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    书一页  回复了帖子 新人升级 求4人互fen~ 176天前
    已fen,互guan
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    书一页  回复了帖子 互guan互fen,互帮互助 176天前
    已fen,互guan
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    书一页  回复了帖子 新人求互fen 176天前
    已fen,求hu
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    书一页  回复了帖子 升级求hu fen 176天前
    hu huan
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    书一页  回复了帖子 升级求hu fen 176天前
    @fen
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    书一页  发布了新帖 升级求粉 176天前

    要升级要升级

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    书一页  回复了帖子 蛋白分离纯化及填料选择问题超强技术支持,尽管问:) 176天前
    非常感谢老师。关于您的建议,我用benzonase酶切过,但是效果并不理想,并且酶切受盐浓度等其他因素影响,它的酶切会有一个终止限度,这个限度受样品中的原始DNA浓度影响很大,并有文献报道对于与病毒黏附的DNA酶切效果较差,这就又回到避免DNA和病毒蛋白的相互作用的问题上。加盐我试过加氯化钠,曾在某篇文献中看过lysis释放的DNA作用类似CEX,而释放的组蛋白和病毒类似AEX,也会与其他污染物通过疏水、氢键或金属螯合作用形成复合物,理论上可以通过加0.5-2M的氯化钠来降低他们的作用。但是我以前另一个病毒的实验中发现在高盐下,不知是否由于高盐DNA的溶解度增高,分子筛无法有效去除,而高盐上HIC收率并不高,后来觉得理论上Na-DNA应该会低盐析出,但可能是由于病毒的复杂性未能成功且快速稀释
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    书一页  回复了帖子 蛋白分离纯化及填料选择问题超强技术支持,尽管问:) 176天前
    chromatography老师你好,我有病毒纯化方面的问题想请教一下1、病毒是胞内病毒,基本都得要破碎细胞后才能释放,但是这样就会导致病毒和宿主DNA的粘附或者其他结合作用而无法去除DNA,请教是否有什么建议2、AEX,Equ buffer是20mM Tris,PH8.0,上样后只能洗脱下来一小部分,其他的2M NaCl也无法洗脱,只能通过NaOH  CIP,Q、DEAE等强弱离子柱和CIM整体柱都是差不多的现象,不知道是否是在柱上变性,或者没变性但是有疏水及其他作用结合(尿素洗脱等会使病毒蛋白完全变性的方法也不适合用),类似的现象以前做其他蛋白也遇到过,但是没有什么好的解决方法或者其他适合的纯化方法,大佬是否可以指教一下
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    书一页  回复了帖子 蔗糖密度梯度离心 440天前
    鸡胚尿囊液中的卵清蛋白等杂蛋白,可以浓缩时多透析
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    书一页  加入了调查派 1056天前
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    书一页  回复了帖子 求助!!!悬赏关于陈旧性跟腱断裂的PPT 2670天前
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    书一页  回复了帖子 求助!!!悬赏关于陈旧性跟腱断裂的PPT 2670天前
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    书一页  回复了帖子 重庆长寿人民医院麻醉科怎么样? 2670天前
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