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丁香客

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  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 谈谈曾经的本科,在眺望下以后的研究生。 28天前
    有的人不差钱,读到博士家里都能安排工作。只不过现在考读书跨阶级不如以前容易了,但是读书还真改变阶级最有效的路了。抱怨社会没用,国家政策不是考虑某些群体的。发展是最重要的,靠读书改变命运压根就不是国家考虑的事。
  • enochvax
    enochvax  发布了新帖 关于elisa测抗原 30天前

    已知我待测抗原只有一种抗体,无法双抗夹心,而且我还没有酶标一抗,需要再用二抗标记。这种情况可否直接固定待测抗原,按间接elisa那一套做?还是说需要做间接竞争elisa,固定一个已知浓度的同样抗原,然后一抗和待测抗原中和后再加入到固相抗原中,反应一定时间后再用酶标二抗标记。

  • enochvax
    enochvax  发布了新帖 间接elisa 批间差异大 97天前

    做了几批elisa 批间有差异。之前以为是室温显色,室温变化导致不一致。今天做这批参考的孔 OD值 1.2,昨天测3以上,再之前一般也是2.7左右。今天新换了PBST ,用了新的批次TMB显色液。其他一致,都服了。但是今天用参考品做的标准曲线拟合的还很好,3个板子的参考品板间一致性很好。奇了怪了。

  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 MTT法中,加了MTT后,几小时加DMSO溶解结晶? 104天前
    这个数据有用啊,犹豫要不要加班。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 PEG6000沉淀离心提纯病毒 431天前
    楼主在吗?我用PEG终浓度5%(w/v),除了病毒颗粒其他蛋白也沉淀下来了,这方法怎么达到纯化的目的。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 细胞培养玄学-MRC-5细胞 496天前
    细胞在冻存液里不是圆形的亮晶晶长时间冻存会不会不好
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 细胞培养玄学-MRC-5细胞 496天前
    请教楼主一个问题,我的mrc-5现在基本传四十几代一比四还能四天长满,应该还可以啦。但是我发现每次消化都不能完全让细胞分散开的。尤其是瓶子越大分散越不开。是吹打不够吗?而且我大规模冻存的细胞复苏后,细胞一开始并不是圆形亮晶晶,而是消化后的细胞形态。长梭形,而且有团块。但是时间长了能长开,不影响后续。怎么解决这个问题。不知道消化不好还是吹打不够。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 细胞培养玄学-MRC-5细胞 620天前
    我以前也养过另一种人胚肺细胞和高代次mrc-5.我们养的那个t25冻存一支,复苏时候直接复苏到t25,一天就满了。而且运输细胞不能长太满,打电话问细胞库又说t25冻一支,t25冻复苏到t25里面密度应该是很高的。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 细胞培养玄学-MRC-5细胞 620天前
    再请教一下,复苏时用一支复苏在t75三天长满是吧。上海细胞库我打电话咨询说是一t25冻存一支,我不买冻存管买t25运输,送过来长的并不多密集,那他是一个冻存管跟你一样复苏三瓶了吧,不然密度不应该这样。这么买细胞是不是吃亏了。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 细胞培养玄学-MRC-5细胞 622天前
    嗯,用他自带的培养液放10ml可能放多了一时缓冲不过来,换成atcc每升1.5g碳酸氢钠的培养液就正常了。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 细胞培养玄学-MRC-5细胞 622天前
    看今年上海细胞库新引进mrc-5,我们买了一株。请问你们是密闭培养还是在5%二氧化碳培养。我以前密闭培养过40多代的mrc-5还长的挺正常。但是现在透气培养观察数小时后后总是pH开始升高。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 大家A375都用的什么培养基啊?刚从中科院买的A375要被我养死了... 658天前
    这个细胞你养好了吗?真心崩溃。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 A375细胞培养 665天前
    我换了新的培养基,传了几代不咋漂了,但是细胞形态和atcc的高密度还是不一样。我的细胞没那么舒展,和低密度的时候相近,还是偏圆,你的什么情况,形态和atcc的一致吗?
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 求赠人黑素瘤细胞A375 681天前
    你那个细胞咋样了,我也是A375刚复苏后好好的,养养就飘起来,是污染了吧。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 哪位有黑色素瘤A375的照片 681天前
    层主解决了吗?是什么问题,我也是这样。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 刚买回来的A375细胞怎么总是有很多悬浮在培养基中,不贴壁?? 681天前
    楼主解决了吗?我买冻存的a375复苏也有这个问题。飘着的也不是死了,还能落下来铁壁生长,但总有飘得。
  • enochvax
    enochvax  回复了帖子 急求293T细胞株,坐标山东淄博,山东理工大学。可以用实验室培养的SGC、MCF-7、A375和HepG2换。 681天前
    你好,请教一下你们实验室A375用的什么培养基,缓冲体系是hepes还是碳酸氢钠,5%二氧化碳开放培养还是密闭培养。
  • enochvax
    enochvax  发布了新帖 关于磷酸钙转染法 1489天前

    网上一些资料都是说2*hebs用ph7.05,但是网上卖的现成的产品有6.7和7.05 都是转染用的,为什么有两种ph,用途有什么不同吗?

  • enochvax
    enochvax  发布了新帖 有人用lipofectamine 2000做动物细胞转染吗 1490天前

    lipofectamine 2000说明书里面写着培养液可以含抗生素吗。我查了网上的说法,很多人都说不能用,是不是老产品不能用,现在都可以用了。

  • enochvax
    enochvax  : 我对丁香通上的产品:"MRC5"很感兴趣,近期有购买意向,欢迎知情者和我联系。 http://dxy.me/jIRj6j

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