登录| 注册

丁香客

选择模板

更多 最新动态

  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 大鼠血清microRNA定量PCR检测的内参 353天前
    组织细胞内参用U6是常规,可是U6在血清中的表达不稳定,做血清的miRNA的内参一般不用U6,天根的KIT好像用5S做内参,你也可以询问一下其他KIT用的什么内参,ABI啊 ,BIODAI啊,其实目前针对血液miRNA仍无有效的内参,正在研究中。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 血清、血浆microrna表达一致性问题 353天前
    可以啊,不过血清比血浆要好一点。其实用试剂盒的话都是差不多的啦,QIAGEN,BIODAI等血清血浆都适用的。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 血清检测microRNA哪家公司的比较实惠又好用的呀 353天前
    QIAGEN啊,BIODAI,天根,ABI等等,市场上相关试剂盒太多啦,可以电话咨询一下选个自己满意的。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 若想提取血清microRNA,标本应如何处理?请各位前辈指教 354天前
    标本多的话提取血清microRNA要先分离然后低温储存,因为血液直接冻存里面的细胞会破碎,然后你最后分离的就不是血清的MIRNA而是混合有血细胞内的MIRNA的血清。血清中的microRNA相对比较稳定,用的时候拿出来直接BIODAI方式提取,还是比较方便的。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 提取血清microRNA,怎么保存标本?直接放在-80?还是抗凝后放入?或是分离后在放入? 354天前
    园子里microRNA提取ABI的用的人比较多,听说还不错,不过我们实验室用BIOG CFRNA EASY KIT试用下来感觉也不错。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 关于microRNA提取的问题? 357天前
    不清楚啊,我只用过QIAGEN和BIODAI做过动物细胞的,植物细胞还没接触过,不过做植物细胞和做动物细胞应该不太一样吧?
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 血浆microRNA提取和定量 357天前
    血清microRNA因为含量极低, 已经超过了吸光值测量机器的灵敏度范围了,所以,无论测量出来是什么值,都不准的,所以,无论你买哪一家的试剂盒,ABI也好,BIODAI也好,包括qiagen的盒子,测量的都不准的,所以做这些微量RNA,是不需要测量浓度的, 不影响下面的实验,PCR能测出来就行了。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 血清microRNA提取后浓度检测的疑问 357天前
    血清RmicroRNA因为含量极低, 已经超过了吸光值测量机器的灵敏度下限了,所以,无论测量出来是什么值,都不准的,吸光值早就超出可测量准确的范围,所以,无论你买哪一家的试剂盒,TIANGEN也好,BIODAI也好,包括进口qiagen的盒子,测量的都不准的测od值都不准,比值自然就不准。所以做这些微量RNA,是不需要测量浓度的, 做下游实验的时候,按照加相同体积往下面做就行了。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 microRNA提取与定量,请各位老师不吝赐教 357天前
    一般MIRNA含量很少,我用QIAGEN或BIODAI提取血清MICRORNA浓度都不是太高,但是不影响后续实验。当然也可以用TRIZOL法,繁琐一点,反正只要最后PCR等能检测出来就行。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 我需要买血液microRNA提取试剂盒 357天前
    一般的KIT最少都是50次反应吧(QIAGEN,BIODAI,TIANGEN小柱子的),20次的都是大柱子了15ML以上了,你可以和别人拼嘛!要不买二手的?
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 microRNA的几个问题 357天前
    我们实验室做血清microRNA提取用BIODAI CFDNA还算可以,比较方便,你也可以用TRIZOL法,稍微繁琐一点。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 血清microRNA提取中的问题 358天前
    血清中RNA本来就少,提取不高本来就正常的,要数据好看就提高样本量。我做血清microrna检测,用kit200ul血清提取出来的浓度在10几,OD比值在1.5?开始也以为不好,后来咨询了BIODAI的技术支持,对方说10几20几的浓度太低,用nanodrop检测出来的基本不可信,因为已经超过了它的灵敏检测范围,所以那个浓度不具有参考价值,所以可以继续做逆转录,PCR能测出来就行。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 血清microRNA 提取浓度一般是多少? 358天前
    我最近也在做血清microrna检测,我用的是试剂盒,用200ul血清提取出来的浓度在10几,OD比值在1.5?开始也以为不好,后来咨询了BIODAI的技术支持,对方说10几20几的浓度太低,用nanodrop检测出来的基本不可信,因为已经超过了它的灵敏检测范围,所以那个浓度不具有参考价值,所以可以继续做逆转录,PCR能测出来就行。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 请教血清microRNA相关问题 358天前
    可以,只要PCR能做出来就行。血清中的microRNA本来就少,浓度和OD值一般都不具参考价值。如果为了数据好看可以增加样本量,用BIODAICFRNA 方法一次可提取1ML血浆样本,可以增加提取RNA的浓度。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 血浆中miRNA提取 358天前
    本来血浆中的RNA就很少,提取出来的浓度低也是正常的,只要你后续做PCR能够测出来就行。如果你需要比较好的实验数据的话,可以提高样本量,用BIODAI CFRNA 方法一次可提取1ML血浆样本,可以增加提取RNA的浓度。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 血浆miRNA提取,哪种试剂盒性价比高? 358天前
    血浆中的RNA比较少,所以提高样本量是个不错的办法,用BIODAI CFRNA ENRI 方法一次可提取1ML血浆样本。可以增加提取RNA的浓度。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 血浆microRNA抽提、检测前期工作(连载。。。) 358天前
    您没有权限阅读该帖子
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 Taqman探针 360天前
    是不是水被污染了?里面有夹杂基因片段?我平时实验用BIODAI SYBR做定量PCR一般没啥问题。实验环节一步不好就会导致整个实验失败,所以操作一定要谨慎。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 RNA提取的一些经验 361天前
    TRIZOL是RNA保护剂,可以延缓RNA降解,在低温下RNA降解速度更慢,在液氮或-80℃中保存一年半载是应该没问题的,但是冻存的时间过长,即使温度很低,RNA也可能降解,所以越早越好。你收集标本,量大的话,不建议用化学法,会很累,可能效果不好且苯酚氯仿气味很大,如果条件允许的话就用kit吧,QIAGEN,BIODAI 都可以,省时省力,同时减少手提中有毒试剂对身体的伤害。
  • D-木棉花
    D-木棉花  回复了帖子 血清总RNA提取方法 361天前
    血清中含有少量游离RNA,因为量少所以常规用TRIZOL抽提可能比较困难,可以试试用BIODAI CFRNA EASY KIT方式,不知道会不会好一点。

关于我们|联系我们|版权声明|资格证书|丁香志|加盟丁香园|友情链接 丁香园旗下网站: 丁香园|丁香通| 人才|会议|药学|博客