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  • dxy_6iu4x2r5
  • dxy_6iu4x2r5
    dxy_6iu4x2r5  回复了帖子 求大神指教:RTpcr阴性有条带且非常亮 1177天前
    我没设阳性对照,所以应该不存在模板污染。我在想如果是污染的话怎么会这么亮,而且比目的样的条带还要亮
  • dxy_6iu4x2r5
    dxy_6iu4x2r5  发布了新帖 求大神指教:RTpcr阴性有条带且非常亮 1177天前

    我的两个目的条带大小分别为944bp和989bp,960bp 和996bp.之前也出现过阴影条带,但都比较暗,这次特别亮,不知道是我的引物问题还是试剂的问题,师姐说是严重污染,但我觉得会不会是引物二聚体或者发卡结构的问题,引物我的引物加入了酶切位点和保护碱基,所以特异性并不是很好,primer评分也不高。并且感觉样品条带跟阴性对照条带大小不是很一致,而且很暗。下面是我的跑胶图片,第五和第十第十五第二十个样是阴性对照,如果不好看的话就是左边数比较亮的那一个是1号的阴性对照,也就是第五个样,以此类推。其他是目的样。求大神指教。

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