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丁香客

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  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 SP2/0或NSO细胞瞬转求助? 658天前
    这两种也用了。效率也是低。我是问有没有老师针对过SP2/0或NSO细胞做过瞬转?怎样做可以提高效率
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 重组Fc融合蛋白降解问题 658天前
    这个突然想到一个类似的想象(可能类似):不同培养基培养细胞的CE-R纯度有较大差异。做了一些氨基酸优化 发现不同氨基酸浓度对CE-R纯度也是有影响的。不知道是不是一些类似氨基酸浓度等差异导致一些酶表达量差异导致的。
  • ggghhhh
    ggghhhh  的帖子被加了1分 658天前

    回复:重组Fc融合蛋白降解问题

    laorentou 理论上细胞株的稳定性应该和培养基的种类没有关系的,你遇到过不同培养之间会有稳定性差异?这个看什么稳定性。要是表达量和质量的话不同培养基对细胞的稳定性是有影响的,而且还比较大。遗传稳定性影响较小。有次和礼来的细胞部门总监交流过这个问题,他们也发现了这个同样的问题...
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 SP2/0或NSO细胞瞬转求助? 659天前
    293做了平行。还可以。有80-90%。加您私聊
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 重组Fc融合蛋白降解问题 659天前
    上次和礼来的细胞总监聊。他们也遇到过。这个是比较常见的现象。
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 细胞骤死什么原因 659天前
    含不含生长因子不清楚。其实很多培养基都含生长因子。可以参考药典中原辅料控制一节。大家做的没那么细,至少报IND没做那么细。
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 重组Fc融合蛋白降解问题 659天前
    不同代次细胞之间表达量和质量差异会随着培养基或培养工艺不同而不同。用不同的培养基评估细胞稳定性。表达量下降趋势有差异的。举个例子,比如用CD CHO评估,60g比10g表达量可能会低20%,换一种培养基,比如Dynamis,可能60g比10g会低35%
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 重组Fc融合蛋白降解问题 659天前
    表达量和质量会的会的。用不同的培养基评估细胞稳定性。表达量下降趋势有差异的。举个例子,不如用CD CHO评估,60g比10g表达量可能会低20%,换一种培养基,你如Dynamis,可能60g比10g会低35%
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 SP2/0或NSO细胞瞬转求助? 659天前
    这些都确认过。您之前做过吗?
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 现在需要前期筛选中因稳定性原因无法达到而被必掉的单克隆抗体的实例,希望有相关资料的大神给予支持 659天前
    楼主可否细讲下,粘度高主要是哪些氨基酸造成的?
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 重组Fc融合蛋白降解问题 659天前
    感谢楼主分享。这个问题其实也困惑了我很久一直没解决。我们在项目中也是发现过这种现象,但是没有深究下去。只是简单认为不同培养条件下细胞表达的蛋白、酶水平差异较大,而引起这个现象。
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 重组Fc融合蛋白降解问题 659天前
    这个看什么稳定性。要是表达量和质量的话不同培养基对细胞的稳定性是有影响的,而且还比较大。遗传稳定性影响较小。有次和礼来的细胞部门总监交流过这个问题,他们也发现了这个同样的问题。
  • ggghhhh
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 细胞骤死什么原因 659天前
    这个现象比较多见,之前不少项目会有这问题。原因主要是基础培养基+流加培养基不适合你的克隆。你重新换几种基础培养基或流加培养基即可。说到比较好的基础培养基主要是Dynamis,advance,这两种。feed比较好的主要是feed c,cell boost7a+7b,以及多宁的2*103都不错。
  • ggghhhh
    ggghhhh  悬赏50丁当求助 660天前

    SP2/0或NSO细胞瞬转求助?

  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 11号资料目录(适合生物类似药) 775天前
    楼主,这1.1这几条不知道你是怎么看待?我们之前的11号资料中没写这几条。
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 9号资料目录 775天前
    楼主这个写的非常好、全面。和我们大概内容其实差不多。写的顺序稍有差异。我们主要分成四个部分:1)总结部分,主要是关于原液生产工艺的总结:流程图+关键质量评估及放行。2)细胞培养工艺研究:其中就有风险评估等。3)纯化工艺研究 4)三批生产验证。后面就是参考文献、附录。
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 9号资料目录 776天前
    同意。风险评估过程有的话我觉得是更合理的。但可以汇总在一起,不需要每一步优化前都单独写,这样会显得比较乱。
  • ggghhhh
    ggghhhh  的帖子被加了1分 776天前

    回复:同写意64期部分PPT

    jackieustc 倒是不必过度追求全人源,人源化可能也够了。全人整体品种来说免疫原性可能低,人源化的整体品种要高。难道她的意思是适当的免疫原性对于抗肿瘤是好事?类似肿瘤免疫先驱发现,有感染对于抗肿瘤是好事。ADC确实是个头疼的东西,过去大家一直讨论Antibody、Linke...
  • ggghhhh
    ggghhhh  回复了帖子 同写意64期部分PPT 776天前
    刘跃提出的,天然的抗体可能才是最好的观点挺有意思。

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