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【共享】如何检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP抗体?

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  • amyjet
    amyjet  发布了新帖 超级好用的Strep Tag II标签抗体! 2天前

    在重组蛋白纯化的过程中,研究者常常利用融合表达的各种亲和标签,通过一步法亲和纯化的方法获得自己的目的蛋白。其中,6×His•Tag标签因其氨基酸个数少、纯化方便,成为大家常用的选择。但是,仍有一些限制因素使得科学家们不断寻找更适合自己的亲和标签。如:对重金属离子敏感、不适合金属离子螯和层析方法的蛋白;活性不稳定的蛋白;对蛋白纯度要求更高等。Strep Tag II System,你的选择 Strep-tag技术开发的原理是众所周知的生物素(biotin)和抗生物素蛋白链菌素(streptavidin)之间的结合反应。为了将这种牢固的相互作用用于蛋白质纯化用途,研究者们发现需要一个肽,该肽与重组蛋白质融合后,能够结合在streptavidin的生物素结合口袋,从而作为纯化tag。&n

  • amyjet
    amyjet  发布了新帖 稳定优秀!膜蛋白内参抗体-钠钾ATP酶 2天前

    免疫印迹是确定样品(如组织匀浆,提取物)中特定蛋白质水平的常用方法。内参抗体是指示在各个孔中的样品具有相等载量的重要参照。内参抗体同样还可以指示免疫印迹过程中转膜的效率。作为广大科研工作者接触最多的实验类型,WB,大家都知道全细胞裂解液,核蛋白,线粒体等等样品应该用什么做内参。但是说到膜蛋白,似乎很多人都表示不清楚~膜蛋白应该用什么做内参?钠钾ATP酶(Sodium Potassium ATPase),钠钾泵(sodium potassium pump)又称钠泵或钠钾ATP酶,它会使细胞外的Na+浓度高于细胞内,当Na+顺着浓度差进入细胞时,会经由本体蛋白质的运载体将不易通过细胞膜的物质以共同运输的方式带入细胞。此蛋白广泛存在于各类细胞的细胞膜上,被广泛用作为膜蛋白的内参。 为什么

  • amyjet
    amyjet  发布了新帖 流程超简单!【m6A】DNA甲基化定量检测试剂盒 2天前

    众所周知,N6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核生物最常见和最丰富的RNA分子修饰。那DNA存在m6A修饰吗?答案是肯定的,DNA m6A也被鉴定在包括秀丽隐杆线虫和果蝇的多细胞真核生物中,并进一步鉴定在包括植物,小鼠和人细胞在内的高等真核生物。m6A在调控DNA复制,转座,转录和细胞防御中起关键作用。在人类中,DNA m6A修饰最有可能被甲基转移酶复合物METTL3催化,并被α-酮戊二酸(α-KG)和Fe 2+依赖性双加氧酶如ALKBH5和TET样酶除去。DNA的动态和可逆化学m6A修饰也可以作为具有深刻生物学意义的新型表观遗传标记。m6A修饰的下调首先在人类癌细胞和组织中表现出来,相对于其正常对照。发现m6A是癌症中最受调节的DNA修饰。除了癌细胞中的调节之外,相对于含有相当低量的DNA m6

  • amyjet
    amyjet  发布了新帖 如何选择性价比高的Nano-Tag9标签抗体? 2天前

    Nano标签是一种新的用于纯化和检测nano标签蛋白的链霉亲和素结合多肽。这种多肽与链霉亲和素具有高度亲和性,因此被称为nano标签。Nano标签有两种类型—Nano-tag15 (MDVEAWLGARVPLVET)和Nano-tag9 (MDVEAWLGAR),它们分别与链霉亲和素结合的解离常数为4nM和17nM。Figure.1 链霉亲和素结构示意图 如何选择合适的Nano-Tag9标签抗体?我们在选择Nano-Tag9标签抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。另外,一个抗体检测后的应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大;而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也

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    amyjet  发布了新帖 C3d对免疫治疗的影响 2天前

     Journal of Clinical Investigation Insight期刊曾发表题为C3d regulates immune checkpoint blockade and enhances antitumor immunity的文章,该文章研究成果来自于美国密歇根大学的研究人员。他们提出了一种新的肿瘤免疫疗法,利用补体C3d来阻断肿瘤诱导的免疫抑制,从而实现对肿瘤的控制,同时他们还发现,利用补体C3d进行免疫治疗,似乎没有副反应。 补体是一组存在于人和动物体液中及细胞表面,经活化后具有生物活性,可介导免疫和炎症反应的蛋白,也称为补体系统。补体是正常的血清成分,广泛参与机体微生物防御反应以及免疫调节,也可介导免疫病理的损伤性反应,是体内具有重要生物学作用的效

