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  • king_zmx
    king_zmx  的帖子被加了1分 716天前

    回复:求助~EDC/NHS形成酰胺键的反应条件

    感谢楼上战友们的提问和建议,楼主再回来简单回答一下。楼主一直使用的是活性酯NHS修饰的PEG与末端氨基修饰的DNA反应,按理来说,活性酯与氨基的反应可以很快完成,反应接不上,楼主担心是不是NHS在水相中水解,才有本帖一楼的提问,使用两步法,PEG-NHS,加上EDC/sulfo-...
  • king_zmx
    king_zmx  回复了帖子 求助~EDC/NHS形成酰胺键的反应条件 727天前
    1.这是一条单链DNA,碱基配对会形成一定的空间结构,所以在末端修饰了一个氨基以便进行化学反应。2.DNA双链AT,GC碱基上的氨基会形成稳定的氢键吧,我认为氨基很难暴露进行化学反应。(个人想法欢迎指教)
  • king_zmx
    king_zmx  回复了帖子 求助~EDC/NHS形成酰胺键的反应条件 733天前
    适配体(aptamer),根据靶点需要设计不同的序列,从而得到不同的空间结构。:)数据库里搜aptamer各种结构任你挑选
  • king_zmx
    king_zmx  回复了帖子 求助~EDC/NHS形成酰胺键的反应条件 735天前
    感谢楼上战友们的提问和建议,楼主再回来简单回答一下。楼主一直使用的是活性酯NHS修饰的PEG与末端氨基修饰的DNA反应,按理来说,活性酯与氨基的反应可以很快完成,反应接不上,楼主担心是不是NHS在水相中水解,才有本帖一楼的提问,使用两步法,PEG-NHS,加上EDC/sulfo-NHS在MES中活化,三乙胺调pH,再加入氨基-DNA反应,还是没接上。(具体见上文):(按理来说,PEG-NHS与NH2-DNA是可以直接反应的。追究失败原因,可能是所用DNA分子量1万多,而一条链上只在末端修饰了一个氨基,导致与COOH或NHS的分子碰撞效率低而难以连接。至于几位战友从机理方面给出的建议,大家自己好好分析一下吧,楼主有机化学没学好哭。楼主早就换课题了,马上要毕业了。同志仍需努力啊←_←另外,此DN
  • king_zmx
  • king_zmx
    king_zmx  回复了帖子 求助~EDC/NHS形成酰胺键的反应条件 1119天前
    谢谢这位站友。可能我上面没有表述清楚。我一直做的是两步法: 将PEG-COOH(实际上是PEG-NHS,怕NHS在水相中水解速率太快而加入EDC等活化) ,在EDC/sulfo-NHS MES中(pH6.0)中活化20min,加入三乙胺(比例我没有具体算)调节pH7.0以上,与氨基修饰的DNA反应2小时反应。(后来也尝试过用文献用一步法)为判断PEG-NHS中NHS的活性,直接用PEG-NHS,不加EDC/sulfo-NHS,在上述条件MES中(pH6.0)20min,加入三乙胺调节pH7.0以上,与氨基修饰的DNA反应2小时反应也没有结果。最后我思考,可能原因是所用DNA分子量1万多,而一条链上只在末端修饰了一个氨基,导致与COOH或NHS的分子碰撞效率低而难以连接。最后我放弃这个反应了,
  • king_zmx
    king_zmx  悬赏5丁当求助 1147天前

    求助~EDC/NHS形成酰胺键的反应条件

  • king_zmx
  • king_zmx
    king_zmx  发布了新帖 conventional T cells 指哪些T细胞? 1338天前

    您没有权限阅读该帖子

  • king_zmx
    king_zmx  回复了帖子 在线等急,CD4+T细胞/CD8+T细胞表面标记 1347天前
    我找到了!谢谢!!
  • king_zmx
    king_zmx  回复了帖子 在线等急,CD4+T细胞/CD8+T细胞表面标记 1348天前
    如图,CD4/CD8的配体为MHC II/I,范围太广。 我查文献只找到CTLA-4的适配体,CTLA-4主要表达于CD4+T细胞,也表达于CD8+T细胞。但我另外想找到特异性高表达于CD8+T细胞的受体或抗原,从而找到其对应的配体(适配体/多肽)?我需要特异性靶向结合CD4/C
  • king_zmx
  • king_zmx
    king_zmx  回复了帖子 致14年上交(上海交通大学医学院) 1727天前
    LZ你好,我15年报考药学院想调到医学院的药学,不知复试有哪些内容,专业课需要准备什么?有考研交流群吗?

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