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【求助】图上的流式细胞检测数据如何分析?

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【资源共享】国外的实验操作视频

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  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 G418加压需要连续加压么? 3天前
    这点死细胞没有关系的,估计平均每个孔一两个死细胞吧。如果担心细胞克隆长不起来,可以不加压培养,等克隆长出来以后再加压培养。不用担心基因丢失,整合到基因组上的没那么容易丢的,只是暂时不表达了一加压就表达了。这样就更容易筛选到你要的克隆了~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 G418加压需要连续加压么? 3天前
    针对你这样的情况,建议在细胞还剩很少的时候,不要铺在6孔板中培养pool。直接接种到96孔板中(0.5~1细胞/孔),每周换一次液三周左右可以长出克隆来,到时直接检测筛选高表达的克隆~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 申报用单抗药活性表征实验中的人血使用 3天前
    根据你的描述,从人血提取的细胞应该归到 生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中六、检定用细胞的要求这一章节要求(一)细胞资料1 . 检定用细胞应具有明确合法来源的证明资料。如果是购买的,应该有采购发票及相关信息,这些是合法来源的证明材料(二)细胞检定应至少进行以下1〜3 项检定,根据检定用细胞用途的不同,还应进行以下其他相关项目的检定。1〜3 项要检定,其他的根据需要等可以先看看药典这一章节要求
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 讨论双抗、抗体等断裂位点 4天前
    对生长没有什么影响的,具体添加浓度需要摸索一下。在有效的条件下尽量降低浓度~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 讨论双抗、抗体等断裂位点 4天前
    很多蛋白降解都是非标准抗体结构的情况出现的,下面两个图片是文献提到的融合蛋白类降解情况。
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 讨论双抗、抗体等断裂位点 4天前
    我们之前做一些Fc融合类蛋白及与你做的相似蛋白也遇到过降解情况,加入蛋白酶抑制剂或降温就明显改善了。没有遇到过像你说的非酶类裂解情况。
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 G418加压需要连续加压么? 4天前
    换液不仅是为了保持G418的浓度,还有培养基也需要更换新鲜的,离心的目的是去除培养基中细胞碎片等对细胞的毒害影响。经过离心反复传代死细胞会越来越少的~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 讨论双抗、抗体等断裂位点 5天前
    一般在什么氨基酸发生断裂的呢?是不是丝氨酸金属蛋白类酶降解的原因呢?
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 版主工作报告总帖(2017 年 4 月开始试行) 9天前
    您没有权限阅读该帖子
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 关于申报IND中试3批必须是连续的吗? 10天前
    附件3:治疗用生物制品注册申报资料指南(试行)适用范围治疗用生物制品临床试验申请;治疗用生物制品新药生产(含新药证书)/上市申请。后面的附件4治疗用生物制品注册申报资料自查表
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 关于申报IND中试3批必须是连续的吗? 10天前
    我们接下来的报IND的项目沟通过计划做一批的~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 Normal Operating Range(NOR)范围如何确定 10天前
    不知道的~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 Normal Operating Range(NOR)范围如何确定 10天前
    我也是没有理解的~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 关于申报IND中试3批必须是连续的吗? 10天前
    现在改革以后一个中试批次就可以了~可以查查最新的指导原则要求,包括现场核查也是抽检的了~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 Normal Operating Range(NOR)范围如何确定 10天前
    是正态分布的一个算法应该有公式的,一个σ是68.27%,2σ是95.45%,3σ是99.73%,~~~依次往后面算,就是正态分布图分布可能区域,我也只理解这些表面的。
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 Normal Operating Range(NOR)范围如何确定 11天前
    其中CPK值影响NOR的范围,网上查到CPK值越大NOR的范围就越窄~这是Cpk<1.0的NOR范围CPK还和6西格玛管理扯上关系,以下是百度上查的CPK来源于6西格玛管理(6σ),CPK值为0.67、1.0、1.33、1.67分别反映的是西格玛水平的2、3、4、5水平等级。在西格玛水平中,1代表能力过小,2代表能力不足,3代表能力尚可,4代表能力充足,5、6代表能力过剩。所以CPK值定位0.67、1.0、1.33、1.67并不是随意定的,是与6σ水平等级的2、3、4、5水平等级相对应的,同时与PPM(每百万产品缺陷数)也有相对应的数据。
  • laorentou
    laorentou  的帖子被加了1分 11天前

    Normal Operating Range(NOR)范围如何确定

    之前看了关于QbD设计,其中提到NOR范围设置没有理解,如果PAR范围是6.8~8.6,CPK>1.5的要求下,NOR应该如何确定呢?有经验的战友可以帮忙解答一下~~
  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 Normal Operating Range(NOR)范围如何确定 11天前
    这个有点意思,这个思路和之前看到一个有点像,超过33%就设定为高影响~
  • laorentou
    laorentou  发布了新帖 Normal Operating Range(NOR)范围如何确定 11天前

    之前看了关于QbD设计,其中提到NOR范围设置没有理解,如果PAR范围是6.8~8.6,CPK>1.5的要求下,NOR应该如何确定呢?有经验的战友可以帮忙解答一下~~

  • laorentou
    laorentou  回复了帖子 细胞建库操作如何做是合规的 13天前
    冻存200支WCB,除去检测后有180支可用,每做一批都做一支备份除以2的话也是90批次~

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