不是20版的~
  • laorentou
  • laorentou
    laorentou  的帖子被加了1分 126天前

    回复:工艺验证生产(PPQ)过程中要不要使用极端工艺参数?

    这张图希望对你理解确定工艺操作范围有帮助  

关于我们|联系我们|版权声明|资格证书|丁香志|加盟丁香园|友情链接 丁香园旗下网站: 丁香园|丁香通| 人才|会议|药学|博客