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【招聘】NEB公司招聘产品专员

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【共享】最新细胞影像学分析技术——SNAP-Tag

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  • NEB
    NEB  回复了帖子 单酶切连接能实现吗 2035天前
    首先,单酶切出现空载体较多的话,可以考虑载体去磷酸化。如果插入片段经过酶切,不需要再磷酸化处理,末端本来就是磷酸化的。 其次,T4连接酶的连接条件是16℃过夜或者室温连接30min-2h 目的片段和载体的比例一般在2:1-6:1
  • NEB
    NEB  回复了帖子 目的基因2kb载体3Kb连接不上怎么办 2035天前
    另外建议连接体系中DNA总量不要过多,1-10ng/ul反应体系
  • NEB
    NEB  回复了帖子 PCR产物出现许多非特异条带,急求帮助,谢谢! 2073天前
    参考一下:
  • NEB
    NEB  回复了帖子 怎样选择合适的DNA marker 2075天前
    这两款应该比较符合你的要求,NEB公司的
  • NEB
    NEB  回复了帖子 酶切连接后后转化老是空板 急死了 2248天前
  • NEB
    NEB  回复了帖子 关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答 2250天前
    hedyzero 你好 纯化的目的主要是去除PEG,不建议使用3M醋酸钠和乙醇沉淀方法。
  • NEB
    NEB  回复了帖子 klenow酶补平的苦恼?急 2250天前
    DNA聚合酶I(Klenow)大片段 是可以切除3'突出端和补平5'突出端的,最后形成平末端DNA。 引起末端补平不完全的原因有以下几个: *Adding too much enzyme *Incubating for too long *Incubating...
  • NEB
    NEB  回复了帖子 载体平端化 Klenow or T4 polymerase 2291天前
    qijingaaa 您好! 无论是用Klenow或者T4 Polymerase,都可以满足您实验的需要,记得加入足够的dNTP即可。
  • NEB
    NEB  回复了帖子 sal 1 /Xba 1双酶切 2291天前
    liqiaoxin 2141 您好! 如果使用双酶切进行酶切分析,建议根据NEB网站上的Double Digest Finder进行分析,如果其中一个酶需要加BSA,那么整个反应体系加入BSA,对另外一个酶没有影响。 其次,酶切反应中,需要考虑加样顺序,最后加酶,加入之后不能震...
  • NEB
    NEB  回复了帖子 sal 1 /Xba 1双酶切 2291天前
    liqiaoxin2141 您好! dam 甲基化和感受态的批次无关,XbaI的甲基化是要看序列的,如果形成了GATC的甲基化敏感序列,就会受到甲基化影响,需要用甲基化缺失的感受态进行转化后再酶切,否则无法切割。 即dam甲基化是和感受态的类型有关,如果甲基化,需要用甲基化缺...
  • NEB
    NEB  回复了帖子 关于质粒的鉴定 2376天前
    zhoufankun66 您好! 1.根据赠送者的描述,可能该目的基因是通过XhoI单酶切插入的,那么您可以用XhoI单酶切获得您的插入片段; 2.可以在MCS位点之前设计引物进行测序,即可知道是否是您需要的目的基因片段,同时第一步的酶切片段大小也可以作为您判断的一个条件。
  • NEB
    NEB  回复了帖子 MSP阳性对照问题!求解答 2384天前
    56592886 您好! 请您按照以下protocol操作: Protocol Dilute SAM to 1600 μM using the supplied 32 mM stock. a. SAM 32 mM stock 1 μl b. Nuclease free...
  • NEB
    NEB  回复了帖子 PCR Vent酶特性 2384天前
    irenew 您好! Vent 或者 DeepVent 聚合酶的延伸温度是72℃,扩增速度是1kb/min。
  • NEB
    NEB  的帖子被加了1分 2411天前

    回复:【求助】请教 Ligation

  • NEB
  • NEB
    NEB  回复了帖子 急 请教 2439天前
    您没有权限阅读该帖子
  • NEB
    NEB  回复了帖子 NEB T4 DNA聚合酶 削平末端 2502天前
    andreachris 您好! 可以用水浴,可以用金属浴,也可以用PCR仪操作。
  • NEB
    NEB  回复了帖子 NEB T4 DNA聚合酶 削平末端 2507天前
    andreachris 您好! 当用于 3' 突出末端平滑化和 3' 凹陷末端补平时,建议使用下述条件:将 DNA 溶于任何一种 1X 内切酶反应缓冲液中(NEBuffer), 每 1 ug DNA 加入 1 单位 T4 DNA 聚合酶和 100 uM dN...
  • NEB
    NEB  回复了帖子 求助PGL3酶切问题KPN1 MLU1 2509天前
    gunther 您好! 从您的载体酶切胶图以及克隆结果来看,您的载体酶切不完全,因为您载体上这两个酶切位点较近,中间只隔了一个酶切位点,有可能有单酶切,建议您做以下实验进行验证: A.酶切之后直接转化,检测是否还有质粒没有酶切完全; B.酶切之后加连接酶,不加插入片段,连接后...
  • NEB
    NEB  回复了帖子 NheI酶切pcdna3.1+切不开 2523天前
    dvman 您好! 建议您纯化底物,底物纯度越高,酶切效率越高,反应缓冲液是最适反应缓冲液即可。

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