登录| 注册

丁香客

选择模板

更多 最新动态

  • hh634051511
    hh634051511  发布了新帖 求助:Merge后的照片排版时看不到了 764天前

    这个是我准备排版的照片。里面的图层5怎么看不到了?这张是图层5的原图,merge完的照片,排版的时候就成了白色的了,请问这种问题怎么解决?

  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 免疫荧光化学技术教学课件 865天前
    搞笑,一样的东西分四次来骗丁当,这种瓜皮帖子也能存在这么长时间,版主是干什么的
  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 求助病毒稀释 867天前
    谢谢!无用的无血清完全培养基。效果还可以
  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 慢病毒转染请教 868天前
    另外还想问一下慢病毒转染进入细胞后可以传代吗?我看了一些资料说慢病毒是将目的基因整合到细胞基因组里,不具备增殖的能力,这样的话是不是表示目的基因整合到基因组中之后,转染完成的细胞再增殖就会带有目的基因?我刚做慢病毒不久,很多常识性的东西不是很了解,希望各位前辈多多指教!
  • hh634051511
    hh634051511  发布了新帖 慢病毒转染请教 868天前

    最近再做慢病毒转染,转染干细胞,过表达目的蛋白,MOI值的实验已经做过,转染的时候培养基加了1%双抗,设置了不同的组,有polybrene、ENI.S的,最后荧光表达效果来看是加了双抗的培养基效果最好,来园子里看到做慢病毒转染的时候培养基不能加双抗,请教各位前辈这是什么原因呢?我看了一下目的基因里有Ampr,这个是不是要用青霉素来筛选?

  • hh634051511
    hh634051511  发布了新帖 求助ELISA的选择 868天前

    本人最近在做慢病毒感染,感染的表达产物是一种单抗,胞外分泌的,想用elisa来检测单抗的表达情况,想请教一下各位前辈elisa试剂盒的选择,包括抗体,试剂盒等等,elisa以前没做过,对elisa也不了解,希望各位前辈帮忙解答一下,感谢!

  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 细胞培养常见污染识别及处理 868天前
    我也来分享一个。原代培养,隔了一天没看,再看镜下变成这样子了,不知道是什么菌污染,头一次遇见这种情况,希望各位前辈帮忙掌掌眼。
  • hh634051511
    hh634051511  发布了新帖 求助细胞抗体检测 868天前

    请教一下各位前辈,慢病毒感染干细胞后,后续表达产物的监测用什么方法好?目的产物应该是分泌在胞外的,目前已知用ELISA或者western可以做,qpcr也行,但是是预实验,想尽快得知产物是否表达出来,哪种方法比较快一点?用荧光的话能做吗?

  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 免疫荧光脱片 868天前
    我请教了我们这边的师兄也是说有可能是细胞太密了。谢谢!
  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 免疫荧光脱片 868天前
    谢谢!
  • hh634051511
    hh634051511  发布了新帖 免疫荧光脱片 872天前

    请教各位前辈,我在做免疫荧光的时候细胞爬片48h,细胞融合度大约80%-90%,玻片提前用pdl在37℃孵箱里处理了12h,拿出来用pbs洗3遍,洗完之后发现孔里飘着些白色的东西,感觉不对,4%多聚甲醛固定完之后,放到镜下看发现细胞基本都脱落了,一共爬了6张片子,只有2张片子还能剩下一点点细胞,剩下的基本都脱了,请问是哪里操作不对吗?在处理玻片的时候有什么需要注意的吗?希望前辈们能指点一下,谢谢!

  • hh634051511
    hh634051511  发布了新帖 求助病毒稀释 880天前

    请教一下各位前辈,最近要做慢病毒转导,病毒要用什么稀释?df12?还是完全培养基?还是公司提供的Enhanced infection solution?

  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 求助polybrene 880天前
    谢谢!
  • hh634051511
    hh634051511  发布了新帖 求助polybrene 880天前

    请教一下各位前辈polybrene的合适浓度是多少?想用来转染细胞,说明书上给的是5-10微克/ml,具体是多少呢?需要自己摸索吗?

  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 求助,求各位帮我看看我的细胞这是什么状态? 888天前
    好的,感谢感谢
  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 求助,求各位帮我看看我的细胞这是什么状态? 888天前
    感谢前辈的回复,传代用的0.25%胰酶,37℃、1min,离心1000转/min,5min,然后用细胞计数板计数显示活细胞比率约在80左右,接种在板子上隔了一晚就变成这样了,附一张原代图片,希望前辈帮我看看问题在哪里?
  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 求助,求各位帮我看看我的细胞这是什么状态? 888天前
    请园子里的各位前辈多多指教,最近传代的细胞一直有这个问题,养的细胞是毛囊神经嵴干细胞,传代没用fbs,用的5%的血清替代物,还请各位前辈帮忙分析一下细胞变成这样的原因,谢谢!
  • hh634051511
    hh634051511  发布了新帖 求助,求各位帮我看看我的细胞这是什么状态? 888天前

    昨天晚上传代的细胞,今早换了一次全液,镜下看细胞就变成这样了,请问这是死了吗?还是在分裂?还是没有贴壁?我的板子预先用pll处理过了,接种之前也用pbs洗过,怎么细胞就变成这样了呢?

  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 细胞第一次传代后死细胞很多 957天前
    好的,谢谢,后续我还会再贴几张图,希望您能多指点,谢谢!
  • hh634051511
    hh634051511  回复了帖子 细胞第一次传代后死细胞很多 957天前
    好的,感谢你的回复,后续我还会再贴几张图,还望战友不吝赐教!

关于我们|联系我们|版权声明|资格证书|丁香志|加盟丁香园|友情链接 丁香园旗下网站: 丁香园|丁香通| 人才|会议|药学|博客