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blowapc 回复了帖子 [求助]革兰阴性菌基因敲除同源重组的一些问题 42天前
lamda pir类的质粒在一般菌株中不能复制，会随着菌株的繁殖自己丢失的。我们一般用pRE112，有时候也用pDM4。
blowapc 回复了帖子 [求助]革兰阴性菌基因敲除同源重组的一些问题 47天前
1. 可行，用overlap PCR吧，操作比酶切简单多了。2. 线性的片段直接进入可能会被降解，数量少，效率可能也不够。3. 你用的是红霉素筛选，所以不需要自杀基因。但是需要增加去除质粒的步骤，建议用lamda pir类的质粒，在菌体中不能复制。具体类型需要根据你的菌种来选择，甚至可能需要自己构建。
blowapc 的帖子被加了1分 64天前
回复：金属表面培养细菌与生物膜
我见过别人做细菌成膜，是把玻片放在培养基里，让细菌在玻片上自由粘附成膜。然后检测玻片上的细菌，以及拍摄电镜照片。如果你是做金属材料的，建议也可以参考这种方法，将实验金属片和对照金属片放在同样的培养基中，培养一定时间后取出，通过结晶紫染色和洗脱，以结晶紫的浓度来定量检测样品对菌膜的...
blowapc 回复了帖子金属表面培养细菌与生物膜 83天前
我见过别人做细菌成膜，是把玻片放在培养基里，让细菌在玻片上自由粘附成膜。然后检测玻片上的细菌，以及拍摄电镜照片。如果你是做金属材料的，建议也可以参考这种方法，将实验金属片和对照金属片放在同样的培养基中，培养一定时间后取出，通过结晶紫染色和洗脱，以结晶紫的浓度来定量检测样品对菌膜的抑制作用。同时建议拍摄扫描电镜，这样证据更充分。如果能做一下机理，那这篇文章就完美了
blowapc 发布了新帖水生生物学、微生物和寄生虫学版主-blowapc 93天前
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blowapc 的帖子被加了1分 95天前
COVID感染症状的猜测：病原和免疫系统----发生在黑匣子里的战争
COVID感染后，其症状差异较大，无症状感染者、轻症、重症均有出现。重症者，感染后几乎很快就需要呼吸机支持，而轻症者仅仅发烧，或者轻微肺炎。甚至有潜伏20余天不出现症状的无症状感染者。期初认为基础病复杂的老年病人，重症和死亡情况较多，但随着病例增多，中青年也出现了死亡病例，如推迟...
blowapc 的帖子被加了1分 95天前
回复：牛津杯抑菌实验
可以随意找个敏感的抗生素，作为阳性对照。阴性对照一般采用不含药物的稀释液，比如你的药物如果是生理盐水稀释的，那阴性对照用生理盐水就可以了。牛津杯定量效果差一些，如果有效果，建议补充MIC
blowapc 的帖子被加了1分 95天前
回复：疫情发生源自试验室病毒泄露？专家回应来了！
iamorange 如何解释病毒基因组里存在一段与人工载体 pShuttle-SN 序列局部相似（identity=68%, 801/1182）的片段？百撕不得骑姐。有兴趣的同学可以自己分析下看。pShuttle-SN载体序列：https://www.ncbi.nlm.nih.g...
