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  • kingnerd
    kingnerd  回复了帖子 CHO细胞分裂每个周期的大概时间 464天前
    是否可以观察细胞大小的分布来看细胞所处在的时期?细胞细胞接种后细胞尺寸先变小后变大,最小的时候可能是细胞集中分裂的时候
  • kingnerd
    kingnerd  回复了帖子 关于细胞冻存液准备对细胞活率的影响 480天前
    可以用培养基过滤接收瓶配置
  • kingnerd
    kingnerd  回复了帖子 单链抗体稳定性研究 480天前
    检测一下糖基化吧,说不定变化显著
  • kingnerd
    kingnerd  的帖子被加了1分 608天前

    回复:求教:构建的细胞直径太大对上游工艺有什么比较大的影响?

    laorentou 一般到补料培养后期受培养基渗透压等各种因素影响,细胞的直径会明显变大的~我认为渗透压升高细胞应该脱水,细胞变小。植物细胞质壁分离就是因为细胞外界溶液浓度比细胞液大导致的。所以细胞直径变大应该是胞浆合成的原因,这个阶段浆核比增大,线粒体数量增加,蛋白大量合成。这...
  • kingnerd
    kingnerd  发布了新帖 CHO细胞培养pH问题 611天前

    最近培养细胞时发现乳酸浓度0.5g/L以下,为什么pH不上升到7.0以上呢?总是在6.8附近。培养基缓冲主要是2.2g/L氢氧化钠

  • kingnerd
    kingnerd  发布了新帖 CHO细胞培养pH问题 611天前

    最近培养细胞时发现乳酸浓度0.5g/L以下,为什么pH不上升到7.0以上呢?总是在6.8附近。培养基缓冲主要是2.2g/L氢氧化钠

  • kingnerd
    kingnerd  发布了新帖 工艺变更(培养基更换) 630天前

    临床阶段更换培养基,这个变更是不是一定要重新做临床?

  • kingnerd
    kingnerd  回复了帖子 能跟我说说GS系统的吗?CHO细胞做GS系统,到底用什么细胞做的,CHOK1还是CHO_S.有人尝试做过吗 637天前
    不是说你的基因拷贝数多了蛋白表达就会增加,关键是细胞代谢的平衡。打个比方,基因就像领导,领导指导蛋白合成,但是手下人不配合,再多的领导也是白搭,光喊口号去了
  • kingnerd
  • kingnerd
    kingnerd  回复了帖子 求教:构建的细胞直径太大对上游工艺有什么比较大的影响? 641天前
    我认为渗透压升高细胞应该脱水,细胞变小。植物细胞质壁分离就是因为细胞外界溶液浓度比细胞液大导致的。所以细胞直径变大应该是胞浆合成的原因,这个阶段浆核比增大,线粒体数量增加,蛋白大量合成。这只是一种猜测,可以试试专门的细胞器荧光染料
  • kingnerd
    kingnerd  的帖子被加了1分 641天前

    回复:求教:构建的细胞直径太大对上游工艺有什么比较大的影响?

    一般CHO细胞直径在培养过程中会先下降后上升,在直径19微米的时候差不多细胞可以收了。直径的转折点一般与细胞进入平台期相关,这个时候细胞直径变大,蛋白大量合成,可能与内质网合成有关。细胞直径小,细胞的比表面积大,一定程度上影响了细胞营养的运输效率。细胞直径小,受剪切力和气泡炸裂影...
  • kingnerd
    kingnerd  回复了帖子 细胞培养工艺放大中的问题之培养基的选择 641天前
    乳酸1.6的话,pH应该还在差不多7.0的样子。pH5应该是细胞裂解造成的,可以做个实验看看,把正常的细胞告诉匀浆,再测一测pH变化。不知道可不可以。同时,细胞破裂,胞内的酶都释放出来,可能会造成铵根离子上升吧。然后考虑细胞凋亡的原因是什么,这个原因应该是多方面的吧,通气也只是一个方面吧
  • kingnerd
    kingnerd  回复了帖子 求教:构建的细胞直径太大对上游工艺有什么比较大的影响? 644天前
    一般CHO细胞直径在培养过程中会先下降后上升,在直径19微米的时候差不多细胞可以收了。直径的转折点一般与细胞进入平台期相关,这个时候细胞直径变大,蛋白大量合成,可能与内质网合成有关。细胞直径小,细胞的比表面积大,一定程度上影响了细胞营养的运输效率。细胞直径小,受剪切力和气泡炸裂影响较小。听说单敲细胞一般细胞直径较小,细胞大小均一
  • kingnerd
    kingnerd  回复了帖子 送中检院原液、自制对照品分装的分装材料讨论 654天前
    我觉得存在外源因子污染风险,特别是人为不经意向液氮罐里面吹气的时候,比如加液氮的师傅就会这么做
  • kingnerd
    kingnerd  回复了帖子 EC50值确定 675天前
    这个是是logistic拟和公式,呈现S型曲线。细胞的生长也可以用该公式进行拟和。A应该是x为0时,纵轴截距。D是当达到最大值一半时对应的X轴值,即EC50
  • kingnerd
    kingnerd  : 有认证,有身份。我是医生,我通过了丁香园认证,拥有了专属身份标识和查看病例帖的特权,还得到了30丁当的奖励。你是医务工作者吗?一起来认证吧,首次通过丁香园认证还能免费获得 12 个月用药助手专业版会员http://dxy.me/MNZna2
  • kingnerd
    kingnerd  回复了帖子 细胞骤死什么原因 686天前
    如果是关键营养成分缺失造成细胞死亡,是否可以通过浓缩基础培养基来证明该猜想?如果是因为积累了抑制细胞生长的毒性物质造成细胞死亡,是否可以通过稀释培养基来证明该猜想?平台期细胞活率陡降是个例还是可以重复?是否可以平行做几个摇瓶来重复?前期将细胞合并于一个大摇瓶培养,随后再分装,并改变培养条件,例如一个采用降温,一个维持初始条件?

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