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  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 求助“关于石蜡组织DNA的提取” 6小时前
    二甲苯有毒,但作为身经百战的实验小白鼠们都小意思啦,师兄用BIOG的试剂盒也是用二甲苯处理石蜡包埋样本的,通通风就行。还有说二甲苯是油漆稀释剂,路边闻到一点油漆味不会怎么样,只要不是长期在那个氛围就好啦~
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 脑脊液DNA提取 10天前
    看看文献其他人怎么做的,脑脊液比较珍贵的话,还是手提的好,用试剂盒会有一定的损失。或者可以尝试下BAIDAI的看看,之前师兄提血清DNA还可以的。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 请教核酸提取仪磁珠法和离心柱法的优略对比 12天前
    赞同george_try发表的观点,磁珠法很方便,特别是磁珠法自动核酸提取试剂盒配合仪器实现快速高效的实验,手动提取的话,柱提的纯度和得率要更高些。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 提取动物组织RNA用于RT-PCR的话,是应该微量提取吗? 13天前
    试剂盒可以去除蛋白、色素、脂类、杂质等污染,BIOG的提取试剂盒提取RNA纯度挺高的,可以直接应用于RT-PCR,20分钟左右即可,我师兄之前用过。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 求教:微量羊水细胞DNA的提取方法 18天前
    相对简单的方法就是用试剂盒做,效果不错,操作也不太麻烦,应该符合预期,用1.5ml的羊水可以提取到DNA进行PCR。据我所知BIOG试剂盒适于细胞量小于104样本的DNA提取。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 做RT-PCR模板是用总RNA,还是纯化的mRNA? 26天前
    提取总RNA还是mRNA取决于实验目的。一般情况下(如克隆基因或比较不同样品间基因表达水平时),提取总RNA即可作为RT-PCR的模板。这样可以减少获得cDNA的实验步骤,从而减少实验误差。另外,分离总RNA要比分离mRNA少用一些试剂,因此更经济。但是若要构建cDNA文库,则需要分离mRNA作为模板,以便提高cDNA文库的质量。如果使用试剂盒,则根据kit的使用说明就可以例如Qiagen、BIOG。也可使用传统的单试剂方法。但是需要注意以下几个问题。注意RNA的降解:RNA降解的可能性很大,但是并不可怕。书上要求塑料耗材需要用DEPC浸泡过夜后高压灭菌。如果使用的是一次性的塑料耗材,可以直接高压灭菌用于实验。使用的蒸馏水需要配成0.1%DEPC水过夜后高压灭菌。操作过程,尽量不要交谈,可以
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 大鼠原代肝星状细胞转染 28天前
    可能lipo2000对细胞毒性较大,我师兄用的RFect还不错的,对细胞毒性很低,转染率也高,但是不确定你的细胞是不是可以哦,可以问下看。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 昨天给小鼠打肿瘤细胞nalm6扎到手了,不知道要不要紧 28天前
    做实验真的风险好大,要做好防护,小心再小心啊,以后定期体检吧
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 猫口腔溃疡的治疗 28天前
    最好去冲去宠物医院确诊一下,确诊后再根据需要打针吃药,如果是猫杯状病毒可以用相关的定量PCR试剂盒来检测。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 猫口腔溃疡的治疗 28天前
    最好去冲去宠物医院确诊一下,确诊后再根据需要打针吃药,如果是猫杯状病毒可以用相关的定量PCR试剂盒来检测。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 猫口腔溃疡的治疗 28天前
    最好去冲去医院确证一下,确证后再根据需要打针吃药,如果是猫杯状病毒可以用BIOG的定量PCR试剂盒来检测。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 血液中DNA的含量 30天前
    你的血样真的好多啊,以BIOG的试剂盒为例,一般200-300ul全血可以提5ug左右DNA,如果2ml可以提50ug,富集的话可以浓度更高,这个看你的需求了。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 脑脊液人基因组DNA的提取 34天前
    不知道你解决了没有,我们这师兄用的BIOG提取效果可以的,现在很多类似的核酸提取试剂盒,但是脑脊液比较珍贵,要选好一点的牌子,不放心的话,手提也可以。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 脑脊液rna该怎么提取 34天前
    手提的吗?用试剂盒提也可以的
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 脑脊液RNA提取? 34天前
    普通样本脑脊液中RNA量比较少,病理的会多些,可以问几家试剂盒公司看看,听师兄说BIOG的kits用着可以的
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 原代细胞转染 40天前
    你自己用了吗?siRNA的浓度和试剂量一开始可以参考说明书里的,弄不清可以咨询下公司技术看看
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 石蜡切片mRNA原位杂交 45天前
    石蜡切片可以保持组织细胞的形态结构,且容易存放在室温,而冰冻切片比较麻烦,一定要存在 -80℃的低温冰箱中,尤其是用来做原位杂交的切片,为了防止 RNA降解,保存一贯很重要。由于石蜡切片可以切到 4 μm 左右,所以原位杂交探针容易渗透到组织中去,容易成功,而且得到的颜色/形态都较冰冻切片好。
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 请教FFPE石蜡组织切片RNA提取问题? 45天前
    许多实验室研究人员习惯将组织蜡块切片后长期保存在室温条件下,而切片后的组织在室温下长期保存抗原易损失。一些研究发现,切片在室温下保存3个月以上,免疫组化染色结果会出现减弱,甚至阴性。因此,有学者进行了新、旧切片保存时间对照实验。选择11种不同组织蜡块每例连续切10片,共110片,常温空气中放置1个月、3个月、6个月、1年再与新切片进行对照实验。实验结果表明,蜡块切片后室温保存3个月,抗原对多数抗体的敏感性下降50%,部分切片抗原丢失更多;切片保存6个月多数抗体不出现阳性结果,保存1年以上仅有个别切片有微弱阳性表达,尤其核表达抗原丢失更为突出。究其原因可能与氧化作用有关,所以在实际工作中可以采用蜡封固切片和-20度低温保存组织切片来避免抗原损失,或石蜡组织块4度保存,用时再切片使用,这就可以大
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 [求助]石蜡包埋组织提取RNA 46天前
    现在的试剂盒很多,有针对性的可以试下
  • jonyone
    jonyone  回复了帖子 肺组织的石蜡包埋步骤 48天前
    一般你选购了试剂盒就可以获得说明书的

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