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  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 EB病毒DNA升高到多少有临床意义? 26天前
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  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 DNA提取液中EDTA的量一般多大? 26天前
    可以看一下这个BIODAI的操作。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 如何浓缩提取的基因组DNA 29天前
    楼上提到的BIODAI技术,是真的可以处理1000UL的样本量吗?如果真的这样的话,那还是可以的。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 大神们看过来!现在什么成熟的技术或试剂盒能够提取ctDNA(肿瘤循环DNA)吗? 29天前
    循环肿瘤dna提取或许楼主可以看一下BIODIA的,提取效果好像还是可以的,具体的可以自己只能找官网查一下。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 胸腹水抽提DNA 30天前
    提取胸腹水中dna是可以使用相应盒子的,直接提取,会省事很多,比较方便,楼上介绍的那个 BIOG的,就是直接可以的吗?
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 胸腹水全基因组DNA提取-qiagen试剂盒 30天前
    楼主可以参考一下BIODAI的操作,应该是有帮助的
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 慢病毒的浓缩! 30天前
    还是先过滤吧。应该是杂质太多的原因,现在病毒浓缩可以直接使用盒子的,比较简便,效果也还好,具体的可以看看ABI,BIODAI,QIAGEN等的。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 浓缩病毒 30天前
    楼上介绍的这个BIODAI 方法,看上去是还可以的,具体效果还是要实验操作一下。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 全血总RNA如何提取? 32天前
    不知道楼主后来怎么提的,qiagen的提取效果还是很好的,楼上提到的是BIOG吗,提取的量确实还行。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 血斑DNA提取哪个试剂盒比较好? 32天前
    提取血斑,或许可以试试BIOG DNA Dried Blood Spots Kit,产量和提取量还挺大的。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 关于外周血游离DNA血清提取,一般建议采用QIAGEN Blood Mini Kit提取盒,其实提取浓度也不高,因目的基因确实太低,假阴性仍不少,经费不是问题, 36天前
    这种情况是可以使用富集的盒子,提高提取的量,楼上提到的BIODAI 离心应该也是可行的,楼主可以试试。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 怎样做到PCR的热启动! 38天前
    可以试试BIOGHC DNA Polymerase,经过严格的化学修饰,室温条件下,酶活性被完全封闭,从而有效阻止了在加样阶段和升温阶段经常发生的非特异扩增。只有在95℃加热6分钟后,BIOGHC活性才能被完全释放,这保证了PCR反应的高度特异性。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 siRNA转染相关实验 39天前
    楼主这个问题解决了吗?是因为3天给一次Sirna以维持沉默效果,不知道使用试剂用有什么要求,一般的QIAGEN,BIODAI可以达到效果吗
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  的帖子被加了1分 40天前

    回复:粪便DNA提取

    粪便首先要做预处理:粪便标本加人装有2mL无菌PBS缓冲液(0.05mol/L,pH 7.4)试管中充分振荡摇匀5~10min后3000转/分(rpm)离心5min,收集上清液,此步骤重复2次,最终收集上清液每份1ml置于1.5ml 离心管中。然后上清液12000rpm离心l0m...
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 粪便DNA提取 40天前
    粪便首先要做预处理:粪便标本加人装有2mL无菌PBS缓冲液(0.05mol/L,pH 7.4)试管中充分振荡摇匀5~10min后3000转/分(rpm)离心5min,收集上清液,此步骤重复2次,最终收集上清液每份1ml置于1.5ml 离心管中。然后上清液12000rpm离心l0min,弃上清后,沉淀物在lmL双蒸水(ddH20)中悬置,混和后12000rpm离心5min,此步骤重复2次,收集沉淀。接下来的步骤就是用酚氯仿的抽提的方法。不过这种化学法花费时间长效果也不一定好,而且苯酚氯仿什么的有毒,用试剂盒操作就安全 简便多了,时间短,差不多半小时就可以了。常用的有凯杰QIAGEN,天根tiangen,百代BIOG等。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 fitc颜色问题 54天前
    看到的应该是绿色的,检测细胞凋亡,我这里用的较多的还是Annexin V/PI 双染色法和TUNEL法,效果上我觉得还是不错的,特别是使用这方面的盒子,会更方便些,BIODAI在荧光信号上还是挺强烈的,没有细胞毒性,也不易淬火。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 有用过罗氏X-tremeGENE转染试剂的战友吗? 58天前
    转染我们实验室使用过的是RFECT由于这个毒性较低,是不必要换液的额,但好像也可以选择换液。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 干货:细胞转染的常用方法 59天前
    这个关于转染总结的太受用了,之前在转染悬浮细胞上一直是有难度的,师姐推荐使用的是RFECT的,转染效率上还行,目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 悬浮细胞做RNA干扰,咋样才能提高转染效率? 59天前
    可能不仅仅是试剂的问题,本来悬浮细胞神经干细胞就特别难转,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难,可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,最好选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低。试剂上可以试试BIODAI。
  • 聚众吃瓜
    聚众吃瓜  回复了帖子 原代细胞的转染方法 60天前
    原代的转染方法可以参考一下RFECT的,效果上还是可以的。

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