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  • 十字星的问候
    十字星的问候  发布了新帖 HE染色全过程 114天前

    HE染色观察自然衰老小鼠脑组织皮层和海马神经元形态学变化苏木精—伊红染色 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法,石蜡切片里常用的染色法。整个染色包括四个过程:脱蜡,染色,烘干和封固。(1)脱蜡:从温箱中取出烤干的切片,100%二甲苯玻璃缸1号中脱蜡20min →在100%二甲苯玻璃缸2号中脱蜡20min→无水酒精1号缸中,5min→无水酒精2号缸中,5min → 切片放入90%酒精缸,约3min→拿出,放入80%酒精缸,约3min→拿出放入70%酒精缸,约3min→在蒸馏水中洗去酒精,约5min →蒸馏水中,约5min;(2)染色:移入苏木素中,浸染13min,一般以稍深染为宜→ 移入水中,冲洗去苏木素和浮色,约3min→10min温水反蓝→移入伊红

  • 十字星的问候
    十字星的问候  发布了新帖 病理实验操作,跟HE染色 114天前

    新鲜组织处理 小鼠脱颈椎处死后,剪开小鼠的头皮,暴露出头部。然后用眼科剪,从枕骨大孔进入,沿矢状缝向上小心剪开,用弯镊子把剪开部分的颅骨用力向两侧剥开,露出完整大脑,小心剪开脑膜,防止在后续大脑剥离时损伤脑组织。最后用弯镊,从嗅球底部轻轻取出脑组织。新鲜脑组织取出称重并记录,放于﹣80℃冰箱保存,如需长期保存,把取出的脑组织放入液氮。用于后续western blot检测蛋白含量和冰冻切片及用于检测其他相关指标。石蜡切片处理测量小鼠体重,按昆明鼠体重,用2%戊巴比妥钠(0.25ml/100g)进行腹腔注射,主意麻醉剂量,麻醉小鼠10min后,将小鼠出现四肢固定在小鼠板,开胸暴露心脏,防止对肺部损伤,左心室插入灌流针后用动脉夹固定,固定后剪开右心房,先以4℃预冷生理盐水灌流,直到肝和肺脏颜色转白

  • 十字星的问候
    十字星的问候  加入了调查派 114天前
  • 十字星的问候
    十字星的问候  回复了帖子 新人小白求救各位师兄师姐,免疫组化需不需要灌流,谢谢! 434天前
    我们一般灌流,冲走血细胞,使组织固定,抗损伤能力也好很多。
  • 十字星的问候
    十字星的问候  回复了帖子 做WB时,加PMSF的作用是什么? 919天前
     在水液体溶液中不稳定,30分钟就会降解一半,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF,样品处理超过1h,补加一次。(见水分解,使用前加入)
  • 十字星的问候
    十字星的问候  回复了帖子 大鼠尾静脉注射经验分享 971天前
    把尾巴反过来,最粗的就是尾静脉,皮最薄。如果感到进针受阻,说明没找对。
  • 十字星的问候
    十字星的问候  回复了帖子 大鼠互相残杀怎么办?还有莫名其妙脱毛的是怎么回事? 971天前
    建议分笼饲养,别的老鼠见血就容易撕咬受伤的老鼠的伤口。

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