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【新进展】干细胞研究新进展

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【求助】青年基金项目主要参与者介绍很重要吗?

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【求助】IP的细胞裂解液

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  • joo
    joo  发布了新帖 HEK-293细胞中能否表达精子特异性蛋白 130天前

    此前应用质谱对目的基因互作蛋白进行鉴定,意外检测到一种精子特异性蛋白。检索了数据库,看到该种蛋白在精子中呈现高表达,在其他组织中也有表达但很低。想请教各位战友,这种情况是质谱肽段高通量检测具有一定的不准确性呢,还是人胚肾细胞中表达精子蛋白也是很正常造成的呢?

  • joo
    joo  发布了新帖 人胚胎干细胞三胚层分化的检测时间 480天前

    想检测干扰因素对人胚胎干细胞三胚层分化的影响,想请教下收集细胞的时间点。谢谢!

  • joo
    joo  回复了帖子 投clinical genetics的original paper还是short report 480天前
    投了被拒了,换的别家
  • joo
    joo  回复了帖子 DNA损伤综述的SCI杂志投稿 487天前
    多谢多谢!
  • joo
    joo  回复了帖子 EB悬浮培养 673天前
    我现在也出现了这种问题,请问前辈们解决了吗,找到问题所在了吗?
  • joo
    joo  发布了新帖 DNA损伤综述的SCI杂志投稿 709天前

    想投稿一篇DNA损伤分子机制方面的综述,目标为SCI杂志3-4分以下吧,1.5以上。个人觉得基础性分子研究、肿瘤、衰老等方面杂志都行,求推荐,谢谢!

  • joo
    joo  回复了帖子 人ES细胞拟胚体 790天前
    同问!
  • joo
    joo  回复了帖子 人胚胎干细胞传代后死亡 823天前
    自己顶一下,求回复!
  • joo
    joo  发布了新帖 人胚胎干细胞传代后死亡 831天前

    无饲养层人胚胎干细胞H1和H9,冻存前状态不错如图1,复苏后状态也和冻存前差不多。一星期左右传代。不知道为什么一传代细胞就死了,自己观察了下24小时细胞还贴壁了形态正常,48小时以团块为单位出现变圆,接着就都死亡了图2、图3、图4。同时培养皿里出现一些亮亮的空泡如图3和图5。消化液已经换过一次了看来不像是消化液的问题。怀疑是Matrigel的问题,可是复苏以后细胞能够贴壁生长能够传代。请教有经验的战友,这能是啥原因啊!再有,看图3和图4中的部分细胞团块,是不是拟胚体呀我也不懂!是的话就还是考虑贴壁的问题。

  • joo
    joo  回复了帖子 人胚胎干细胞培养 831天前
    我也是新手,不过楼上战友的状态应该是有问题的,应该是贴壁克隆样生长。此外干细胞培养基的确不能37度预温,这个培养基说明上有提示。
  • joo
    joo  回复了帖子 无feed人胚胎干细胞用什么培养基好? 831天前
    听说TESR1给予细胞更充分的营养,赋予细胞更好的分化能力。E8要差一些。mTeSR1要比E8贵。
  • joo
    joo  回复了帖子 人胚胎干细胞 无饲养层培养 831天前
    Matrigel使用时每个批次会有一些差别,建议购买时索要自己批号的说明书,上面有具体稀释的数据。
  • joo
    joo  回复了帖子 用质谱分析的方法筛选互作蛋白,PAGE胶上条带切割的问题 893天前
    汇报下后续进展,最后是将全部的胶条送公司的,回报了接近300个结合蛋白。期间也做过单一条带切割的,不过就像前面战友说的那样,回报的也是众多的蛋白,这种方法很难或基本上不能鉴定单一蛋白。我觉得质谱就是高通量的一个鉴定方法,其中也有许多不足,如我做互作蛋白的饵蛋白没有鉴定到,确鉴定到了其同源蛋白。咨询公司说可能跟酶解的位置和后续搜库等有关。另外,磷酸化的问题我也遇到过,也没有找到更好的办法解决。但是我质谱鉴定的互作蛋白,从中选了10个可信度高的用相同的互作分离方法结合WB验证到了9个,感觉还是可以的。 
  • joo
    joo  回复了帖子 人胚胎干细胞培养 898天前
    换液的时候只需要更换培养液,传代前需要重铺基质胶,然后消化干细胞。
  • joo
    joo  回复了帖子 做ESC的战友帮助看看这是否是拟胚体(EB图片) 898天前
    同问,新手上路!
  • joo
    joo  回复了帖子 悬滴和悬浮培养生成EB有什么不同?望高手赐教 899天前
    学习了,楼主讲的比较详细!受益匪浅。
  • joo
    joo  回复了帖子 胚胎干细胞形成拟胚体技术细节 899天前
    后来人,学习中......
  • joo
    joo  回复了帖子 一个转录因子足够让胚胎干细胞向神经细胞分化 1013天前
    受益了!
  • joo
    joo  回复了帖子 个人~胚胎干细胞相关资讯总结专帖 1026天前
    真不错,点赞!如果能延续下来就更好了!
  • joo
    joo  发布了新帖 人胚胎干细胞代数问题 1234天前

    新手一枚,想请教人胚胎干细胞在研究工作中最多用到多少代啊?谢谢!

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