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  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 加入武汉市红十字会医院,感受90余年的文化历史底蕴 777天前
    硕士学历药剂科待遇如何?
  • Cara__
    Cara__  悬赏20丁当求助 1039天前

    求脂蛋白脂酶LPL酶活性和FFA测定方法

  • Cara__
    Cara__  发布了新帖 重组蛋白 1041天前

    想了解下重组蛋白是什么,作用是怎样的。我查看文献有在细胞水平用重组蛋白的,有一个问题不太清楚,重组蛋白和转染质粒有什么区别。体内实验,小鼠可用重组蛋白吗?重组蛋白购买或定制,有没有靠谱点的公司推荐 ,谢谢大神们了,求指点。

  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 如何测定脂肪细胞中的脂蛋白脂酶活性 1115天前
    虽然是比较早的帖子了,最近这个问题太困扰我了,不知道楼主能否分享一下,测LPL活性的方法,和测FFA得方法,十分感谢~
  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 求脂蛋白脂酶LPL酶活性和FFA测定方法 1115天前
    12. Nilsson-Ehle, P., and Schotz, M. C. (1976) J. Lipid Res. 17, 536–54113. Berbee, J. F., van der Hoogt, C. C., Sundararaman, D., Havekes, L. M., andRensen, P. C. (2005) J. Lipid Res. 46, 297–306文中提到的参考文献12,13,都是比较早的文献了。
  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 求脂蛋白脂酶LPL酶活性和FFA测定方法 1115天前
    LPL activity was measuredusing a modification of the procedure described by Nilsson-Ehle and Schotz (12). LPL activity in adenovirus-injectedmouse plasma was determined by incubating 7.5 l of postheparinplasma with radiolabeled substrate composed of 9,10-[3H](N)triolein (American Radiolabeled Chemicals), triolein,and phosphatidylcholine (Sigma). T
  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 脂蛋白酯酶基因敲除小鼠与FFA 1115天前
    楼主你好,我最近也需要测LPL活性和FFA,请问你是怎么测得?可以分享一下吗?十分感谢
  • Cara__
    Cara__  发布了新帖 脂蛋白脂酶LPL测定方法 1115天前

    大家好,查了一些文献,说是用自由脂肪酸的量来反应LPL酶活性,还有些不太明白的,想请教一下大家。 我现在在做一个基因某位点的突变,想知道其突变后对LPL酶活性有什么影响。 选用的细胞是293t细胞,基因突变后转染进细胞,让其表达。 但是293t细胞本身不表达LPL酶, 我想知道,这种情况下,我是该加入什么来检测LPL酶。 谢谢大家~

  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 flag标签加在分泌蛋白目的基因N端,是否会被剪切掉 1120天前
    谢谢您的建议。第一个的问题是,这个基因的突变木有人做过,所以没法参考。第二个您说的NC各做一个,我试试。还有个问题想请教下您,这个基因在中间一个位点突变后,为终止密码子,您觉得是否可以直接把突变以后的序列直接去掉,来构建质粒。
  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 flag标签加在分泌蛋白目的基因N端,是否会被剪切掉 1123天前
    因为后面要做突变,突变位点突变成了终止密码子,所以没有选择加C端,或者是否可以直接把突变后的终止密码子后面的全部去掉,flag加在C端,来构建质粒,谢谢大家
  • Cara__
    Cara__  发布了新帖 flag标签加在分泌蛋白目的基因N端,是否会被剪切掉 1123天前

    请问大家,质粒构建的时候flag标签加在目的基因N端,目的蛋白为分泌蛋白,flag是否会被剪切掉,而导致检测不到flag,谢谢~

  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 求助如何选择质粒载体 1125天前
    谢谢您的回复,我是想选用pcDNA3.1,现在又有新的问题,就是我要加目的基因和一个标签GFP,目的基因及酶切位点暂时已经确定,但是GFP我想让它在C端表达,不知道该怎么加…
  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 求助如何选择质粒载体 1127天前
    联系了一些公司,公司的人要我自己确定启动子,剪切位点什么,我不太明白这些该怎么确定。谢谢大家
  • Cara__
    Cara__  发布了新帖 求助如何选择质粒载体 1127天前

    各位大神好,最近想构建质粒,目的基因cDNA已确定,之前也有文献做过这个基因,采用的是慢病毒质粒,我现在想用普通的质粒试一试,在选择质粒的时候,我不是很清晰。我的目的是想让这个基因转染入细胞或者小鼠,然后让其表达,看其表达后对其他蛋白的影响。当然后面还会做突变,这都是后话,现在的问题是,我不知道如何选择质粒载体,求助~

  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 如何测胞内甘油三酯含量? 1147天前
    楼主,你好,请问你后来是怎么解决测甘油三酯的呢?最近刚接触,有些想问你的。
  • Cara__
    Cara__  回复了帖子 福利来了,293细胞培养心得 1228天前
    楼主 我最近需要把质粒转到293细胞里面,但是我从来没养过293,认真看完了你的贴,再请教一下,具体培养基的成分及比例,谢谢~
  • Cara__
    Cara__  加入了调查派 1247天前

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