选择模板

更多 发表的帖子

1788

浏览

【求助】SUMO酶切不开目的蛋白

回帖:5    收藏:0    投票:0

1006

浏览

【求助】proteinA亲和填料是否可以纯化多抗

回帖:2    收藏:1    投票:0

更多 最新动态

  • highman52
    highman52  的帖子被加为精华了 605天前

    病毒灭活/去除的灭活流程

  • highman52
    highman52  回复了帖子 关于SDS-PAGE出现的问题求解答 896天前
    是不是Marker也没有跑动?如果是这样的话,确认下配置的胶是否正 确,同时确认下仪器是否正常工作(比如是否正确连接,里面的溶液在移动),其实无非就那些因素,实在不行,就换个人或换个地方做一次。
  • highman52
    highman52  回复了帖子 sumo蛋白酶切不开带sumo标签的蛋白 903天前
    1、是以前切的开现在切不开了,还是一直都切不开 2、如果是一直都切不开,也是正常的,有些蛋白确定很难切开,可能是由于三级空间结构的问题,也有可能是切开效率不高。 3、如果是切开效率不高,那么你需要优化一系列参数,比如说温度、酶量、酶切时间、酶活是否足够、另外自身样品缓冲液环境、也要考虑是否含有蛋白酶等等,自已首先确定最有可能的因素,一步步做下去。不要完全相信别人提供的条件与参数,因为这些条件的成立是有许多前提条件的。
  • highman52
    highman52  的帖子被加了1分 1087天前

    回复:Capto Q可以长期保存在NaOH里吗?要是可以,多大浓度的?

    您没有权限阅读该帖子
  • highman52
    highman52  的帖子被加了1分 1120天前

    回复:关于抗体电荷异构体之间是否存在相互转化问题?

    现在主流的测电荷异质性是通过离子柱来分析,但是它的分辨率达不到我们理想中的要求(峰之间完全分离),但是这是现状,所以技术还有待进一步发展。既然分辨率达不到完全分离,那么表明组分之间没有完全分离,完全有可能酸性峰有碱性峰,碱性峰中有酸性峰(如果做过纯化,可能理解会更深刻)。个人认为...
  • highman52
    highman52  回复了帖子 赫赛汀的dose 1220天前
    不同的药剂量都不一样,即然赫赛汀一瓶是440毫克,那么你做的生物类似药也应该做440mg.那么一剂量就是440毫克.个人理解。
  • highman52
    highman52  发布了新帖 一次性储液袋 1220天前

    想问下各位大侠,单抗中试放大后,是采用一次性储液袋,还是用的桶。一次性储液袋的优点就不用说了,但肯定成本比较高,用桶或其它的话比较麻烦,对内毒素等控制风险较高。主要是想了解使用一次性储液袋的必要性?

  • highman52
    highman52  回复了帖子 病毒灭活/去除的灭活流程 1303天前
    shayatou1983兄找的那个公司叫啥名字呢,药审中心认可了吗?
  • highman52
    highman52  回复了帖子 病毒灭活/去除的灭活流程 1317天前
    我总结下对你回复的理解,不知道正不正确?通过与中检所沟通,设计好实验方案,此方案包含可能性比较大的灭活方案(比如pH3.4灭活,然后不同时间点取样;pH3.3 灭活,然后不同时间取样检测,然后哪个行就用哪个参数)。然后膜过滤也基本是这样设计思想。我为什么提这个问题呢,我之前的理解...
  • highman52
    highman52  回复了帖子 病毒灭活/去除的灭活流程 1317天前
    感谢您的解答,确实灭活相对要简单些,而灭活的参数一般依据什么原则去选择呢?因为抗体在比较宽的范围内是稳定的,我是选一个较低pH值,较长时间参数(理论上越低pH,时间越长,灭活效果越好),还是根据文献,专利,以此为依据去选择,或者还是凭经验凭感觉随便选一个? 另外你提到膜过滤相对而...
  • highman52
    highman52  : 病毒灭活/去除的灭活流程 http://dxy.me/RvEfa2 本人主要做的单克隆抗体纯化这方面的工作,进展还没到病毒灭活/去除验证这一步,但现在想提前了解病毒灭活/去除验证方面的问题,之前我也找人咨询过,不过依然还是有些疑问。我现在已做出抗体在稳定范围(比如pH可以降到3,...
  • highman52
    highman52  回复了帖子 DoE实验设计应用文档 【分享】 1326天前
    做过一些DOE,但还是对DOE不是太懂。有一些问题想请教,做DOE很难遇到R2,Q2 ,P等值比较完美的情况,比如R2高,而Q2很低,像这种情况是不是意味着这不是一个很好的模型?另外有些DOE的反应值,明显差明不大,在误差范围内,还同样也能做出一系列等高图等等,像这种情况如何处理...
  • highman52
    highman52  回复了帖子 AKTA Club蛋白纯化答疑专贴——有问必答! 1326天前
    有个很傻的问题,为什么大家常常都用254测核酸,而不用260呢?我记得核酸的最大吸收波长在260nm处
  • highman52
    highman52  回复了帖子 关于抗体电荷异构体之间是否存在相互转化问题? 1392天前
    现在主流的测电荷异质性是通过离子柱来分析,但是它的分辨率达不到我们理想中的要求(峰之间完全分离),但是这是现状,所以技术还有待进一步发展。既然分辨率达不到完全分离,那么表明组分之间没有完全分离,完全有可能酸性峰有碱性峰,碱性峰中有酸性峰(如果做过纯化,可能理解会更深刻)。个人认为...
  • highman52
    highman52  回复了帖子 抗体药物开发涉及的相关政策,法规 1394天前
    名字而已,实力可不高,望各位大侠指点。
  • highman52
    highman52  回复了帖子 抗体药物开发涉及的相关政策,法规 1394天前
    许多法规,都是大纲性规定,不会很具体,有时读来很难理解,如果有大侠能结合具体案例或具体操作去解读,我想是最好不过了。单纯的谈论有哪些法规,其深度还不是很够。
  • highman52
    highman52  回复了帖子 生物制药产业化及膜分离技术,下游纯化解决方案专帖! 1411天前
    您好!想求教个问题,我做的是一款单抗产品,纯化工艺的最后需要将抗体浓缩到50mg/ml以上,这时候问题就来了,高浓度的超滤极易导致多聚体的产生,想请问下我们从哪些方面去控制多聚体产生?从泵?工艺参数?还是膜种类?还是其它? 我们现在小试用的是PALL与MILLPORE的0.1m2...
  • highman52
    highman52  回复了帖子 求助:离子交换层析洗脱步骤设置 有图! 1431天前
    装柱体积太大,洗脱时间太长,线性梯度洗脱体积太小,分辨率不够。
  • highman52
    highman52  回复了帖子 抗体不能结合proteinA柱 1434天前
    有几点信息必须确认 1、是否穿透,需要检测穿透 2、ph3.5洗不下来,试试ph3.0,如果洗的下来,说明洗脱力不够 3,如果都不行,看看抗体是否降解
  • highman52
    highman52  回复了帖子 AKTA purifier设置问题 1434天前
    手动控制中,PUMP-Systempumpcontrolmode,在里面设置参数就可以了

关于我们|联系我们|版权声明|资格证书|丁香志|加盟丁香园|友情链接 丁香园旗下网站: 丁香园|丁香通| 人才|会议|药学|博客

Language Copyright © 2000-2018 DXY All Rights Reserved.
网站备案号:浙B2-20070219