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  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 大鼠肺损伤模型,转染 36天前

    请教大家一个问题,如果构建大鼠肺损伤模型,之后要进行转染,并于不同的时间点处死大鼠,那进行转染的时间点是选择肺损伤最明显的那个点,还是要分别在构建损伤模型的不同时间点进行转染,再分别于转染后不同的时间点进行处死呢?有没有做过类似实验的前辈,可以指点一下😂

  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 求助!急求!RLE-6TN细胞株 42天前

    已经买了两次RLE-6TN细胞株,结果到货以后直接送检,都有支原体污染!实验进度严重拖延,现在真的是没办法了,已经不敢从这些细胞公司购买,时间紧迫,急需这个细胞,不知道有没有好心人可以提供一株,谢谢啦!

  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 构建大鼠肺损伤模型 51天前

    请问有没有前辈构建过大鼠肺损伤模型?求比较靠谱的具体建模方法,谢谢!

  • WFy1991
    WFy1991  回复了帖子 支原体污染了实验室该怎么处理,急求! 62天前
    那在此期间孵箱都不能使用了?
  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 支原体污染 62天前

    大家觉得这些圆点点是支原体污染吗?有时候还能看到一大团比较模糊的黑影,但是调节显微镜也看不清楚

  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 细胞被支原体污染 63天前

    两种细胞拿出去做实验,结果均被检测出来存在支原体污染,平时生长状态都还可以,一时不知道该如何处理了😭

  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 要做WB,从细胞提取出蛋白质后可以不做任何处理直接冻存吗?还是必须得加loading buffer煮沸后才能冻存? 63天前

    要做WB,从细胞提取出蛋白质后可以不做任何处理直接冻存在-80吗?还是必须得加loading buffer煮沸后才能冻存呢?这两种方法会对结果有什么影响呢?

  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 JC-1线粒体膜电位测定试剂盒 69天前

    有没有前辈用过JC-1线粒体膜电位测定试剂盒呀,求推荐比较靠谱的品牌

  • WFy1991
    WFy1991  回复了帖子 如何计算MOI值?已算晕😂 69天前
    这几个管的病毒滴度和体积分别是多少呢?病毒滴度都是10的8次方(稀释之后就不是这个值了吧?),体积分别是10ul、1ul、0.1ul?
  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 如何计算MOI值?已算晕😂 69天前

    MOI值=病毒滴度(TU/mL)×病毒体积(mL)/细胞个数,做预实验的时候病毒不是要稀释嘛,那各项值分别是多少呢?(这个细胞个数是接种个数还是转染时的个数呢?如果是后者,又不能把细胞消化下来,如何计算数量呢)如图片所示做处理

  • WFy1991
    WFy1991  回复了帖子 慢病毒转染A549后对照细胞出现异常 69天前
    楼主,请问您用慢病毒转染A549时的MOI值是多少呢?
  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 如何留取细胞上清液?能用加了胎牛血清的完全培养基吗? 71天前

    现在养A549和RLE-6TN细胞株,要留取细胞上清液测TNF-α和IL1、2、6、8、10等,请问要如何留取?能不能加胎牛血清?留取后直接冻到-80?能存放多久,存放时间不一样会不会对结果有影响呢?(问题比较多,还希望有前辈可以帮忙解答,谢谢!)

  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 LPS处理A549和RLE-6TN细胞 73天前

    我最近要用LPS处理A549和RLE-6TN细胞,之前没做过这方面的实验,所以有些细节方面的事情想请教。大家的LPS是用什么溶解的呢,一次全都溶解完?溶解之后什么条件储存,能储存多久呢?处理细胞的时候加的LPS的量只要达到某一浓度就可以呢,还是也要考虑细胞数量?处理成不成功,大家是根据什么判断的呢?问题比较多,谢谢啦!

  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 右前臂阵发性刺痛感 75天前

    您没有权限阅读该帖子

  • WFy1991
    WFy1991  回复了帖子 A549细胞刚传了一代,这是怎么了? 75天前
    传代以后用8字法摇了,但是镜下看的时候还是中间比较密,不知道是为什么😂
  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 A549细胞刚传了一代,这是怎么了? 76天前

    第一、二张是刚从协和取回来时候的照片;剩下的几张是传完一代培养第二天的照片,培养瓶中间比较密,边缘较稀疏,但是我觉得这个细胞怪怪的,中间那一片片的就像头皮屑一样,不知道是怎么回事,就连比较稀疏的地方细胞周围好像也有东西一样。请问这是什么情况呢?

  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 请问这个是提取的细胞总蛋白的意思吗? 77天前

    sample这一项是指用的这个细胞总蛋白的意思吗?

  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 A549和RLE-6TN细胞代数问题 77天前

    A549和RLE-6TN细胞一般传到多少代就需要重新购买了或复苏了?还是只要细胞生长速度和之前一样就可以继续使用?另外大家的RLE-6TN一般消化多长时间就可以,我这株放在孵箱里四五分钟左右(平时生长速度正常),而A549只需要1~2分钟,请问这个时间算久吗?

  • WFy1991
    WFy1991  发布了新帖 求助!Western Blot预实验 77天前

    本人最近要做Western Blot实验,之前没接触过,也没有人指导,想求助一下前辈如何做WB抗体预实验,该怎么设置组别?谢谢啦!

  • WFy1991
    WFy1991  回复了帖子 线粒体蛋白WB 78天前
    请问楼主后来是怎么做的呢?依然是提取总蛋白?

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