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丁香客

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  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 请教下痰液化对下游实验/检测影响问题(氢氧化钠法) 320天前
    正在找这方面文章,液化处理常见有NaOH,半胱氨酸及DTT为主要成分,还看到文章用磷酸三钠处理,除了NaOH外其他方式对TB的灭活性应该都比较低,消化后的痰液还可以用于痰培养
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 ABI 7500软件及SDS (XP、WIN7版本) 517天前
    什么乱七八糟的,解压不了,官网可以下载的就这两个http://dxys.com/BIeFZl
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 溶菌酶作用最适温度计pH 656天前
    Lysozyme is a single chain protein with a MW of 14.3 kD. It hydrolyzes β(1-4)-linkages between N-acetylmuraminic acid and N-acetyl-D-glucosamine residues in peptidoglycans and between N-acetyl-D-glucosamine residues in chitodextrin. Gram-positive cells are quite susceptible to this hydrolysis as their cell walls have a high proportion of peptidogly
  • arbitrar
    arbitrar  发布了新帖 溶菌酶作用最适温度计pH 656天前

    部分研究文章及资料说溶菌酶的最适温度是50-65℃,pH则是5-7,偏酸性。但也有不少资料说最适温度是30-37℃,pH为8,比如生工的溶菌酶缓冲液pH就为8,何解?另外,溶菌酶是否可以和蛋白酶K同时作用,PK会不会把溶菌酶消化掉?

  • arbitrar
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 分享一款统计神器Medcalc 15.2.2 破解版 中文版 949天前
    安装了找不到了,原来在安装目录里,建立快捷方式到桌面
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 miRNA血清保存问题 951天前
    五年没这么长时间吧。我在很多文章上都看到说microRNA作为血清/血浆标记物的有点都有一条:不容易降解,但是不知道这句话的意思是在体内不容易降解还是什么,实际上不管是提取前还是提取后都是非常不稳定的。 群【microRNA/分子诊断】: 489889717All about microRNA
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 AlleleID 6.0 crack版,MGB等引物探针设计软件 951天前
    crack方法:1、就是把crack解压缩后,里面的patcher.jar文件黏贴到贴到c:\Program Files\AlleleID 7.7\http\Dwww.premierbiosoft.com\P80\DMIUpdater\DMAL\DM750(具体看你的安装路径,最终是这个文件夹就对)2、然后从电脑的“开始”中找到运行,或直接按“windows+R”,输入cmd,打开dos系统3、然后输入(鼠标右键粘贴)cd c:\Program Files\AlleleID7.7\http\Dwww.premierbiosoft.com\P80\DMIUpdater\DMAL\DM750(就是上面输入的那个路径)4、再输入“java -jar patcher.jar”回车上面的2-4歩在wi
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 求助microRNA进行PCR相关问题 951天前
    哥你先把波浪线那一个空ommit了再分析啊。ct小于40我认为基本都有效。逆转录试剂肯定要和后面的PCR想配套才能用的,因为下游引物无论是加尾法还是stem-loop法都是特异性结合在外加序列上,如果是自己设计的用什么试剂都行,如果是人家提供的反转录引物肯定要用他们配套的PCR引物。测序应该是最好的确定是否目标产物的方式。
  • arbitrar
    arbitrar  发布了新帖 miRNA实验中内参、外参基因的应用 962天前

    1,外参是miRNA检测过程中加入到待测样本中的外源性物质,可以反映样本检测过程中RNA提取和qRT-PCR操作过程中的偏差,目标基因的检测值会随着提取和PCR操作等过程的效率而变动,但外参也会水平浮动,从而得到目的基因的相对水平;2,内参是样本中稳定表达的内源性物质,能反应样本本身的内源生物的差异,比如不同人血浆中的miRNA总量可能不一样,但内参和总量的相对量是保持比例的;3,同时使用外参和内参,可以对检测数值进行归一化处理,使得数据间具有可比性,从而研究表达水平与目标性状之间的关系。参考文献见附件

  • arbitrar
    arbitrar  发布了新帖 外周血miRNA用于肿瘤诊断的一些讨论 962天前

    1,用于肿瘤诊断的miRNA是不是有不同来源?主要分文circulation tumor cells(CTCs), cell free RNA, 以及从PBMC中得到的miRNA, 通常我们选择血浆为检测对象,是不是只包含cfRNA? 研究中是不是要比较这几种不同来源的差别?2,对于选择血清还是血浆,对于miRNA研究而言,其主要的差异机制会是什么?比如取血浆是为了保护整个环境的稳定性,保证尽量少的其他物质释放出来,减少杂质,是否可能还有别的机制?3,对于样本稳定性,稳定的机制主要在于核酸酶水解?还是其他作用?同时我还看到基于保护其他细胞不被裂解的原理,也是为了减少血液中其他物质释放,当然,这是区血浆的做法,如果是取CTC或者PBMC的做法,又如何保存呢?还有不少关于RT-qPCR部分的疑问

  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 请教:定量PCR检测miRNA的时候,需要特别注意RNA中的DNA污染问题么? 963天前
    如果提取的是总RNA做miRNA实验,是可以用你说的方法测试DNA污染问题的
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 如何检测特定的几种miRNA 1110天前
    既然是特定的几个miRNA,直接用PCR做吧,LTDA一块板一百多个呢,我还看见有别的panel也可以做筛选,貌似不少人用ABI的成品引物,省了不少事情。
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 miRNA茎环法反转录时必须一个引物单独一管还是可以多个混合。 1110天前
    我的经验是可以放在一起反转录,目前有些方法甚至是用的通用反转录引物,另外最好也是内参基因和靶基因同管反应,不光更准确,还能防止加样错误
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 肝癌诊断的生力军——MicroRNA 1140天前
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  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 检测血液中的microRNA应该选择血浆还是单核细胞? 1140天前
    PBMCs in particular represent an attractive alternative tissue for profiling active disease in living patients at statistically robust numbers. This accessible tissue can reflect global disease-associated changes in an underlying genetic disorder and may have special significance where immunological risk factors are believed to be involved. In schi
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 如何比较两个诊断实验AUC是否有显著性差异 1145天前
    lz好人看到一个文章《诊断试验效能比较的评价指标》说了一个新方法,不过我想知道,这是一个整体的比较方法,如果我遇到一种情况:有A和B两种方法,相对于A,对比使用A+B来说,如何判断B的贡献程度,即A+B如果提高了特异性但降低了灵敏度(是否一定会发生?),那么A直接降低灵敏度是不是也可以达到同样的效果?
  • arbitrar
    arbitrar  发布了新帖 AlleleID 6.0 crack版,MGB等引物探针设计软件 1208天前

    各种系统都可以使用

  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 LNA怎么设计 1273天前
    同问,有无相关的设计软件,我研究了一下Beacon Designer这个软件,里面有LNA设计功能,但不是很理想,我还要设计阻断探针,怎么评价呢?EXIQON有一些信息也不全面。
  • arbitrar
    arbitrar  回复了帖子 使用UCSC查找基因启动子区域方法 1405天前
    留个群号讨论一些关于甲基化的东西DNA Methylation 75657172

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