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  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 血浆DNA提取 3天前
    可以看一下这个BIODAI的操作。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 关于病毒浓缩 7天前
    管子是可以多次使用的,但是要做好处理,病毒浓缩不知道楼主用的什么提取的,其实有直接浓缩的盒子的,比较方便,知道的有BIODAI,ABI的。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 慢病毒的浓缩方法 7天前
    慢病毒浓缩,可以看一下这个BIODAI 的操作:
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 如何处理关节液提取DNA 8天前
    可以有相关盒子进行提取的吧,可以去看看,一些BIODAI,ROCHE,QIAGEN可以咨询一下。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 陈旧血斑DNA提取 9天前
    或许可以试一下这个BIOG DNA Dried Blood Spots Kit ,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于 PCR、荧光定量 PCR 和各种酶切试验等。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 血清DNA提取纯度太低,哪位高手给指导下 13天前
    你这个提取的纯度不是很高啊,或许可以试试BIODAI 的,因为用这个提取过血清dna,检测出来,A260:280有1.83的。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 SYBR green 1 16天前
    有用过BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit ,使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,有效避免了非特异扩增;反应缓冲液经充分优化,灵敏度高,最低可检测1pg总RNA中的目标片段,特别适合低拷贝RNA的检测。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  发布了新帖 粪便DNA提取 18天前

    粪便中提取HP的DNA,粪便中抑制物较多,比较难处理,请问有没有好的提取方法?

  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 细胞信号版月度风云榜奖励-2019年4月 18天前
    id:dxy ciw4uv16个丁当
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 关于假病毒reporter 基因的包装问题 23天前
    额,一般假病毒实验都会外包的,这样更方便些,有了解过BIODAI的自主研发的假病毒纯化系统,纯度高,无外源未包裹DNA或RNA物质污染;病毒样颗粒无传染性,不会对实验人员造成伤害,因此生物安全性好;滴度高,每毫升可达106拷贝;整体还算是可以的。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 假病毒制备 23天前
    假病毒包装流程:目的基因的合成→假病毒载体的构建→假病毒包装纯化→假病毒滴度测定,一般就是这样的,BIODAI装甲病毒(假病毒)应包裹有完整的待测核酸片段,特别是待测RNA片段。纯度足够高,无未包裹的外源污染性DNA或RNA。稳定性好,-20℃应保存6个月以上。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 Annexin V-EGFP凋亡检测结果分析 31天前
    没错,这个主要就是看四个象限的额,要看清横纵坐标的,有时会不一样。按你这个图的话,B1是坏死细胞,B2是晚期凋亡细胞,B3是活细胞,B4是早期凋亡细胞。一般细胞凋亡检测方法是Annexin V/PI 双染色法和TUNEL法。可以看一下BIODAI,检测上还是可以的。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 求助:Huvec细胞用RNAIMAX转染后细胞立即死掉是什么原因? 36天前
    选择合适的siRNA转染试剂是的RNAi实验成功另一个关键。由于细胞毒性对siRNA实验的影响非常大,可以直接影响实验结论和结果,所以一定选择低毒性的转染试剂,看一个转染试剂毒性是否低,有一个简单的方法,看转染的过程和要求,比如要 求的细胞密度越大,说明毒性越大,比如转染复合物容许和细胞孵育的时间越短,说明毒性越大。之前我师姐给我推荐了RFect小核酸转染试剂,确实低毒性,而且操作简便。实际上,由于培养条件的频繁变化,可能会对细胞表达模式产生影响,对后续的mRNA和蛋 白分析也同样产生影响,最终影响实验的可靠性。希望对你有帮助。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 实验小白siRNA转染操作前细胞计数以及Lipo3000问题 43天前
    楼上提到的RFECT有使用过24孔板转染过293T细胞,应避免包装反应体系中存在血清,因血清会干扰 DeofectEU 与DNA形成复合物 。如果转染DNA量较大或者当复合物包装时反应体系中出现沉淀时,请将包装反应体系调整至1 ml进行。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  的帖子被加了1分 44天前

    回复:lipo3000转染细胞

    实验菜鸟lipo3000 lipo3000过表达,做了几次,3T3细胞,效率还不到10%,用的无血清DMEM稀释,混合后加入到DEME有血清的培养基中,不知道哪里不对,效率那么低,混匀的过程有说不能吹的,我不知道有没你这个转染3T3细胞的效率有点太低了,之前我们实验室转染过3T3...
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 lipo3000转染细胞 44天前
    你这个转染3T3细胞的效率有点太低了,之前我们实验室转染过3T3细胞,刚开始用的Lipo发现细胞毒性略大,转染后有很多细胞飘起来,听了其他实验室同学的介绍换了biodai的,用下来飘起来的细胞没有以前多了,细胞的铺板密度一般在45%左右 。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 转染后细胞筛选的问题 49天前
    siRNA的合成需要注意的是一定要选用高纯度的siRNA,siRNA的纯度直接关系到转染效率和沉默效率。siRNA的工作浓度和siRNA的设计、细胞种类、目标基因有关。建议一定进行相关的预实验优化各条件,可以考虑换转染试剂,RFect小核酸转染试剂可以试试,据说专门针对难转染细胞的,普通细胞效果更好。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 APPsw稳定转染的SH-SY5Y细胞,培养基浑浊 49天前
    你这种情况,我们实验中还没遇到过,会不会是传代时的密度过大或培养时间过久导致的,或许换个转染试剂看看,RFECTR在转染是的效果在各种细胞上都是可以的,转染效率还是可以的。
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 SW480 SW620 转染效率较高的转染方法 49天前
    楼主可以试试 DeofectEU Transfection Reagent转染的步骤,转染效果还是不错的:1.转染前24小时左右对细胞进行转接,接种密度约为每孔0.3~1×105个细胞; 2.过夜培养。B. DeofectEU /DNA复合物包装(该步完成后应立即转染): 1.在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,并添加适量的转染试剂(2~5µl/µg DNA,参见下表) 。用移液器轻轻混匀后在室温静置5~10分钟。 2.在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,并添加适量的DNA (0.8~1µgDNA/孔, 参见附表)。用移液器轻轻混匀后在室温静置5~10分钟。3.将DeofectEU-培养基混合物滴加至DNA-培养基混合物中,用移液
  • 小狐狸的尾巴
    小狐狸的尾巴  回复了帖子 求助:把化学合成的siRNA用Lipo2000转染进293T细胞! 49天前
    这是用 DeofectEU Transfection Reagent转染的步骤:1.转染前24小时左右对细胞进行转接,接种密度约为每孔0.3~1×105个细胞; 2.过夜培养。B. DeofectEU /DNA复合物包装(该步完成后应立即转染): 1.在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,并添加适量的转染试剂(2~5µl/µg DNA,参见下表) 。用移液器轻轻混匀后在室温静置5~10分钟。 2.在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,并添加适量的DNA (0.8~1µgDNA/孔, 参见附表)。用移液器轻轻混匀后在室温静置5~10分钟。3.将DeofectEU-培养基混合物滴加至DNA-培养基混合物中,用移液器轻轻混匀后在室

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