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  • defead
    defead  发布了新帖 细胞冻存、复苏、计数存活测试及污染处理 14天前

    一般来说,细胞进行转移,最佳的策略是进行低温保存(-70℃~-196℃),而细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均已停止,即代谢处于完全停止状态,故而可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程,在此温度范围内,冰晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。经过前人的长期试验,发现细胞的冻存及复苏基本原则是慢冻速融,这样可以最大限度的保存细胞活力。材料准备:1、仪器:净化工作台、离心机、恒温水浴箱、冰箱(4℃、-20℃、-70℃)、倒置相差显微镜、培养箱、液氮冰箱。2、玻璃器皿:吸管(弯头、直头)、培养瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、废液缸。3、塑料器皿:吸头、枪头、胶塞、移液管(10ml)、15ml离心管、冻存管(1~2ml)。4、其他物品:微量加

  • defead
    defead  回复了帖子 黑胶虫还是支原体污染? 14天前
    这个是杆菌污染呀
  • defead
    defead  的帖子被扣了5分 33天前

    回复:我对“黑胶虫”的认识

    黑胶虫污染,现在市场上已有去除黑胶虫的试剂,Nabact Rid(黑胶虫去除剂),两天见效,还不错的
  • defead
    defead  回复了帖子 我对“黑胶虫”的认识 33天前
    黑胶虫污染,现在市场上已有去除黑胶虫的试剂,Nabact Rid(黑胶虫去除剂),两天见效,还不错的
  • defead
    defead  回复了帖子 HepG2细胞空泡 182天前
    嗯嗯  买了一个小的支原体检测试剂盒测的   然后又买的支原体清除剂  
  • defead
    defead  回复了帖子 求助!新手,各位大神,看看hepG2细胞形态能用吗? 182天前
    状态不好 是不是营养不够  换个血清试试
  • defead
    defead  回复了帖子 CHO细胞复苏4天状态如图,长不起来可能是什么原因。 185天前
    提高血清比例  试试13%左右
  • defead
    defead  回复了帖子 请各位大神帮我看看我养的H9C2大鼠心肌细胞正常吗?(细胞中有很多黑色颗粒) 190天前
    我以前养hela也有类似情况  你可以试试Gibico的双抗和ChanGEnome 的支原体清除剂   基本可以解决
  • defead
    defead  回复了帖子 如何把细胞养的更漂亮Ⅲ(污染拯救篇)!看完再也不怕细胞污染!(不定期更新) 190天前
    好文章  但是有时候养细胞的时候污染在所难免啊  除了要严格无菌以外预防污染也是很重要的   所以我在养细胞的时候必加Gibico的双抗和ChanGEnome 的支原体预防剂  基本没有过任何污染   
  • defead
    defead  回复了帖子 紧急求助——血清镜下图是否是污染? 227天前
    血清1200转离心5分钟就行,你买的可能是加血请
  • defead
    defead  回复了帖子 紧急求助——血清镜下图是否是污染? 227天前
    血清1200转离心5分钟就行,你买的可能是加血请
  • defead
    defead  回复了帖子 这些细胞中的黑点怎么除掉啊?求助 253天前
    你细胞里的这个黑点,是做布朗运动的吗?还是静止不动的如果在做布朗运动的,应该是黑胶虫污染;如果是不动的黑点可能是支原体污染黑胶虫污染清除方法:Nabact Rid(黑胶虫去除剂)2天处理一次,3个周期即可清除;支原体清除方法:Nocard  Treatment(支原体清除剂);每天处理一次,3天即可清除。
  • defead
    defead  回复了帖子 MCF-7细胞怎么也长不起来,形状也很怪 253天前
    你这个细胞有支原体污染,可以用Nocard  Treatment(支原体清除剂)处理一下,正常用了第二天即可见效,不信的话你也可检测一下是不是支原体污染,利用PCR方法检测一下即可,下面是支原体污染检测引物
  • defead
    defead  回复了帖子 SF9细胞培养出现的一些问题 256天前
    你这个应该是支原体污染的征兆,可以PCR 检测一下,或者直接用Nocard  Treatment(支原体清除剂)清除一下,正常第二天细胞状态就会恢复
  • defead
    defead  回复了帖子 请问这个细胞是什么污染?? 339天前
    关注一下,了解更多细胞污染处理相关好帖子
  • defead
    defead  回复了帖子 请问这个细胞是什么污染?? 339天前
    酵母污染吧
  • defead
    defead  回复了帖子 求助,一传代就出现黑色的点点,长满了又看不出来! 339天前
    污染判别及检测(一)细菌、真菌污染的检测1.肉眼观察细菌、真菌污染常在传代、换液、加样等开放性操作之后发生,而且增生迅速,若有污染,在48小时内可明显观察到。2.接种观察采用普通肉汤接种或用未加双抗药物的培养液接种,也可发现是否有污染。3.显微镜下观察在倒置显微镜的高倍镜下可见培养液中有大量圆球状颗粒漂浮,即为细菌污染;若细胞之间有丝状、管状、树枝状或卵形的物质常为真菌污(二)类芽孢杆菌污染检测1.显微镜下观察在倒置显微镜的高倍镜下可见培养液中有大量杆状游动的小虫子,前期培养液不浑浊,对各种抗生素无效,难以清除,换掖冲洗后也无效。2.测序验证取适量培养液提基因组送测序,然后分析测序结果判断为类芽孢杆菌污染。(三)支原体污染的检测1.显微镜观察直接取少许培养液滴在载物片上,再盖上盖片观察,支原
  • defead
    defead  回复了帖子 支原体用光学显微镜可以看得到吗 393天前
    Cell+细胞卫士 _ _ MycoTestTM Kit(支原体检测试剂盒):支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。MycoTest Kit是利用降落聚合酶链式反应技术(TD-PCR)对支原体16S rRNA 基因高度保守区域特异性片段进行扩增检测。该方法灵敏度高,特异性强,可用于各种生物材料(如细胞培养基、实验动物分泌物、动物血清等)支原体感染的检测。Cell+细胞卫士 _ _ NocardTM Treatment(支原体清除剂):(1)推荐Nocard Treatment的稀释比例为1:1000,例如:1
  • defead
    defead  回复了帖子 细胞培养常见污染识别及处理 412天前
    这个是典型的黑胶虫污染,黑点在原地做布朗运动,现在有去除黑胶虫的试剂的,叫Nabact Rid可以去找一下试试
  • defead
    defead  回复了帖子 请大家进来看看这是不是传说中的黑胶虫污染啊? 422天前
    黑胶虫污染,黑点会在原地做布朗运动,如果是不动的黑点可能是支原体污染

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