blowapc 回复了帖子 COVID感染症状的猜测：病原和免疫系统----发生在黑匣子里的战争 100天前
我觉得也不是仅仅是这样，更多的是应对策略的问题，可以算出牌套路吧。无症状或轻症的情况，如果简单的理解，那可能是先天免疫系统认为nCoV-19不是啥剧烈的抗原，于是反应并不是很剧烈，只是呈递了抗原，等体液免疫和细胞免疫。同时，体液和细胞免疫产生抗体，慢悠悠的跟nCoV19对耗，这种持久战，病毒肯定不是复杂宿主的对手，会被身体慢慢清楚。重症患者，可能是感染以后免疫系统立刻示警，认为nCoV19是一个很可怕的入侵者，如果不能尽快干掉它，自己可能会被干掉，于是即便杀敌1000自损800，也要硬拼。可能炎症风暴就起来了。平时也会有类似的情况，比如过敏患者，受到一些抗原刺激（比如花粉），大多人没啥反应，他们体表就会出现红肿，皮疹，甚至发热，应该属于免疫系统的过度激活所致。糖皮质激素是抑制免疫系统的，在S
blowapc ： COVID感染症状的猜测：病原和免疫系统----发生在黑匣子里的战争

104天前来自网页版点赞0 | 评论 | 收藏
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blowapc 发布了新帖 COVID感染症状的猜测：病原和免疫系统----发生在黑匣子里的战争 104天前
COVID感染后，其症状差异较大，无症状感染者、轻症、重症均有出现。重症者，感染后几乎很快就需要呼吸机支持，而轻症者仅仅发烧，或者轻微肺炎。甚至有潜伏20余天不出现症状的无症状感染者。期初认为基础病复杂的老年病人，重症和死亡情况较多，但随着病例增多，中青年也出现了死亡病例，如推迟婚姻的29岁彭银华医生，以及吹哨人34岁的李文亮医生，而年近60岁的王广发主任顺利康复。从医疗条件来讲，他们都能得到有效的早期干预和救治，为何感染后果差异如此之大？常见的呼吸道病毒，如流感病毒，在感染后3天左右，MHCI和MHCII已经完成了抗原的呈递，人体即可产生有效的抗体，大多数身体健康的流感患者会在1周左右完全康复；少数儿童或高龄患者，可能出现继发感染或其他症状，但一般也会在2周内康复；部分经常锻炼的健身者，会
blowapc 回复了帖子管轶团队从穿山甲中发现新冠相关冠状病毒 104天前
华南农大的结果是宏基因组数据，拼接的时候很可能有问题的，如果要实锤，最好还是分离以后纯培养的病毒
blowapc 回复了帖子疫情发生源自试验室病毒泄露？专家回应来了！ 112天前
做表达载体研究的人很多，这是一个做疫苗研究的载体，中山大学的人在做的。应该是冠状病毒包膜外面的糖蛋白。Constructing recombinant adenovirus carrying the spike gene fragments as a vaccine against SARS-CoV by in vitro ligationNCBI上面有文章题目介绍
blowapc 回复了帖子疫情发生源自试验室病毒泄露？专家回应来了！ 112天前
这可能是冠状病毒的一个高变区域，这个载体上克隆了SARS病毒片段，这种比对，相当于用03年的SARS病毒与nCoV-2019进行比对，都是来源于蝙蝠的，相似度肯定高。
blowapc 回复了帖子疫情发生源自试验室病毒泄露？专家回应来了！ 112天前
source 1..5607 /organism="Expression vector pShuttle-SN" /mol_type="other DNA" /db_xref="taxon:308969" /country="China" CDS 990..2507 /codon_start=1 /transl_table=11 /product="truncated
blowapc 回复了帖子请求寄生虫研究者从形态学上帮忙看看可能哪种虫？ 116天前
https://dxy.me/guLpK2这几个是虫子的照片，虫子应该具有生物的特征哈，而不是随意的扭曲
blowapc 回复了帖子请求寄生虫研究者从形态学上帮忙看看可能哪种虫？ 116天前
怀疑是织物上的纤维哈，这种形态不像是活的生物的。一般很小的寄生虫都是半透明的，在不染色的条件下，你需要调整好显微镜的光线强弱，才能看到的。
blowapc 回复了帖子李兰娟团队推荐药物完成体外细胞实验 117天前
从剂量上来看，是蹭热度的文章，实际效果可能要打很多折扣
blowapc 回复了帖子华南农业大学发现穿山甲为新型冠状病毒潜在中间宿主 117天前
blowapc 回复了帖子请求寄生虫研究者从形态学上帮忙看看可能哪种虫？ 117天前
不是虫子，更像是玻片没有洗干净。玻片比较便宜，尽量买好一些的，用一次性的。如果要重复用，在使用前用清水冲洗干净（最好是蒸馏水，如果条件不合适，最后一次冲洗用纯净水），然后用纯酒精（不是低浓度的医用酒精）泡一下，酒精灯烧一下。另外，盖玻片也很脏，也可以采取这种办法处理，注意操作。

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