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丁香客

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  • dacell
    dacell  回复了帖子 请教下:一个抗体的说明 3小时前
    你做什么实验?ICC实验,抗体推荐比例是1:100,下面那个是抗体货号,不是克隆号
  • dacell
    dacell  回复了帖子 大家通常做ELISA要多久? 2天前
    主要的时间就是样本前处理,样本加样,两个抗体孵育的时间!你看看哪个环节能省?目前试剂盒的抗体孵育时间都要1-2 hour,所以没什么办法省时间!
  • dacell
    dacell  回复了帖子 环状RNA (circRNA)【技术答疑】交流贴-每天定时答疑 10天前
    不需要,普通逆转录的试剂盒就OK了
  • dacell
    dacell  回复了帖子 成管实验遇到各种问题 32天前
    请问你的基质胶是哪个货号呢?有没有稀释?35ul能铺平嘛?或者你的意思是35ul凝固形成一个凹面,在家15ul到凹面里面填满就是平面?这个意思嘛?
  • dacell
    dacell  发布了新帖 成管实验遇到各种问题 35天前

    最近做成管实验,之前没接触过,所以论坛上各种恶补,当然也看完了大神@东月来星的所有相关的帖子,感觉信心满满的开干!老板给的是huvec,也不知道是从哪里搞的种子,也不知道是多少代的,基质胶用的是基础型的,我查阅BD的资料,写的时候做成管实验要浓度10mg/ml的浓度胶,这个基础型的就是差不多这个浓度,所以我没有稀释。因为看论坛里面很多帖子写的96孔板孔小,不容易形成一个平面,拍照不好看,所以直接上48孔板,做2个药物,2个细胞梯度,一个1*10^5细胞,一个是5*10^4细胞。 先说铺胶,这所有接触胶的*头,管子,孔板都提前放在4°冰箱过夜,可拿出来放超净台里面,点了酒精灯,几分钟就不冷了,还担心胶会凝在*头里面,所以搞的比较匆忙,结果一下子就出线了气泡,死活都消不掉。当头棒喝啊!大神的帖子

  • dacell
    dacell  回复了帖子 image J软件的常见应用。 43天前
    划痕已经锁帖了,楼主能不能再分享个?
  • dacell
    dacell  回复了帖子 16HBE细胞突然多了很多悬浮黑点!求小伙伴救救孩子! 126天前
    高倍镜拍个照看看黑点!你们实验室太省了,现在还能找到自己配PBS自己消毒的实验室,也是稀罕!都怀疑有污染的培养瓶还重复用,也是厉害!看你发的图片,细胞密度比较低!你说黑沙越来越多的时候,细胞周围是什么情况?有没有拍点照片大家分析分析?
  • dacell
    dacell  回复了帖子 细胞培养 140天前
    有可能对焦问题,高倍镜下再观察看看有没有细胞结构就知道了!
  • dacell
    dacell  回复了帖子 脂溢性皮炎10年 140天前
    您没有权限阅读该帖子
  • dacell
    dacell  回复了帖子 脂溢性皮炎 140天前
    这个病好像没有什么解!都容易复发!
  • dacell
    dacell  回复了帖子 求大神判断是否真菌污染 142天前
    楼主又是经过什么的操作把细胞状态调整好的?
  • dacell
    dacell  回复了帖子 购买细胞咨询 142天前
    ATCC国内北京中原是正规代理
  • dacell
    dacell  回复了帖子 WB 原因分析 这是什么原因造成的 142天前
    1、上样量多少?2、上样之后有没有出现飘散的情况?还是沉底比较好?
  • dacell
    dacell  回复了帖子 QPCR多次都扩不出目的条带,帮忙看看什么原因! 168天前
    多谢!能不能帮忙设计一个看看!
  • dacell
    dacell  发布了新帖 QPCR多次都扩不出目的条带,帮忙看看什么原因! 169天前

    目的条带的扩增曲线和溶解曲线内参的扩增和溶解曲线目的基因的引物blast的结果

  • dacell
    dacell  回复了帖子 每月蛋白版风云战友奖励专用帖 185天前
    谢谢版主
  • dacell
    dacell  回复了帖子 wb条带 196天前
    从内参来看,整个实验操作没有问题,二抗正常工作。从目的条带来看,一抗二抗正常工作。从内参与目的对应的条带亮度来看,无条带的样本可能蛋白含量偏低。建议1、增加曝光时间。2、增加一抗孵育时间。2、加大上样量,
  • dacell
    dacell  回复了帖子 三步找到你想要的QT-PCR引物序列 196天前
  • dacell
    dacell  回复了帖子 三步找到你想要的QT-PCR引物序列 196天前
    可以NCBI查到mRNA序列,用primer premier软件设计,你测的IL-4是什么物种的?
  • dacell
    dacell  回复了帖子 PD-L1的Western Blot结果分析 211天前
    可以封闭4度过夜!降低了上样量,一抗比例就先不动,一般一次调整只变一个参数就OK了!

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