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  • dxy_by6q1dh0
    dxy_by6q1dh0  回复了帖子 蛋白分离纯化及填料选择问题超强技术支持,尽管问:) 2天前
    网上查到的DEAE Sephadex A50凝胶再生过程中,酸碱之间的切换都要用到纯化水对凝胶清洗冲洗,并且pH要洗到中性。A50凝胶溶胀后体积受盐浓度影响较大,需用大量水才能将pH洗到中性。此时的中性只是pH试纸检测结果,如果是pH计检测还是碱性。问题1:能不能用高盐溶液来代替纯化水对凝胶进行酸碱处理之间的清洗;问题2:酸碱处理后pH是否一定要洗到中性,是用pH试纸还是pH计检测?麻烦帮忙解答一下,谢谢!
  • dxy_by6q1dh0
    dxy_by6q1dh0  回复了帖子 DEAE Sephadex A50凝胶再生过程探讨 503天前
    另外想咨询下,2M HAC和0.5M NaOH对凝胶损伤大吗?如果将上述两种成分浓度降到1M HAC和0.1M NaOH对杂蛋白清洗效果有无影响?谢谢
  • dxy_by6q1dh0
    dxy_by6q1dh0  发布了新帖 DEAE Sephadex A50凝胶再生过程探讨 514天前

    网上查到的A50凝胶再生流程是碱-水-酸-水-碱-水(或缓冲液),但是大生产过程中操作繁琐,水使用量比较大。后根据工程师建议再生调整为1M NaCl-2M HAC 30min-1M NaCl-0.5M NaOH 30min-1M NaCl-0.01M NaOH,流程虽然简化了,但是感觉对目的蛋白的结合能力不是很强,而且在碱处理后有泡沫出现。该流程是不是对目的蛋白清洗不够?并且水洗改成盐洗对凝胶质量有误影响?将哪位大神能提点建议,谢谢!

  • dxy_by6q1dh0
    dxy_by6q1dh0  发布了新帖 DEAE Sephadex A50凝胶再生过程探讨 514天前

    网上查到的A50凝胶再生流程是碱-水-酸-水-碱-水(或缓冲液),但是大生产过程中操作繁琐,水使用量比较大。后根据工程师建议再生调整为1M NaCl-2M HAC 30min-1M NaCl-0.5M NaOH 30min-1M NaCl-0.01M NaOH,流程虽然简化了,但是感觉对目的蛋白的结合能力不是很强,而且在碱处理后有泡沫出现。该流程是不是对目的蛋白清洗不够?并且水洗改成盐洗对凝胶质量有误影响?将哪位大神能提点建议,谢谢!

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