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回复了帖子 蛋白分离纯化及填料选择问题超强技术支持,尽管问:)
176天前
非常感谢老师。关于您的建议,我用benzonase酶切过,但是效果并不理想,并且酶切受盐浓度等其他因素影响,它的酶切会有一个终止限度,这个限度受样品中的原始DNA浓度影响很大,并有文献报道对于与病毒黏附的DNA酶切效果较差,这就又回到避免DNA和病毒蛋白的相互作用的问题上。加盐我试过加氯化钠,曾在某篇文献中看过lysis释放的DNA作用类似CEX,而释放的组蛋白和病毒类似AEX,也会与其他污染物通过疏水、氢键或金属螯合作用形成复合物,理论上可以通过加0.5-2M的氯化钠来降低他们的作用。但是我以前另一个病毒的实验中发现在高盐下,不知是否由于高盐DNA的溶解度增高,分子筛无法有效去除,而高盐上HIC收率并不高,后来觉得理论上Na-DNA应该会低盐析出,但可能是由于病毒的复杂性未能成功且快速稀释