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  • grass010
    grass010  回复了帖子 HE染色问题 1517天前
    伊红我们已经从3min,增加到5min了,可是还不行。还需要延长吗?
  • grass010
    grass010  回复了帖子 HE染色问题 1517天前
    这是为什么呢?请问你们是怎么过的呢? 能不能把详细的protocol告诉我,我follow一下。感谢!
  • grass010
    grass010  发布了新帖 HE染色问题 1519天前

    请问有哪位大神擅长HE染色问题的,能否帮着分析下,为什么我的裸鼠肝脏原位成瘤模型的HE切片伊红不着色?已经染过很多次了,肝细胞胞浆都不能着色,但是红细胞却可以染上颜色。已经排出了染料问题(同时染色的别的片子都可以染上)。还会有什么问题呢?2个月辛苦的造模就为了这个HE啊,麻烦大家...

  • grass010
    grass010  回复了帖子 Fluo 4-AM检测细胞内钙离子浓度 1519天前
    流式细胞术检测细胞内钙离子浓度: 原理:流式细胞术测量钙离子的荧光探针大都是钙螯合剂EDTA的衍生物,有较高的量子产量,并对钙有较高的特异性亲合力。钙离子流式荧光探针本身不能透过细胞质膜进入细胞内,将它们连洁乙酰甲酯后,可将染料导入细胞,经细胞内的非特异性酯酶水解水解该酯键,释放...
  • grass010
    grass010  回复了帖子 明胶酶谱实验,细胞上清液离心多少转?14000rpm?2000rpm? 1712天前
    同求啊,请问你的问题解决了吗,我也是脱色过度了,然后复染了,可是还没有看到条带啊。那到底要怎么洗会比较好呢?
  • grass010
    grass010  回复了帖子 请教明胶酶谱的条带? 1712天前
    我有同样的问题,请问你解决这个问题了吗? 因为在红色的培养液里加了蓝色的上样缓冲液之后样品就变成紫色的了,心里总是觉得怪怪的。而且跑电泳的时候也会有红色和蓝色两条线出现,这正常吗?做了2次都是这样。并且也考染之后蓝色背景上也没有条带,还不知道问题出在哪里,只能一步一步排除了,请...
  • grass010
    grass010  回复了帖子 明胶酶谱 1712天前
    楼主 你好 我也和你遇到了同样的问题 明胶浓度是1mg/ml,跑电泳的时候溴酚蓝和酚红是分成两部分的向下跑对吗?染色完之后也是脱色的时候整块胶都变成透明的了,第一次做,不知道问题出在哪里?跪求指点。。。
  • grass010
    grass010  回复了帖子 【求助】应该胞浆表达的蛋白居然做出胞核表达! 1798天前
    最近很奇怪 做了三种抗体 都应该是胞浆表达,但在有些组织中核表达却很高 要是有非特异,不可能3种抗体都有问题吧? 求大神赐教,是IHC的体系里那些地方会导致这样的结果呀
  • grass010
    grass010  : 免疫组化抗体使用 http://dxy.me/mURbeu 我最近在做裸鼠皮下成瘤实验,切下来的组织想做免疫组化。请问各位战友选择抗体的时候是该用人的还是鼠的?
  • grass010
    grass010  : 免疫组化抗体使用 http://dxy.me/YNrIbq 我最近在做裸鼠皮下成瘤实验,切下来的组织想做免疫组化。请问各位战友选择抗体的时候是该用人的还是鼠的?
  • grass010
    grass010  : 关于增殖-请问EdU染色 http://dxy.me/RJvUvm 请问有没有人知道EdU染色前如何将细胞同步化,可以使最终染上色的红色荧光强度相同?
  • grass010
    grass010  回复了帖子 抗氧化剂NAC和mito-tempo的使用 1859天前
    楼主 你的问题解决了吗 我也再用mito-tempo,遇到了同样的问题,你做的是什么细胞,用什么溶解,什么浓度?顺便问问你知道mito-tempo的工作原理吗
  • grass010
    grass010  回复了帖子 P53的western 1874天前
    我现在一般就用新提的蛋白加大上样量和延长曝光时间一般就可以出来了。
  • grass010
    grass010  回复了帖子 P53的western 1874天前
    我现在一般就用新提的蛋白加大上样量和延长曝光时间一般就可以出来了。
  • grass010
    grass010  : mito tracker green与免疫荧光(加急!) http://dxy.me/7Bfe6z 我在做免疫荧光的时候想要定位线粒体,但是我看到mito tracker不适合染固定的细胞,会脱色。请问各位大神有没有人知道这个问题要怎么解决,或是染色过程中需要注意哪些,小女子万分...
  • grass010
    grass010  : 我刚刚评论了实验蛋白质免疫印迹(Western Blot ): 步骤繁琐,出现问题比较难分析... http://dxy.me/BVVVJv
  • grass010
    grass010  : 免疫组化 http://dxy.me/jMJVfe 我这次做免疫组化时再用过氧化氢溶液侵泡后没有用PBS清洗就直接封闭了;但是即使发现(大约封闭10min左右后)又清洗了重新封闭;但是最后在DAB显色的时候没有变色,请问是什么原因引起的,跟没有清洗有关系吗?有什么补救办法显色吗?
  • grass010
    grass010  回复了帖子 求助EIB、 IAP、 Fas、Bax、ICE、 的中文名称 1990天前
    最早发现人类中与线虫ced-3同源的基因是ICE,即:白介素-1 β转换酶(Interleukin-1 β-converting enzyme)基因,因该酶能将白介素前体切割为活性分子,故名。
  • grass010
    grass010  回复了帖子 P53的western 1999天前
    谢谢啦。表达的 ,之前有师兄做过的。一般P53的半衰期很短,但是就是不清楚能保存多久,我不确定到底是蛋白降解还是别的原因,目前正在进一步验证中
  • grass010
    grass010  回复了帖子 P53的western 2009天前
    楼主你好,我现在跟你面临同一个问题,发光时tublin内参是有的,可是就是没有P53分子的,整个膜上什么都没有,只是细胞是SK-1、97H。请问你最后是怎么解决的?急,谢啦!

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