  • amyjet
    amyjet  发布了新帖 满足多样化需求——总组蛋白H3定量分析试剂盒 2天前

    Histone H3与H2A,H2B和H4一起参与真核细胞中染色质的结构。组蛋白H3通过承受几种不同类型的表观遗传修饰,参与并影响许多细胞进程,如转录激活/失活,染色体包装和DNA损伤/修复。 这些修饰,包括乙酰化,磷酸化,甲基化,泛素化和ADP-核糖基化,主要发生在组蛋白H3的N末端尾区域上,这导致核小体结构重构成更容易接近的开放构象的转录复合物。在大多数物种中,组蛋白H3主要在赖氨酸9,14,18,23和56处乙酰化; 在赖氨酸4,9,27,36和79处甲基化; 并分别在ser10,ser28,Thr3和Thr11磷酸化。最近,也观察到H3瓜氨酸化,并与几种疾病或病理状态有关。 因此,各种组蛋白修饰,特别是血浆或血清样品的定量检测将提供有用的信息,以更好地了解细胞过程

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    amyjet  发布了新帖 Transferrin抗体(转铁蛋白抗体),表达极其稳定 2天前

    为什么选择Transferrin抗体为血清样品的内参指标呢?转铁蛋白又名运铁蛋白(transferrin,TRF,siderophilin)是血浆中主要的含铁蛋白质,负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以TRF-Fe3+的复合物形式进入骨髓中,供成熟红细胞的生成。具有698个氨基酸的人转铁蛋白与其小鼠直向同源物73%相同,并且与斑马鱼直系同源物43%相同,表达相对稳定,特别适合作为血清样品的内参。 目前市面上能提供的转铁蛋白有国产分装或原产的,国产分装的转铁蛋白在质量稳定性上有不足,并且经过分装以后,其效价也有损失。而原产于国内实验室的转铁蛋白有些具有较好的检测活性,在批次之间的稳定性上较难控制,而国内仅有的少量原产抗体也是多克隆抗体。至于原装进口供应转铁蛋白的进口品牌

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    amyjet  发布了新帖 高性价比超高的存活蛋白(Survivin)抗体 2天前

    问:存活蛋白Survivin?存活蛋白/存活素(Survivin)是凋亡抑制蛋白家族成员之一,具有抑制细胞凋亡和调节细胞周期的双重功能,主要表达于胚胎和发育的胎儿组织中,高表达于大多数恶性肿瘤组织,而在终末分化成熟的正常成人组织中无表达或低表达。因此,它已成为肿瘤诊断,预后以及抗癌疗法的主要靶标。癌症中存活蛋白的过表达可以克服细胞周期检查点,以促进转化细胞通过有丝分裂的异常进展。目前已知的与Survivin相关的癌症有:乳腺癌、膀胱癌、结肠/直肠癌、子宫内膜癌、食管癌、胃癌、头颈癌、肝细胞癌、口腔癌、胰腺癌和肾细胞癌等等。正因为如此,科学界对于Survivin的研究正如火如荼,科学家们希望进一步研究确定存活蛋白的新靶点并了解其生物功能,以期对于癌症的潜在诊断和治疗。Survivin Poly

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    amyjet  发布了新帖 红色荧光蛋白mStrawberry 标签抗体,怎么选才合适? 2天前

    在活细胞及动物全身成像中需要表现较好的红色荧光蛋白,主要是由于在多种颜色成像实验中需要红色探针,另外基于较长的激发波长产生的光毒性较小,可以用来探测较深的生物组织。通过mRFP1发色团残基的直接突变产生的新的荧光蛋白,得到的单体荧光蛋白发射峰在560nm~610nm,并以相应的水果名字来命名。而我们今天的主角,mStrawberry,就是基于mRFP定向突变而来的一种明亮的单体红色荧光蛋白,它的EX/EM=574nm/596nm。 Figure.1 mStrawberry的荧光特性如何选择合适的mStrawberry标签抗体?我们在选择mStrawberry抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。另外,一个抗体检测后的应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大;而小鼠源

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    amyjet  发布了新帖 mOrange标签抗体,荧光特性怎么样? 2天前

