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  • Kris尼莫
    Kris尼莫  回复了帖子 细胞炎症模型建造 304天前
    嗨,我也在做这个细胞抗炎这一块可以交流吗
  • Kris尼莫
    Kris尼莫  回复了帖子 提取的RNA浓度和纯度低 520天前
    请问楼主最后解决了吗?现在在用raw264.7做炎症qPCR和通路那一块,现在出现了有两组RNA浓度过低,只有15左右,但是RT-PCR出来都有900,不知道这样子会不会对我的后续qPCR产生影响,我确定是在同一条件下加的trizol.求大神指点
  • Kris尼莫
    Kris尼莫  :现在在用raw264.7做炎症qPCR和通路那一块,现在出现了有两组RNA浓度过低,只有15左右,但是RT-PCR出来都有900,不知道这样子会不会对我的后续qPCR产生影响,我确定是在同一条件下加的trizol.求大神指点
  • Kris尼莫
    Kris尼莫  回复了帖子 最近提出来的RNA浓度都很低,请大神们指教! 520天前
    请问楼主最后解决了吗,我提出来的RNA并不是全部浓度很低,而是有两组,浓度只有15,不过最后反转录出来都有900左右,不知道会不会对我的qPCR结果产生影响。
  • Kris尼莫
    Kris尼莫  回复了帖子 检测LPS诱导的RAW264.7的上清液的NO! 520天前
    嗯嗯,楼主私信你了,我们可以探讨下这块
  • Kris尼莫
    Kris尼莫  回复了帖子 检测LPS诱导的RAW264.7的上清液的NO! 527天前
    你也在测蛋白和跑电泳吗,我在做炎症因子和炎症通路这一块可否交流?
  • Kris尼莫
    Kris尼莫  发布了新帖 用raw264.7做炎症因子表达qPCR和Western blot信号通路求助 532天前

    求助,我现在做raw264.7,马上要测qPCR了,用的脂多糖刺激产生炎症,现在主要有两个问题!1.这个细胞是否需要饥饿过夜?刺激效果才能更好,给药是用完全培养基配的吗?2。作用时间问题,查了各种文献,什么时间段的都有,并没有太多时间在做预实验上面,请问你们最后成功一般刺激多久,给药多久呢?透露一下,我用的药是多酚一块,抑制炎症的,

  • Kris尼莫
    Kris尼莫  发布了新帖 用raw264.7做炎症因子表达qPCR和Western blot信号通路求助 532天前

    求助,我现在做raw264.7,马上要测qPCR了,用的脂多糖刺激产生炎症,现在主要有两个问题!1.这个细胞是否需要饥饿过夜?刺激效果才能更好,给药是用完全培养基配的吗?2。作用时间问题,查了各种文献,什么时间段的都有,并没有太多时间在做预实验上面,请问你们最后成功一般刺激多久,给药多久呢?透露一下,我用的药是多酚一块,抑制炎症的,只要给我解决问题,散光全部金币,或者发红包也行

  • Kris尼莫
    Kris尼莫  回复了帖子 RAW264.7细胞炎症模型的建立 558天前
    楼主,就是你配置脂多糖,给药时,加不加牛血清?
  • Kris尼莫
    Kris尼莫  回复了帖子 求指点迷津 LPS刺激RAW264.7能测出NO但是测不出TNF-a 576天前
    我也是NO测不出来,正常细胞组和LPS组差异几乎没有,我的脂多糖终浓度为1ug/ml,sigma的0111:B4,试剂盒用的promaga的,就是测不出来
  • Kris尼莫
    Kris尼莫  回复了帖子 RAW264.7细胞炎症模型的建立 583天前
    是不是应该用不含牛血清的培养基来配置脂多糖,还是我哪里出了问题
  • Kris尼莫
    Kris尼莫  回复了帖子 RAW264.7细胞炎症模型的建立 583天前
    楼主,我用的也是用RAW264.7,传到第17代了,用的是sigma的脂多糖0111:B4,剂量为1ug/ml,我是铺板24小时后加药2h,后加终浓度为1ug/ml的用完全培养基配的脂多糖继续孵育22h,测NO,现在的问题是我的炎症模型也没有出来,我的正常细胞组和脂多糖组的OD值差别不大,都是0.15左右,求解答
  • Kris尼莫
    Kris尼莫  回复了帖子 LPS刺激RAW264.7,产生炎症因子时一定要换无血清的培液吗? 583天前
    楼主,我用的是加10%FBS,剂量是1ug/ml的终浓度,发现和正常细胞组的NO含量几乎一样,OD值都为0.15左右,请问你是最后加没加血清做出来的啊

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