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  • baychina
  • baychina
    baychina  发布了新帖 Kruskal-Wallis检验结果里的图上的星号和各种圆圈代表什意思? 187天前

    如图所示,这个 图怎么解读?星号代表和谁比较的差异?一个圆圈和几个圆圈叠加在一起是什么意思?

  • baychina
    baychina  发布了新帖 SPSS做Kruskal-Wallis后两两比较,写文章怎么描述方法 187天前

    请教大家一个问题,我用SPSS25.0做Kruskal-Wallis检验时候选了“Kruskal-Wallis单因素ANOVA检验“进行了进一步的两两比较,请问SPSS这里用的两两检验的方法叫什么?就叫Kruskal-Wallis单因素ANOVA检验?它是基于Mann-Whitney U的还是基于什么方法的?没看到过发表的英文文章里说过Kruskal-Wallis事后两两分析用Kruskal-Wallis单因素ANOVA检验,文章一般是用的Steel–Dwass test,我在文章里写我用的Kruskal-Wallis单因素ANOVA检验做两两分析reviewer到时候会不会质疑方法学问题呢?

  • baychina
    baychina  加入了调查派 358天前
  • baychina
    baychina  发布了新帖 求教各位大神测试GTP、PRPP浓度方法 597天前

    求助各位,用什么方式可以较可靠的测试GTP(三磷酸鸟苷)和PRPP(磷酸核糖焦磷酸)浓度?看文献上用HPLC测的,但是联系了好多地方都说他们测不了,有没有大神指导其他测试方法,或者哪些公司机构可以做测这两种代谢物的HPLC?跪谢!!

  • baychina
    baychina  发布了新帖 求助各位大神怎么测GTP和PRPP浓度 597天前

    求助各位,用什么方式可以较可靠的测试细胞内GTP(三磷酸鸟苷)和PRPP(磷酸核糖焦磷酸)浓度?看文献上用HPLC测的,但是联系了好多地方都说他们测不了,有没有大神指导其他测试方法,或者哪些公司机构可以做测这两种代谢物的HPLC?跪谢!!

  • baychina
    baychina  的帖子被加了1分 833天前

    回复:关于细菌基因敲除的疑问

    blowapc 尽量还是要按照3的倍数进行敲除,否则后面的基因可能发生移码突变谢谢指正,我说的不够完善哈哈,我的意思是如果敲一整个基因的cds就不涉及3倍问题,如果只要敲cds中的某一部分就要好好考虑了,比如敲中间某一段就要考虑设计的左右臂发生同源重组以后得到的是怎样的序列,这需...
  • baychina
    baychina  回复了帖子 求助,麻烦帮忙看一看是不是噬菌体斑 841天前
    不好说,做下梯度稀释再重复实验看看能不能看到单个噬菌斑
  • baychina
    baychina  回复了帖子 关于细菌基因敲除的疑问 843天前
    谢谢指正,我说的不够完善哈哈,我的意思是如果敲一整个基因的cds就不涉及3倍问题,如果只要敲cds中的某一部分就要好好考虑了,比如敲中间某一段就要考虑设计的左右臂发生同源重组以后得到的是怎样的序列,这需要按照具体实验要求来考虑,绝大部分做敲除还是全敲
  • baychina
    baychina  的帖子被加了1分 844天前

    回复:关于细菌基因敲除的疑问

    superknight 1.构建缺失菌株时,被缺失的目的基因是否要满足是3的倍数?2.在构建多基因缺失载体时,将2个基因连在一起时,使用酶切连接效率高还是通过重叠PCR连接效率高?3.革兰氏阳性菌一般用什么敲除载体?能够推荐几个载体(哪家公司的)4.上下游同源臂设计长度一般多少同...
  • baychina
    baychina  回复了帖子 关于细菌基因敲除的疑问 844天前
    我来回答下:1. 基因敲除不涉及3的倍数问题,只有表达蛋白时才考虑这个问题。2. 我没做过多基因缺失的载体,不知道这个可不可行,我们一般还是一个一个的敲,如果要连在一起可以试试两个方法一起用,反正这个不麻烦也便宜,实验这东西说不准,也许有的理论上很简单要做很长时间做不出来,多一个方法多一些成功的可能。3. 阳性菌的敲除一般要比阴性菌困难一些,特别是一些细胞壁比较厚的菌,经常需要电转化,而且效率还经常不高。至于具体的载体要看你具体做什么细菌再去查文献,不同阳性菌用到的载体也是不同的。4. 文献上说同源臂一般大于500bp就可以满足同源重组的要求,我们也设计过500bp的同源臂做过实验是可行的,但是同样的同源臂长度不同基因的敲除效率可以差很多,有的成功率很高,有的要筛选很久,可能和这个基因本身的
  • baychina
    baychina  回复了帖子 请教一下关于测量OD600的试验知识 844天前
    不应该呀,这两个菌在试管里震荡培养过夜应该OD值都很大了,你的菌液看上去还比较清澈?
  • baychina
    baychina  的帖子被加了1分 845天前

    回复:请教一下关于测量OD600的试验知识

    1. 最好还是加200ul,测生长曲线时间比较长,到后面有些液体要蒸发掉。2. 监测细菌生长都用OD600。3. 最好设置一个培养液的空白,然后每个数值去减掉这个空白。但是就观察生长趋势的话我觉得不去减也是可以的。
  • baychina
    baychina  回复了帖子 请教一下关于测量OD600的试验知识 846天前
    1. 最好还是加200ul,测生长曲线时间比较长,到后面有些液体要蒸发掉。2. 监测细菌生长都用OD600。3. 最好设置一个培养液的空白,然后每个数值去减掉这个空白。但是就观察生长趋势的话我觉得不去减也是可以的。
  • baychina
    baychina  回复了帖子 抗生素溶液的配制 846天前
  • baychina
    baychina  回复了帖子 细菌耐药 846天前
    现在有一种“适应性耐药”(adapative resistance)的观点,但我觉得最终都要归因于基因变化层面才会有稳定的耐药表型
  • baychina
    baychina  回复了帖子 切胶质谱鉴定结果和胶上对应分子量不一样是怎么回事? 860天前
    我也回来好多个,但是最后评分最高的就几个,最终结果里说基本hit到一个蛋白上,但是就是分子量不一致,不知道怎么回事
  • baychina
    baychina  回复了帖子 5个叮当悬赏:同源重组敲除BL21基因时能不能直接将“左同源臂-抗性片段-右同源臂”的线性片段转化进BL21感受态,而不通过连接质粒? 865天前
    不行,你这个线性的就算进去了也不会复制,再把片段构建到质粒上只多了一步,而且很多时候假阳性率不高
  • baychina
    baychina  回复了帖子 DH5α细菌生长状态 865天前
    有时候有些培养条件会出现这种情况,如果不放心建议用这个液体再划一个板子挑单菌落,并验证其中你构建的质粒
  • baychina
    baychina  的帖子被加了1分 868天前

    回复:微量肉汤稀释法测定抗菌药物MIC实验

    我的看法:还是按照CLSI推荐的标准做法做比较好,包括培养基的选用、培养时间等。1.一般保证你的药物没有污染的话,只需要做一个不加药物的对照(即药物浓度为0这一组)。2.药物配制要看你的药物需要用什么溶剂了,比如盐的话只需要用灭菌水,有些则需要醋酸等有机溶剂。3.标准的做法都是挑...

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