    与荧光蛋白质工程中的青色、 绿色和黄色的光谱类的数目相对较大,橙色荧光蛋白目前仅开发的频谱 (从约 555 到 580 纳米) 的橙色部分中。即便如此,所有三个现有的橙色荧光蛋白,与被隔绝的珊瑚礁物种,都有可能在各种成像场景非常有用。橙色荧光蛋白mOrange作为明亮的荧光蛋白(荧光强度是EGFP的1.46倍),常被用作为标签和报告基团使用。mOrange是从mRFP蛋白突变而来,其荧光特性为:Ex/Em=548nm/562nm。Figure.1 mOrange的荧光特性如何选择合适的mOrange标签抗体?我们在选择mOrange抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。另外,一个抗体检测后的应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大;而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及

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    amyjet  发布了新帖 为什么一定要选择合适的ECFP标签抗体? 6天前

    CFP标签蛋白为增强型青色荧光蛋白eCFP,激发波长为433nm或453nm,发射波长为475nm或501nm,其是由野生型青色荧光蛋白CFP通过氨基酸突变和密码子优化而来的。相对于CFP,eCFP荧光强度更强、荧光性质更稳定。同时载体中构建的Kozak序列使得含有eCFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。Ex/Em=433/475nm。Figure.1 ECFP的荧光特性如何选择合适的ECFP标签抗体?我们在选择ECFP抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。另外,一个抗体检测后的应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大;而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。

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    amyjet  发布了新帖 组蛋白H3,H4各类修饰抗体组合套装,性价比的春天来了~ 6天前

    在生物学中组蛋白是染色质的主要蛋白组分。组蛋白像线轴, DNA 缠绕在它的周围,且在基因调控中起着重要作用。核心组蛋白包括 H2A, H2B, H3 和 H4。组蛋白的翻译后修饰可改变 DNA 与核蛋白之间的相互作用。 H3 和 H4 组蛋白有一个从核小体里伸出的长的尾巴,它在不同的位点(比如甲基化,乙酰化,磷酸化等)被共价修饰。通过组蛋白修饰调节染色质结构在真核生物转录调控中起重要作用。 常染色质或松散染色质与基因表达相关,而紧密卷曲的染色质或异染色质与基因沉默相关。 目前科研客户普遍遇到的一个问题是,客户想要初步筛选或者研究某一类型的修饰时,比如H3

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    amyjet  发布了新帖 超级好用的转导蛋白Smad2 多克隆抗体! 6天前

    Smads家族蛋白是一类在将TGF-β信号从细胞表面受体传导至细胞核的过程中起到关键性作用的蛋白,该家族成员选择性地与两种TGF-β受体结合,从而发挥不同的功能。Smad蛋白有两个保守的结构域,N端的MHl (Mad Homology)区和C端的MH2区。 MH1和MH2呈球状结构,在基态时相互抑制,活化后它们与核内的一些调节蛋白相互作用,从而调节转录。按结构与功能的不同,人们将Smad蛋白分为3类:受体调节型Smads ( Receptor-regulated Smads,R-Smad 1、2、3、5、8)、共同介质型Smad蛋白(common mediatorsmads, Smad 4)和拮抗型Smad蛋白(Antagonistic smad, Smad 6和Smad 7)。S

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    amyjet  发布了新帖 N6-甲基腺嘌呤多克隆抗体,应用非常广泛! 6天前

    N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是真核生物信使RNA(Messenger RNA,mRNA)上含量最多的化学修饰之一。m6A修饰是动态可逆的,可在时间和空间上被甲基转移酶和去甲基酶调控。哺乳动物体内m6A甲基转移酶复合物中有一部分成分已被解析,主要有METTL3 (Methyltransferase-like protein 3)、METTL14 (Methyltransferase-like protein 14)和WTAP (Wilms tumor l-associating protein)。除了RNA存在m6A修饰之外,DNA的m6A也已被鉴定出来,在包括秀丽隐杆线虫和果蝇的多细胞真核生物中,并进一步鉴定在包括植物,小鼠和人细胞在内的高等真核生物。m6

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    amyjet  发布了新帖 认真讨论,WB实验需要哪些试剂? 6天前

    蛋白质免疫印迹(Western Blot, WB )是很常规的生物学实验,是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(如PVDF膜)上,以非共价键形式吸附蛋白质。固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显影,检测特异性目的蛋白的表达。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。 众所周知,市场上与WB相关的品牌繁多,其下各类产品更是乱花眼球,如何于三千弱水中找到一个可靠稳定的供应商,一个完整的WB实验又需要哪些试剂呢? 【1】蛋白质提取与定量:&nb

