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  • jueli123456
    jueli123456  : 有认证,有身份。我是医生,我通过了医师认证,拥有了专属身份标识和查看病例帖的特权,还得到了30丁当的奖励。你是医务工作者吗?一起来认证吧,首次通过医师认证还能免费获得 12 个月用药助手专业版会员http://dxy.me/MNZna2
  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 4个月了,复审后退稿…… 16天前
    赞成,不要催编辑部…… 论文一般,修改量大,可发可不发,你一直催,编辑部很可能直接拒稿了。 论文修改本来就得很多遍,不能急啊!尤其不要多次催编辑部。
  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 4个月了,复审后退稿…… 16天前
    不能催,不能催。 不要催编辑部,不要催编辑部。
  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 综述退稿 16天前
    大修一下,接着投别的期刊。一定要修改,不然被拒的风险很大。
  • jueli123456
    jueli123456  的帖子被加了1分 16天前

    回复:慢病毒转染与不完全培养基

    dxy_j41dzjo8 那应该是怎么个步骤,我慢病毒转染失败三次了先用96孔板做预实验。MOI很重要,一般取1,10,100.Polybrene稀释为5μg/ml感染病毒。96孔板种植5000个到10000个细胞。一般3天出现荧光,第5天最亮。购买病毒时一般附有说明书。我失败了...
  • jueli123456
    jueli123456  发布了新帖 直标流式步骤总结 18天前

    细胞流式根据研究蛋白质的位置不同,可分为膜内、膜外两抗种原。还可分为间标和直标,因为细胞流式对细胞总数要求高(至少10000个细胞才可以出结果),建议选用流式专用直标抗体。膜内直标流式步骤如下:1、贴壁细胞用胰酶消化,终止胰酶,800r/min,5min离心。2、弃上清,用PBS洗2遍弃上清。3、用1%多聚甲醛固定30分钟。PBS洗2遍,800r/min,5min离心。4、弃上清,0.1% Triton X+2%山羊或者牛血清+直标抗体染色。(0.1% Triton X+2%山羊或者牛血清稀释抗体,此步骤开始需要在暗室中进行),室温孵育30min至60min。5、清洗抗体,PBS洗2遍,800r/min,5min离心。6、 弃上清,500ulPBS重悬,置于流式专用管中。拿去流式机器上机即可

  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 细胞计数问题 18天前
    细胞流式根据研究蛋白质的位置不同,可分为膜内、膜外两抗种原。还可分为间标和直标,因为细胞流式对细胞总数要求高(至少10000个细胞才可以出结果),建议选用流式专用直标抗体。膜内直标流式步骤如下:1、贴壁细胞用胰酶消化,终止胰酶,800r/min,5min离心。2、弃上清,用PBS洗2遍弃上清。3、用1%多聚甲醛固定30分钟。PBS洗2遍,800r/min,5min离心。4、弃上清,0.1% Triton X+2%山羊或者牛血清+直标抗体染色。(0.1% Triton X+2%山羊或者牛血清稀释抗体,此步骤开始需要在暗室中进行)5、清洗抗体,PBS洗2遍,800r/min,5min离心。6、 弃上清,500ulPBS重悬,置于流式专用管中。拿去流式机器上机即可。  耐着性子
  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 慢病毒转染与不完全培养基 18天前
    先用96孔板做预实验。MOI很重要,一般取1,10,100.Polybrene稀释为5μg/ml感染病毒。96孔板种植5000个到10000个细胞。一般3天出现荧光,第5天最亮。购买病毒时一般附有说明书。我失败了很多次才转染成功,做实验慢慢来,不要急。
  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 细胞培养出现小黑点,逐渐增多,2-3天内全部变成黑色碎片状,培养基澄清 31天前
    听你的描述,像传说中的黑胶虫。应该是污染了,这个污染很厉害,很快所有培养瓶都会污染,把培养箱好好消消毒吧!
  • jueli123456
    jueli123456  悬赏10丁当求助 36天前

    Intra-class相关系数分析

  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 肾小球足细胞讨论专区 65天前
    这个帖子真好,您好孤单啊。我是最近才开始关注足细胞。研究肾脏疾病的,足细胞真的很重要。果断成为您的粉丝。佩服您!
  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 汗哥 申请辞去 儿科专业讨论版 版主职务 71天前
    您没有权限阅读该帖子
  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 慢病毒转染与不完全培养基 76天前
    10%太高了。建议不完全培养基转染病毒,不过看看转染上没……慢病毒本来就难转染,建议下次减少血清浓度。
  • jueli123456
    jueli123456  的帖子被加了1分 78天前

    回复:慢病毒转染与不完全培养基

    dilyting 试剂公司说血清和双抗对慢病毒转染不影响,心理总觉得不接受啊?到底能不能加血清和双抗呢可以2%血清和少量0.5%双抗……用polybrene和enhance,影响不大。血清双抗尽量少,有时甚至完全无血清和双抗。你要是不放心,可以无血清无双抗进行转染。
  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 SCI写作交流 78天前
    我的实验方法很简单,时而很有信心,时而没有信心,导师说让我投个英文的试试。看人家都很高大上……刚开始写SCI,是不是都是这个样子啊?
  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 SCI写作交流 80天前
    谢谢大神中肯的建议,我会沉下心好好写的。
  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 SCI写作交流 80天前
    大家都是怎么入手写英文文章的?是直接写英语文章还是汉语写好了,翻译成英文。那些复杂的英语句子,大家是怎么写出来的?求助大神指点。我看了很多视频,英文SCI怎么写等,都无卵用,我现在有东西,却没写过英文文章,感觉动不了笔啊。大神莫嘲笑啊。求助求助。
  • jueli123456
    jueli123456  发布了新帖 SCI写作交流 80天前

    本人研究生一枚,英语不好,六级没过。实验做完了,想写篇SCI,感觉好难啊。写了个英文标题就放下了,论文写作一推再推,每每想起了都好自责。想当初看英文文献,刚开始1周看一篇,看完了也不知道什么意思。看了后面,忘了前面,现在好了,1小时能看完一篇,意思基本能理解。但是让我写英文文章,我。。。大家都是怎么入手写英文文章的?是直接写英语文章还是汉语写好了,翻译成英文。那些复杂的英语句子,大家是怎么写出来的?求助大神指点。

  • jueli123456
    jueli123456  回复了帖子 慢病毒转染与不完全培养基 81天前
    可以2%血清和少量0.5%双抗……用polybrene和enhance,影响不大。血清双抗尽量少,有时甚至完全无血清和双抗。你要是不放心,可以无血清无双抗进行转染。
  • jueli123456
    jueli123456  发布了新帖 二抗选择与一抗是类型或亚类的关系? 141天前

    众所周知,二抗选择是Western及免疫荧光、流式成功的关键。 除了要与一抗的种属来源相一致,二抗还需与一抗的类别或亚类相匹配。阅读书本上的这段话,不太懂?大家见过小鼠IgM一抗没?为什么二抗是抗小鼠IgG抗体,而不是抗IgM抗体?我的二抗都是多克隆抗体,是不是就不用了解那么复杂的知识?除了要与一抗的种属来源相一致,二抗还需与一抗的类别或亚类相匹配,这通常是针对单克隆抗体而言。一般来说多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。而单克隆抗体则相对复杂些,由于单克隆抗体有不同的类别和亚型,因此相应的二抗也需要根据这些亚型进行选择。     单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果您的一抗是小鼠IgM,那

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