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  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  回复了帖子 蛋白纯化如何根据线性洗脱确定梯度洗脱梯度? 4天前
    没做过蛋白纯化 实验室有一台AKTA 参考文献上用的洗脱梯度是0-0.5M Nacl   这个梯度怎么设定呢?0-0.5M之间间隔多少设置一个浓度比较合适呢?
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  发布了新帖 求助分离柱挑选 4天前

    请教,想用ÄKTA Purifier upc 100做蛋白纯化,离子交换柱的挑选应该注意那些参数呢?是GE系列的柱子都可以用吗?参考文献里用的柱子是HiTrap Q-XL 17-5159-01 还有 HiTrap SP-XL 17-5161-01这两个柱子,但是他们用的是ÄKTA Pure系统,不知道他们的柱子我可不可以用?

  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  发布了新帖 求助重组蛋白表达载体的构建 62天前

    重组蛋白表达载体构建的一些问题,我现在是要构表达载体,查到了一篇文章,但是里边的载体信息我不是很懂,文章里共表达了两个质粒,左边是带有目的蛋白基因的载体,但是他们标了两个载体名称... pGM/pBR322,网上查了这是两个不同的载体,然后文章里也没有给出说明,还有共表达的载体也没有给信息,直接说了pCO,还是说这是一类共表达载体不针对特殊的某一个?

  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  发布了新帖 K562细胞培养 181天前

    想请教一下,传代后K562细胞多久能达到对数生长期呢?

  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  :请问,K562 传代后多久达到对数生长期呢?
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  回复了帖子 慢病毒转染K562细胞,目的基因不表达蛋白 194天前
    能分享一下 K562慢病毒侵染的方法吗?
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  发布了新帖 慢病毒包装 329天前

    pspax2, pMD2G, pLVX-IRES-ZsGreen1 我用这三个质粒包装病毒 有没有大神做过的啊?三者应该按什么比例加呢?用293T细胞包装应该可以吧,细胞用量是多少呢?

  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  回复了帖子 电转杯被污染怎么办呢? 412天前
    想请教一下,不同大小的电转杯,2mm/4mm的是指的有容量不同吗?还是跟电压电阻什么的有关系呢?因为我按照电转仪系统预设的条件电转K562细胞,只是人家公司用的2mm的电转杯,我用的4mm的电转杯,电转效率超低,只有百分之几,想问一下这跟电转杯有关系吗?
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  回复了帖子 电转杯被污染怎么办呢? 412天前
    想请教一下,不同大小的电转杯,2mm/4mm的是指的有容量不同吗?还是跟电压电阻什么的有关系呢?因为我按照电转仪系统预设的条件电转K562细胞,只是人家公司用的2mm的电转杯,我用的4mm的电转杯,电转效率超低,只有百分之几,想问一下这跟电转杯有关系吗?
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  回复了帖子 电转杯被污染怎么办呢? 412天前
    想请教一下,不同大小的电转杯,2mm/4mm的是指的有容量不同吗?还是跟电压电阻什么的有关系呢?因为我按照电转仪系统预设的条件电转K562细胞,只是人家公司用的2mm的电转杯,我用的4mm的电转杯,电转效率超低,只有百分之几,想问一下这跟电转杯有关系吗?
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  回复了帖子 电转杯被污染怎么办呢? 412天前
    想请教一下,不同大小的电转杯,2mm/4mm的是指的有容量不同吗?还是跟电压电阻什么的有关系呢?因为我按照电转仪系统预设的条件电转K562细胞,只是人家公司用的2mm的电转杯,我用的4mm的电转杯,电转效率超低,只有百分之几,想问一下这跟电转杯有关系吗?
  • dxy_vfpmuvx5
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  回复了帖子 电穿孔的电转杯能重复使用吗? 412天前
      想请教一下,不同大小的电转杯,2mm/4mm的是指的有容量不同吗?还是跟电压电阻什么的有关系呢?因为我按照电转仪系统预设的条件电转K562细胞,只是人家公司用的2mm的电转杯,我用的4mm的电转杯,电转效率超低,只有百分之几,想问一下这跟电转杯有关系吗?
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  发布了新帖 K562电转染 413天前

    用的bio-rad的电转仪,系统自带的K562预设条件是exponential decay 、 1000uF、155V、0.2cm的电转杯,但是我们实验室没有0.2cm,用的0.4cm的,电转后细胞死亡率约百分之30%,但是电转率只有百分之几。按道理说,公司生产这个仪器的时候摸索出的应该是电转率最高的条件啊,想问一下各位大神,会不会是因为电转杯的不同导致的呢?如果是,那我应该如何调整呢?电转杯的大小与哪个电转参数有关啊?同时还有另外一个电转条件,960uF,250V, 这个条件电转后,细胞差不多全死了,只剩下1/30的活细胞。求指导

  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  回复了帖子 K562外泌体 413天前
    没有 只是因为实验需要 培养基没有加血请
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  发布了新帖 K562外泌体 419天前

    我养悬浮细胞K562,观察时发现细胞表面有一圈小泡,想问下这是什么?细胞外泌体?什么原因可能造成这种现象?

  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  回复了帖子 k562细胞培养 426天前
    苔盼蓝不是染死细胞的吗?
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  回复了帖子 k562细胞培养 426天前
  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  发布了新帖 k562细胞培养 468天前

    我养的K562细胞,处理之后,出现了这种情况,大点的、圆圆的是细胞,但是周围小的不知道是什么东西,看着特别像小细胞,有大神知道这是什么情况吗???

  • dxy_vfpmuvx5
    dxy_vfpmuvx5  发布了新帖 悬浮细胞培养时没加血清,贴壁了,晃不起来 476天前

    因为实验需要,K562培养时没加血清,一天后观察时发现基本没有细胞悬浮,都在壁上,还摇不起来。

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