  • amyjet
    amyjet  发布了新帖 超敏StrandBrite™RNA定量试剂盒,优秀~ 7天前

    准确定量RNA是各类的分子/细胞生物学实验是重要前提,例如在进行Northern印迹分析之前测量体外转录的RNA的产量并测量RNA浓度,以及S1核酸酶测定,RNA酶保护测定,cDNA文库制备,反向转录PCR和差异显示PCR。最常用的测量核酸浓度的技术是260 nm处吸光度的测定。基于吸光度的方法的主要缺点是蛋白质,游离核苷酸和其他紫外线吸收化合物会产生干扰。使用超敏的核酸荧光染料可以缓解这种干扰问题。 StrandBrite™RNA定量试剂盒*绿色荧光,荧光酶标仪优化*【AAT-17655】,StrandBrite™RNA定量试剂是用于定量溶液中RNA的超敏荧光核酸染料。StrandBrite™RNA定量试剂盒可以使用荧光酶标仪或荧光计检测少至5 ng / mL的RNA。我们的St

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    amyjet  发布了新帖 HDAC11选择性抑制剂,真的很好用! 7天前

    HDAC11(组蛋白去乙酰化酶11)?组蛋白去乙酰化酶11,是IV类组蛋白去乙酰化酶中唯一的成员,不仅从表观遗传学的角度参与细胞分裂调节,神经系统发育以及肿瘤发生等重要生理病理过程,还可调节IL-10的表达,并且与免疫耐受等免疫活动密切相关。除此以外,HDAC11可与其他HDACs相互结合,形成功能复合体。HDAC11与HDACs相互作用图一款选择性的HDAC11抑制剂,将能够有效的帮助您对HDAC11的深入探索,《Nature》文章认可的HDAC11选择性抑制剂BIV-B1893就真的很好用!HDAC11抑制剂相关文章:【1】Joshi, Preeti, et al. "The functional interactome landscape of the human histone de

  • amyjet
    amyjet  发布了新帖 C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒,实验结果重复性好! 7天前

    C反应蛋白(C-Reactive Protein,CRP) 是由肝脏生成的血浆蛋白,主要被当作发炎的指标,因其对肺炎双球菌的C-多糖体(C-polysaccharide)会产生沉淀反应,故取名C-反应蛋白。C-反应蛋白由五个24千道尔顿原聚体(含206个氨基酸)以非共价连结成为五元体环形结构。 C-反应蛋白会结合在死亡细胞或微生物外膜上的磷酸胆碱(phosphocholine),以激活补体系统。当体内有急性炎症、细菌感染、组织的损伤时,C-反应蛋白在数小时内出现,而疾病治愈后又很快就消失。C-反应蛋白并不适用于单一疾病的诊断。它的临床价值主要在于组织损伤的筛检和监测,应用在判断病人是否发炎以及诊断发炎性疾病复发的可能性,藉以评估抗发炎药物治疗的成效。另外C-反应蛋白可用来协助类风湿

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    amyjet  发布了新帖 超好用的白介素6(IL-6)ELISA试剂盒! 7天前

    白介素6 ( IL-6)是主要由巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞产生,具有多种复杂生理功能的多肽类细胞因子。在机体发生炎症反应或感染时,病毒、内毒素、肿瘤坏死因子等多种细胞因子可诱导机体产生IL-6。IL-6生物学作用主要体现在诱导B细胞分化产生免疫球蛋白,促进T细胞增殖生长,增强血细胞的分化及其抗瘤效应,促进骨髓造血干细胞增殖等。IL-6是细胞因子网络中的重要成员,在急性炎症反应中处于中心地位,IL-6产生后诱导产生C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)生成,与炎症性疾病及感染程度直接相关。IL-6能更快的诊断早期炎症及预警脓毒症的发生。另外,IL-6半衰期要短于CRP和PCT,能更快的反应抗生素治疗的效果,更好的反应患者的预后。EliKine™  IL-6 ELISA定量试剂

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    amyjet  发布了新帖 L-乳酸Lactate检测试剂盒,只需40分钟 8天前

    乳酸盐浓度的异常升高与多种疾病如糖尿病、酸毒症等疾病有密切的关系。L(+)-乳酸盐是人体中乳酸盐代谢的主要中间产物,并且存在于血液中。D(-)-乳酸盐也存在,但含量很低,只有L(+)-乳酸盐 的1-5%。过高的乳酸盐浓度提示糖尿病和乳酸性酸毒症等疾病的存在。近期也有研究显示,利用核磁共振检测大脑中乳酸盐含量,可了解人类大脑的老化程度;并发现乳酸盐含量越高,大脑越老化。   (代谢通路)     升级款L-lactate比色法检测试剂盒K627-100,引用相当广泛,所以也比较推荐~   其原理如下:      乳酸检测分析试剂盒II乳酸检测试剂盒时,乳酸被乳酸脱氢酶氧化,产

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