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丁香客

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  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  回复了帖子 巨噬细胞吞噬癌细胞问题求教 14天前
    当初用的CD14
  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  回复了帖子 巨噬细胞吞噬癌细胞问题求教 89天前
    pbmc细胞是有卖的,可以买到。但是巨噬细胞我当初好像没看到有卖的,天然巨噬细胞无法分裂,分离出一代只能用一代,长一段时间自己就自然死亡了。所以能不能买到我也不确定,就算买到了可能也是改造过的细胞,文章会不会被认可我也不确定……
  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  回复了帖子 求问抗体人源化具体怎么做? 107天前
    laorentou dxy_f7s4q4hr     我知道鼠抗人源化要把6个CDR区移植到人抗体相应部分。但是具体怎么做呢?比如我现在有一个鼠抗的重链和轻链序列,第一步怎么操作?上哪查它的CDR区都是哪部分?还有怎么查用哪个人抗框架?反正越详细越好。麻烦大佬赐教,谢谢! 这是一篇比较老的抗体人源化文献,可以看看了解一下 好的。我先看看。谢谢!
  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  发布了新帖 求问抗体人源化具体怎么做? 110天前

    我知道鼠抗人源化要把6个CDR区移植到人抗体相应部分。但是具体怎么做呢?比如我现在有一个鼠抗的重链和轻链序列,第一步怎么操作?上哪查它的CDR区都是哪部分?还有怎么查用哪个人抗框架?反正越详细越好。麻烦大佬赐教,谢谢!

  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  发布了新帖 求问盐酸胍能裂解噬菌体吗? 133天前

    我在做噬菌体展示,有一步是提取m13噬菌体的单链DNA,提取步骤中有一步将噬菌体沉淀以后加到柱子上,然后加buffer PB(盐酸胍和异丙醇溶液),之后就是用洗液清洗柱子了。所以buffer PB应该是裂解噬菌体让里面的DNA结合到柱子上吧?但是我实际做的时候提取效率不高,buffer PB是自己配的。想问问盐酸胍能很好的裂解噬菌体吗?有什么别的更好的裂解液替代吗?

  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  回复了帖子 请问单克隆抗体制作过程中杂交瘤有什么意义? 172天前
    好的。谢谢!
  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  发布了新帖 请问单克隆抗体制作过程中杂交瘤有什么意义? 173天前

    RT,我知道的一般流程是拿到抗原之后,用抗原免疫小鼠,小鼠产生相应抗体,然后滴度达到要求后取脾细胞制作杂交瘤细胞,筛选出表达抗体的细胞株之后扩大培养,然后测其基因序列从而得到抗体序列,再往后进行抗体人源化。那我就想问,抗原免疫小鼠后,滴度达到一定程度时直接对小鼠脾细胞进行基因测序获得抗体基因序列不行吗?为什么非要做杂交瘤这一步呢?是否有方法可以不做直接拿到抗体基因序列?谢谢!

  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  发布了新帖 求问亲和力单位KD和pN的关系是什么 213天前

    我表达了一个蛋白,与配体的亲和力我测出来使用KD表示的,网上查相关抗体的亲和力是用pN表示的,两者怎么转化?有什么关系呢?谢谢!

  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  发布了新帖 求问人CD47和SIRPα天然亲和力是多少啊? 241天前

    如题,请问天然情况下,人的CD47和SIRPα亲和力是多少?一直没查到,有个文献说是50±18 pN,可是亲和力不都是用KD表示吗?不是2×10^-8这种的么?看不懂那个pN,谁知道他俩亲和力是多少哇?谢谢!

  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  发布了新帖 求问人CD47和SIRPα天然亲和力是多少啊? 241天前

    如题,请问天然情况下,人的CD47和SIRPα亲和力是多少?一直没查到,有个文献说是50±18 pN,可是亲和力不都是用KD表示吗?不是2×10^-8这种的么?看不懂那个pN,谁知道他俩亲和力是多少哇?谢谢!

  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  回复了帖子 巨噬细胞吞噬癌细胞问题求教 241天前
    可以的,完全无白光的情况下只能看见荧光,稍微加一点白光就可以所有细胞都看见了。如图,这俩图是一个视野的,第一张只看荧光,第二章打了一点白光,荧光位置更亮一点,另外也可以看见吞噬它的巨噬细胞。我这个吞噬时间有些过久了,癌细胞已经变形了。但是反正图一对应图二那个位置的就是被巨噬细胞吞噬的癌细胞。
  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  回复了帖子 巨噬细胞吞噬癌细胞问题求教 241天前
    对照组就不加药啊。加阴性对照的药,如果你是含Fc的药物,对照就加IgG。
  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  回复了帖子 巨噬细胞吞噬癌细胞问题求教 241天前
    重新做了,还是用的荧光,我用带荧光的慢病毒感染肿瘤细胞,让巨噬细胞吞噬,然后荧光显微镜下观察,有点结果了~
  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  回复了帖子 求问NOD小鼠,NSG小鼠,BALB/c 小鼠,C57BL/6小鼠都是什么关系? 262天前
    所以BALB/c 小鼠是不是NSG小鼠呢?C57BL/6小鼠又不是NSG小鼠呢?
  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  发布了新帖 求问NOD小鼠,NSG小鼠,BALB/c 小鼠,C57BL/6小鼠都是什么关系? 265天前

    RT,求问各位,BALB/c 小鼠和C57BL/6小鼠属于NSG小鼠吗?属于NOD小鼠吗?实在查不清楚。麻烦大家解答一下~

  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  发布了新帖 巨噬细胞吞噬癌细胞问题求教 307天前

    我做了一个阻断剂,理论上阻断剂会阻断巨噬细胞和癌细胞之间的结合,加强巨噬细胞吞噬癌细胞的作用。我抽人血提取pbmc,再分化出来的巨噬细胞,癌细胞用的BT474乳腺癌细胞。本来我用荧光标记了巨噬细胞和癌细胞,但是荧光显微镜用的出了问题,只有光镜下的结果了。如图。请问:1、哪些细胞是巨噬细胞吞噬了癌细胞?请举例标记一下。2、光镜下数巨噬细胞吞噬癌细胞的数量,跟对照组相比。这样有说服性么?谢谢。

  • dxy_f7s4q4hr
    dxy_f7s4q4hr  发布了新帖 求问graphpad里u检验之后如何查看sem值? 455天前

    rt,在graphpad里做完u检验后怎么看sem值呢?谢谢!

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